一种抗巴比妥类化合物抗体制造技术

本发明专利技术公开了一种抗巴比妥类化合物抗体

【技术实现步骤摘要】
一种抗巴比妥类化合物抗体、检测巴比妥类药物的试剂和试剂盒


[0001]本专利技术涉及抗体
，具体而言，涉及一种抗巴比妥类化合物抗体
、
检测巴比妥类药物的试剂和试剂盒
。

技术介绍

[0002]巴比妥类化合物
(Barbiturates
，
BAR)
，包括巴比妥
(barbital)、
苯巴比妥
(phenobarbital)、
异戊巴比妥
(amobarbital)、
司可巴比妥
(secobarbital)、
硫喷妥
(thiopental)
以及美索比妥
(methohexital)
等，是一类作用于中枢神经系统的镇定剂，在临床上的应用范围广泛
。
巴比妥类药物具有成瘾性
、
依赖性，且其治疗剂量与中毒剂量较为接近，一般成瘾剂量为治疗量的4～
50 倍，应用5～
10
倍催眠量时，可引起中度中毒，
10
～
15
倍则引起重度中毒，血药浓度高于 8
～
10mg/100ml
时，就有生命危险
。
因此在临床上已逐渐被苯二氮卓类药物取代
。
巴比妥类药物在涉毒案例的鉴定中有着较高的检出率，尤其是苯巴比妥
。
生物检材中巴比妥类药物的定性和定量分析在临床毒物分析及法医毒物分析领域中也见有较多的应用与报道
。
由于其具有成瘾性
、
依赖性，所以国家相关部门将其列为毒品行列
。
为遏制药物滥用行为，各国政府发布严禁使用巴比妥类药物相关公告，同时致力于其检测方法的研究
。
[0003]巴比妥类药物的传统检测方法主要有高效液相色谱法
(HPLC)、
气相色谱
‑
质谱联用法
(GC
‑ꢀ
MS)、
液相色谱
‑
高分辨质谱法
(LC
‑
HRMS)
等，主要研究血液
、
尿液
、
毛发等生物样品
。
经实践证实，以上的方法均存在灵敏度偏低，生物检材用量大，分析时间长等缺点，对操作人员的技术要求高，费时费力，费用昂贵，无法在生产中推广与应用，因此难以满足临床上及司法鉴定中对于此类药物的检测，及要求灵敏
、
简单
、
快速
、
准确的分析需求
。
[0004]免疫学检测方法是基于抗体和抗原的特异性反应进行检测的一种手段，由于其可以利用同位素
、
酶
、
化学发光物质等对被检测信号进行放大和显示，因此常被用于检测蛋白质，激素等微量生物活性物质
。
免疫学检测方法都需要针对于巴比妥类化合物的抗体
。
因此，本领域对于有效且结合巴比妥类化合物并对其进行检测的抗体存在着强烈需求
。
[0005]鉴于此，特提出本专利技术
。

技术实现思路

[0006]本申请提供一种亲和力和
/
或活性改善的抗巴比妥类化合物抗体，以改善巴比妥类化合物的检测，为巴比妥类化合物的检测提供重要的原料来源
。
[0007]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
至
SEQ ID NO:3
所示的
HCDR1、HCDR2、HCDR3
，和氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
或
15
所示的
LCDR1、
氨基酸序列如
SEQ ID NO:5
所示的
LCDR2、
氨基酸序列如
SEQ ID NO:6
所示的
LCDR3。
[0008]为了实现上述目的，根据本专利技术的第二个方面，提供了一种抗巴比妥类化合物抗
体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和
/
或轻链可变区，所述重链可变区含有
HFR1
‑ꢀ
HCDR1
‑
HFR2
‑
HCDR2
‑
HFR3
‑
HCDR3
‑
HFR4
的序列结构，所述轻链可变区区含有
LFR1
‑
LCDR1
‑ꢀ
LFR2
‑
LCDR2
‑
LFR3
‑
LCDR3
‑
LFR4
的序列结构，所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、 LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列为上述的
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列
。
[0009]为了实现上述目的，根据本专利技术的第三个方面，提供了一种抗巴比妥类化合物抗体，包括重链和
/
或轻链，所述重链包括上述的重链可变区，所述轻链包括上述的轻链可变区
。
[0010]为了实现上述目的，根据本专利技术的第四个方面，提供了一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括上述的抗体或其功能性片段
。
[0011]为了实现上述目的，根据本专利技术的第五个方面，提供了一种检测巴比妥类化合物的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括上述的抗体或其功能性片段或上述的抗体偶联物
。
[0012]为了实现上述目的，本专利技术还提供了一种载体
、
一种细胞及一种制备上述抗体或其功能性片段的方法
。
附图说明
[0013]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图
。
[0014]图1为
Anti
‑
BAR
‑
30R5mut1
至
Anti
‑
BAR
‑
30R5mut6
的还原性
SDS
‑
PAGE
的结果
。
具体实施方式
[0015]本专利技术提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ IDNO:1
至
SEQ ID NO:3
所示的
HCDR1、HCDR2、HCDR3
，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种抗巴比妥类化合物抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
至
SEQ ID NO:3
所示的
HCDR1、HCDR2、HCDR3
，和氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
或
15
所示的
LCDR1、
氨基酸序列如
SEQ ID NO:5
所示的
LCDR2、
氨基酸序列如
SEQ ID NO:6
所示的
LCDR3。2.
根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:7
至
SEQ ID NO:10
所示的
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4
和氨基酸序列如
SEQ ID NO:11
至
SEQ ID NO:14
所示的
LFR1、LFR2、LFR3
和
LFR4
，或与所述各序列具有至少
80
％同一性的氨基酸序列；可选地，所述抗体或其功能性片段的
HFR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:16
所示；可选地，所述抗体或其功能性片段的
HFR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:17
所示；可选地，所述抗体或其功能性片段的
LFR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:18
所示；可选地，所述抗体或其功能性片段的
LFR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:19
所示；可选地，所述抗体或其功能性片段以
KD≤7.09
×
10
‑9M
的亲和力结合巴比妥类药物
。3.
一种抗巴比妥类化合物抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和
/
或轻链可变区，所述重链可变区含有
HFR1
‑
HCDR1
‑
HFR2
‑
HCDR2
‑
HFR3
‑
HCDR3
‑
HFR4
的序列结构，所述轻链可变区区含有
LFR1
‑
LCDR1
‑
LFR2
‑
LCDR2
‑
LFR3
‑
LCDR3
‑
LFR4
的序列结构，所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列为权利要求1所述的
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列，所述
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4
的氨基酸序列为权利要求2所述的
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4
的氨基酸序列；可选地，所述重链可变区氨基酸序列如
SEQ ID NO:22
至
25
任一所示；可选地，所述轻链可变区氨基酸序列如
SEQ ID NO:26
至
33
任一所示
。4.
根据权利要求1至3任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；可选地，所述恒定区包括重链恒定区和
/
或轻链恒定区；可选地，所述重链恒定区选自
IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE
或
IgD
的重链恒定区；所述轻链恒定区选自
κ
型或
λ
型轻链恒定区；可选地，所述恒定区的种属来源为牛
、
马
、
猪
、
绵羊
、
山羊
、
大鼠
、
小鼠
、
狗
、
猫
、
兔
、
驴
、
鹿
、
貂
、
鸡
、
鸭
、
鹅或人；可选地，所述恒定区的种属来源为鼠；可选地，所述重链恒定区序列如
...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟媛，钟冬梅，唐丽娜，黄玉玲，
申请(专利权)人：东莞市朋志生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：