一种抗制造技术

本发明专利技术属于抗体偶联药物领域，提供了与

【技术实现步骤摘要】
一种抗SN38单抗及其应用


[0001]本专利技术属于抗体偶联药物领域，具体而言，本专利技术中的一系列抗体能特异性地结合 SN38
小分子药物，以及涉及这些抗体在抗体偶联药物临床和非临床药物开发中的应用
。

技术介绍

[0002]SN
‑
38
是一种抗肿瘤药物
。
它是伊立替康
(
一种类似喜树碱的拓扑异构酶
I
抑制剂
)
的活性代谢物，但其活性是伊立替康本身的
1000
倍
, 其与拓扑异构酶Ⅰ及
DNA
形成的复合物能引起
DNA
单链断裂，阻止
DNA
复制及抑制
RNA
合成，为细胞周期
S
期特异性
。
拓扑异构酶
I
在多种肿瘤细胞如结肠癌
、
宫颈癌
、
卵巢癌中有高表达，含量大大高于正常组织或细胞的含量，并且在
S
期肿瘤细胞中活性大幅提高，因此针对拓扑异构酶
I
的活性抑制剂可选择性抑制增殖期肿瘤细胞
DNA
复制
。SN38
小分子可被用作抗体
‑
药物偶联物（
ADC
）的细胞毒性组分，用于治疗多种类型的癌症
。ADC
经靶点介导的内吞作用进入细胞内
。ADC
在溶酶体中被组织蛋白酶切断连接子，释放出毒性小分子，达到特异性杀灭肿瘤细胞的作用，同时避免对正常细胞造成损伤
。
[0003]然而，现有技术中缺乏可以有效应用于抗体偶联药物研发领域，特别是应用于抗体偶联药物的药代动力学分析及免疫原性分析等的特异性识别
SN38
的抗体，同时也缺少研究这些内容的方法
。

技术实现思路

[0004]为解决现有技术的不足，本专利技术提供了特异性识别
SN38
小分子的单克隆抗体，可以广泛应用于抗体偶联药物研发领域，特别是应用于抗体偶联药物的药代动力学分析及免疫原性分析
。
[0005]本专利技术提供了抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和
/
或轻链可变区；所述重链可变区包括
HCDR1、HCDR2
和
HCDR3
，所述
HCDR1
氨基酸序列如
SEQ ID No. 1
所示，所述
HCDR2
氨基酸序列如
SEQ ID No. 2
所示，所述
HCDR3
氨基酸序列如
SEQ ID No.3
所示；所述轻链可变区包括
LCDR1、LCDR2
和
LCDR3
，所述
LCDR1
氨基酸序列如
SEQ ID No. 4
所示，所述
LCDR2
氨基酸序列如
SEQ ID No. 5
所示，所述
LCDR3
氨基酸序列如
SEQ ID No.6
所示
。
[0006]抗体的抗原结合片段可以通过化学试剂和基因工程的方法获得
。
化学试剂片段是通过打断铰链区的二硫键或者是用蛋白酶，包括胃蛋白酶和木瓜蛋白酶，消化抗体后产生的
。
基因工程产生的片段提供大量的片段，每一个都能有特异性的结合区和功能特质
。
[0007]免疫球蛋白轻链和重链靠近
N
端氨基酸序列变化较大的区域称为可变区，可变区（
variable region
，
V
区） 位于轻链靠近
N
端的
1/2
（约含
108
～
111
个氨基酸残基）和重链靠近
N
端的
1/5
或
1/4
（约含
118
个氨基酸残基）
。
每个可变区中均有一个由链内二硫键连接形成的肽环，每个肽环约含
67
～
75
个氨基酸残基
。
可变区氨基酸的组成和排列随抗体结合抗原的特异性不同有较大的变异
。
由于可变区中氨基酸的排列顺序千变万化，故可形成许多种
具有不同结合抗原特异性的抗体
。
[0008]重链可变区和轻链可变区中各含有3个氨基酸组成和排列顺序高度可变的区域，称为高变区（
hypervariable region
，
HVR
）或互补决定区（
complementarity determining region
，
CDR
）， 包括
HVR1
（
CDR1
）
、HVR2
（
CDR2
）和
HVR3
（
CDR3
），其中，
HVR3
（
CDR3
）变化程度更高
。
重链可变区的3个高变区分别位于
29
～
31、49
～
58
和
95
～
102
位氨基酸，而轻链可变区的3个高变区分别位于
28
～
35、49
～
56
和
91
～
98
位氨基酸
。
重链可变区和轻链可变区的3个
CDR
共同组成
Ig
的抗原结合部位（
antigen
‑
binding site
），决定抗体的特异性，是抗体识别及结合抗原的部位
。
在可变区中，
CDR
之外区域的氨基酸组成和排列顺序相对保守，称为骨架区（
framework region
，
FR
）
。
[0009]SN38
为伊立替康（
Irinotecan
）的代谢产物，伊立替康为半合成水溶性喜树碱类衍生物
。SN38
为
DNA
拓扑异构酶Ⅰ抑制剂，其与拓扑异构酶Ⅰ及
DNA
形成的复合物能引起
DNA
单链断裂，阻止
DNA
复制及抑制
RNA
合成，具有细胞周期
S
期特异性
。
[0010]本专利技术的抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段，重链可变区
HCDR1、HCDR2
和
HCDR3
的氨基酸序列分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和
/
或轻链可变区；所述重链可变区包括
HCDR1、HCDR2
和
HCDR3
，所述
HCDR1
氨基酸序列如
SEQ ID No. 1
所示，所述
HCDR2
氨基酸序列如
SEQ ID No. 2
所示，所述
HCDR3
氨基酸序列如
SEQ ID No.3 所示；所述轻链可变区包括
LCDR1、LCDR2
和
LCDR3
，所述
LCDR1
氨基酸序列如
SEQ ID No. 4
所示，所述
LCDR2
氨基酸序列如
SEQ ID No. 5
所示，所述
LCDR3
氨基酸序列如
SEQ ID No.6
所示
。2.
如权利要求1所述的抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗
SN38
单克隆抗体重链可变区的氨基酸序列如
SEQ ID No. 7
所示，轻链可变区的氨基酸序列如
SEQ ID No. 8
所示
。3.
根据权利要求
1~2
任一项所述的抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述的抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段包括鼠
、
人
、
兔或猴抗体恒定区，所述鼠抗体恒定区包括鼠
IgG1, IgG2A, IgG2B, IgG2C 或
IgG3
的重链恒定区和
κ
或
λ
型轻链恒定区，所述人抗体恒定区包括人
IgG1、IgG2、IgG3
或
IgG4
的重链恒定区和
κ
或
λ
型轻链恒定区
。4.
根据权利要求
1~2
任一项所述的抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段的结构选自免疫球蛋白
、Fab、Fab
’
、F(ab
’
)2、
和
Fv
；所述
Fv
结构选自
ScFv、
双特异抗体
、
三特异抗体
、
四特异抗体
、
双
‑
scFv、mini
抗体
、Fab2、
和
Fab3。5.
根据权利要求1所述的抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗
SN38
单克隆抗体重链氨基酸序列如
SEQ ID No. 9
所示，轻链氨基酸序列如
SEQ ID No. 10
所示
。6.
一种核酸，其特征在于，所述核酸编码权利要求
1~5
任一项所述的抗
SN38
单克隆抗体或其抗原结合片段
。7.
一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括如权利要求6所述的核酸
。8.
一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含有权利要求7所述的表达载体或其重组有权利要求6所述的核酸
。9.
一种试剂盒，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：方鹏，孙小伟，游猛，曹雨霞，施磊，冯庆君，朱晓红，
申请(专利权)人：迈威上海生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：