松材线虫快速分离技术的薄片洗涤法制造技术

本发明专利技术涉及一种松材线虫快速分离技术的薄片洗涤法，通过取样制取薄木片，然后进行泡水、冲洗和过滤，最后进行解剖镜观察和线虫的显微形态鉴定，作出准确鉴定。利用本发明专利技术使松材线虫的分离时间缩短至１－５ｍｉｎ，分离速度提高数百倍，本发明专利技术简单实用、投资少，利用现有分离线虫的工具就能开展工作，提高了线虫的检出率和检疫检验工作的效率，大大加快了木材产品和木包装货物的通关过卡速度。

【技术实现步骤摘要】
松材线虫快速分离技术的薄片洗涤法
本专利技术属于病虫防治检疫
，涉及一种松材线虫快速分离技术的薄片洗涤法。
技术介绍
松材线虫是世界公认的松林头号杀手，是国际性森林检疫病虫，松材线虫通过松墨天牛补充营养的伤口进入木质部，寄生在树脂道中，在大量繁殖的同时移动，逐渐遍及全 株，并导致树脂道薄壁细胞和上皮细胞的破坏和死亡。松树一旦感染松材线虫，最快40多 天即枯死，松林从发病到毁灭只需3-5年时间。故松材线虫又有松林头号杀手之称，由于目 前国内外尚没有有效的防治方法，因此松材线虫病又称“松材癌症。松材线虫在我国的传 播、蔓延势头，已引起党中央、国务院领导的高度重视，2002年国务院办公厅为此专门发出 《关于进一步加强松材线虫病预防和除治工作的通知》；但是，近十几年来，松材线虫在我国 的传播、扩散速度之快，令人担忧！据国家林业局报告，目前松材线虫病已蔓延至12个省 123个县，造成直接经济损失近30亿元，间接经济损失近千亿元，严重威胁我国5亿多亩松 林的安全。这种状况若继续发展，将对我国的生态安全构成严重威胁，后果不堪设想！大量 事实证明，染病的松木及其制品(木包装箱、木托盘等)是传播松材线虫的载体；防止松材 线虫远距离传播的措施之一，是事半功倍的检疫工作。我国检验检疫部门、林业检疫部门， 现行分离松材线虫的时间，普遍在6-12小时以上，如中国03103072. 6所涉及的松材线虫的 分离装置及检测方法，虽然能将分离工作得以在20 30分钟之内完成，但几十分钟的分离 检验时间太长，检疫影响了检验工作的效率及木材产品和木包装货物的通关过卡速度，同 时整套设备的价格昂贵而难以普及。由于现有技术分离线虫的速度慢、时间长，检疫部门不 能快速得出检验结果，使进口货物不能得到及时处理，影响了货物的转运和使用，增加了企 业运作的成本，同时由于进口木包装需长时间停留在口岸等候检疫结果，也会为松材线虫 的人为传播提供机会。因此，探索松材线虫的快速分离技术，加强检疫工作，遏制松材线虫 远距离传播，十分迫切。
技术实现思路
为了克服现有技术的上述缺点，本专利技术提供一种使松材线虫的分离时间缩短至 l-5min内，具有简单实用、投资少、检验成本低、线虫的检出率高和检疫检验工作的效率高 的松材线虫快速分离技术的薄片洗涤法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是一种松材线虫快速分离技术的薄片 洗涤法，其步骤是第一步是取样，选取长8-12cm、宽6_8cm、厚2cm、重20_100g的木材样品一块，木块 重量最少有20-50克，检测其水分含量；第二步是制取薄木片，用刀具将木块劈成0. I-Icm厚的薄木片，薄木片的最佳厚 度为 0. 1-0. 3cm ；第三步是泡水和冲洗，在常温下，将薄木片放入容器中，加水盖过薄木片，在泡水 的过程中不断地进行搅拌和冲洗，时间控制在l-5min内，然后提取冲洗液；第四步是过滤，将冲洗液倒进两层线虫筛进行过滤，两层线虫筛的上层筛孔为 120-300目、下层筛孔为500目，然后将下层筛底液移至培养皿，下层筛底液占培养皿体积 的 1/3 ；第五步是用解剖镜观察培养皿中是否有线虫，当观察到培养皿中有线虫时，用移液器将线虫移到载玻片上，盖上盖玻片进行显微形态鉴定；当不能对线虫作出准确鉴定时， 则用移液器将线虫吸入塑料指头瓶，送专家鉴定。所述木块在劈成薄木片时，每块薄木片至少有1/4以上的表面没有受到刀具的破 坏。所述水温度为25-38°C。本专利技术的有益效果是利用本专利技术使松材线虫的分离时间缩短至l-5min，分离速 度提高数百倍，本专利技术简单实用、投资少，其检验成本低，不需专用设备，利用现有分离线虫 的工具就能开展工作，提高了线虫的检出率和检疫检验工作的效率，大大加快了木材产品 的流通和木包装货物的通关过卡速度。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进一步说明一种松材线虫快速分离方法，取长8-12cm、宽6_8cm、厚2cm、重30_100g的木材样 品一块，用刀具将木块劈成0. 1-0. 3cm或0. 4-0. 6cm厚的薄木片；在常温下，将薄木片放入 容器中，加水盖过薄木片，最佳水温度为25-38°C，在泡水过程中进行搅拌和冲洗l-5min ； 将冲洗液倒进两层线虫筛进行过滤，两层线虫筛的上层筛孔为120-300目、下层筛孔为500 目，然后将下层筛底液移至培养皿中，下层筛底液占培养皿体积的1/3 ；用解剖镜观察是否 有线虫，然后用移液器将线虫移到载玻片，当观察到培养皿中有线虫时，盖上盖玻片进行显 微形态鉴定；若不能作出准确鉴定，用移液器将线虫吸入塑料指头瓶，送专家鉴定。通过将木块劈成薄木片，使寄生在脂道薄壁细胞和上皮细胞的线虫裸露在薄木片 的表面。木块在劈成薄木片时，每块薄木片至少有1/4以上的表面没有受到刀具的破坏，这 部分木片表面上的线虫将保持完整形态依附或裸露在薄木片的表面，配合用水浸泡、冲洗 和搅拌等技术处理，薄木片表面的线虫将脱落游离水中，达到快速从木片中分离线虫的效^ ο试验一采用不同厚度木片样品(0. 1-0. 3cm与0. 4-0. 6cm)浸泡洗涤分离线虫，重 复检验10个样品，观察结果。试验二 采用不同温度的水浸泡样品(5°C、10°C、15°C、20°C、25°C、3(rC )，洗涤分离线虫，重复检验3次，观察结果。试验三采用不同时间(5、30、60、180、360、720、1440min)分离线虫，重复检验2次，观察分离结果。试验四对比不同样品Imin内线虫溢出量。试验五同一样品分别用电动锯切片与人工用柴刀制片，浸泡、洗涤分离线虫，重 复检验5次，观察对比线虫溢出量。试验六同种样品浸泡后分别用不同方法处理(不作技术处理或立即实施搅拌、冲洗处理)lmin，分离线虫，观察线虫溢出量。上述每一样品均取50g，采用本专利技术对300木材样品进行线虫分离试验，试验结果 表明样品能在经l-5min的技术处理后，分离出线虫的占99%，对含有松材线虫的150 个木材样品进行线虫快速分离试验，结果100%的木材样品都能在经l-5min的技术处理后 分离出部分线虫(约占木材样品线虫总量的25%以上)。对试验结果进行分析1、木片厚度对线虫溢出量的影响见表1，从表1可以看出， 木片厚度影响线虫的溢出量，0. 1-0. 3cm木片厚度样品，比0. 4-0. 6cm木片厚度样品线虫的 溢出量多40%以上。表1不同厚度木片线虫溢出量比较<table>table see original document page 5</column></row><table>2水温对线虫溢出量的影响从表2可以看出，水温对线虫溢出量的影响甚微，试验 表明，3°C -38°C的水温都能分离出线虫。表2不同温度线虫溢出量比较<table>table see original document page 5</column></row><table>3泡水时间长短的影响从表3可以看出，样品泡水时间长短对线虫溢出量有影响， 线虫溢出量有随泡水时间的延长而增加的趋势。表3不同泡水时间线虫溢出量比较<table>table see origi本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种松材线虫快速分离技术的薄片洗涤法，其特征在于步骤是：第一步是取样，选取长８－１２ｃｍ、宽６－８ｃｍ、厚２ｃｍ、重２０－１００ｇ的木材样品一块，检测其水分含量；第二步是制取薄木片，用刀具将木块劈成０．１－１ｃｍ厚的薄木片；第三步是泡水和冲洗，将薄木片放入容器中，加水盖过薄木片，在泡水的过程中不断地进行搅拌和冲洗，时间控制在１－５ｍｉｎ内，然后提取冲洗液；第四步是过滤，将冲洗液倒进两层线虫筛进行过滤，两层线虫筛的上层筛孔为１２０－３００目、下层筛孔为５００目，然后将下层筛底液移至培养皿中；第五步是用解剖镜观察培养皿中是否有线虫，先用解剖镜观察培养皿中是否有线虫，当观察到培养皿中有线虫时，用移液器将线虫移到载玻片上，盖上盖玻片，进行显微形态鉴定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王进福，
申请(专利权)人：王进福，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]