【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药领域，具体地，涉及包含靶向pd-l1和cd47的双特异性抗体的药物组合物，尤其是稳定的高浓度液体抗体组合物，以及该组合物的治疗用途。
技术介绍
1、双特异性抗体作为生物大分子，结构复杂，在生产和贮存过程中，会发生聚集、变性、沉淀等物理变化及异构化、脱酰胺和氧化等化学变化。这些改变会影响产品的安全性及有效性。
2、由此，一种稳定的药物组合物制剂有待研究。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种特异性结合pd-l1和cd47的双特异抗体的药物组合物，该组合物在高浓度双特异抗体条件下具有良好的稳定性。
2、cd47是整合素相关蛋白，广泛的表达于细胞表面，可与信号调节蛋白α(sirpα)、血小板反应蛋白以及整合素相互作用，介导细胞凋亡、增值、免疫等一系列反应。研究发现，cd47是一种“自我”信号，代表“别吃我”。cd47可以与巨噬细胞表面的信号调节蛋白(sirpα)结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。由于cd47广泛表达于多种肿瘤细胞，肿瘤细胞可以通过cd47-sirpα信号通路逃过巨噬细胞的吞噬，因此可以通过cd47抗体从而阻断cd47与sirpα的结合可以激活巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用。
3、pd-l1(细胞程序性死亡-配体1)是大小为40kda的第一型跨膜蛋白。pd-l1能与t细胞上的受体pd-1相互作用，从而抑制t细胞的活化，引起t细胞的凋亡，在免疫应答负调控
4、人源化抗cd47/pd-l1双特异性抗体既可以通过阻断pd-1/pd-l1，激活t细胞分辨及杀灭肿瘤细胞，又可以通过阻断cd47/sirpα的结合，促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞，发挥抗肿瘤作用。专利技术人对该抗体的制剂进行大量的研究和实验，获得了本专利技术实施例的液体抗体组合物，该组合物配方简单，蛋白体系稳定，便于大规模生产、贮存和运输。
5、因而，根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种液体抗体组合物。根据本专利技术的实施例，该组合物包括：靶向pd-l1和cd47的双特异性抗体；酸性缓冲液；稳定剂，所述稳定剂为糖类或多元醇；聚山梨酯类表面活性剂；且ph为5.5-6.5，优选地，为5.5-6.0，其中，所述靶向pd-l1和cd47的双特异性抗体包括两条重链和两条轻链，其中，第一重链可变区为抗cd47单克隆抗体的重链可变区、其能够与轻链可变区形成cd47结合位点，第二重链可变区为抗pd-l1单克隆抗体的重链可变区、其能够与轻链可变区形成pd-l1结合位点；其中，所述两条轻链的轻链可变区的序列相同，并且，所述轻链可变区是基于抗cd47单克隆抗体的轻链和抗pd-l1单克隆抗体的轻链得到的，且所述轻链可变区与所述第一重链可变区形成的第一可变区结合位点与cd47特意性结合，且所述轻链可变区与所述第二重链可变区相匹配形成的第二可变区结合位点与pd-l1特意性结合。
6、根据本专利技术实施例的液体抗体组合物，配方简单，来源丰富，为生物制剂常用辅料，并且，本专利技术实施例的液体抗体组合物的配方蛋白体系稳定，能够有效防止蛋白聚集、降解、氧化及变性等、从而保持其有效成分的生物学活性，成本低廉，便于大规模生产、贮存和运输。
7、另外，根据本专利技术上述实施例的液体抗体组合物还可以具有如下附加的技术特征：
8、根据本专利技术的实施例，所述靶向pd-l1和cd47的双特异性抗体的浓度为10-100mg/ml，优选地，为30-80mg/ml。
9、根据本专利技术的实施例，所述酸性缓冲液选自柠檬酸缓冲液、醋酸缓冲液和组氨酸缓冲液中的至少一种，优选地，为组氨酸缓冲液。
10、根据本专利技术的实施例，所述酸性缓冲液的浓度为5-25mm，优选地，为10-20mm。
11、根据本专利技术的实施例，所述糖类为蔗糖或海藻糖，优选地，为蔗糖，所述多元醇为甘露醇或山梨醇。
12、根据本专利技术的实施例，所述糖类稳定剂的浓度为3％-9％(w/v)，优选地，为5％(w/v)。
13、根据本专利技术的实施例，所述表面活性剂聚山梨酯20或聚山梨酯80。
14、根据本专利技术的实施例，所述表面活性剂的浓度为0.02％-0.06％(w/v)，优选地，为0.02％-0.04％(w/v)。
15、根据本专利技术的实施例，所述第一重链可变区包括：重链cdr1，包括x1yx2mx3，其中x1选自n、s，x2选自v、a，x3选自h、s；重链cdr2，包括yinpx4nx5x6ikynekfx7g，其中x4选自y、g，x5选自d、e，x6选自g、a，x7选自t、q；重链cdr3，包括egdfyanygrlgfx8y，其中x8选自a、d；并且，轻链cdr1，包括rasqdix9nyln，其中x9选自s、t；轻链cdr2，包括ytsrlx10s，其中x10选自h、q、s；轻链cdr3，包括qqgx11x12x13px14t，其中x11选自d、a，x12选自t、g，x13选自f、r、y、k、s、e、n，x14选自y、r。
16、根据本专利技术的实施例，所述重链cdr1具有seq id no:31、32、33或45所示的序列；所述重链cdr2具有seq id no:34、35、36、37、38或39所示的序列；所述重链cdr3具有seq idno:40或41所示的序列。
17、根据本专利技术的实施例，所述第一重链包括seq id no:5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18或19所示的氨基酸序列。
18、根据本专利技术的实施例，所述第二重链可变区包括seq id no:42所示的cdr1，seqid no:43所示的cdr2和seq id no:44所示的cdr3。
19、根据本专利技术的实施例，所述轻链具有seq id no:1、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30所示的序列。
20、根据本专利技术的实施例，所述第一重链的fc段包含h315r突变、所述第二重链的fc段包括k319e突变，所述fc段氨基酸突变位点使用kabat的eu编号系统。
21、根据本专利技术的实施例，该组合物包括：10-80mg/ml所述靶向pd-l1和cd47的双特异性抗体；5-25mm所述组氨酸缓冲液；3％-9％(w/v)所述蔗糖；0.02％-0.06％(w/v)所述聚山梨酯20，且ph为5.5-6.0。
22、根据本专利技术的实施例，该组合物包括；30mg/ml所述靶向pd-l1和cd47的双特异性抗体；20mm组氨酸；5％蔗糖；0.03％聚山梨酯20；且ph为5.5-6.0。
23、根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种固体抗体组合物。根据本专利技术的实施例本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种液体抗体组合物，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述靶向PD-L1和CD47的双特异性抗体的浓度为10-100mg/ml，优选地，为30-80mg/ml。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述酸性缓冲液选自柠檬酸缓冲液、醋酸缓冲液和组氨酸缓冲液中的至少一种，优选地，为组氨酸缓冲液。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述酸性缓冲液的浓度为5-25mM，优选地，为10-20mM。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述糖类为蔗糖或海藻糖，优选地，为蔗糖，所述多元醇为甘露醇或山梨醇。
6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述糖类稳定剂的浓度为3％-9％(w/v)，优选地，为5％(w/v)。
7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述表面活性剂为聚山梨酯-20、聚山梨酯-80、聚山梨酯-60或聚山梨酯-40，优选地，为聚山梨酯-20或聚山梨酯-80。
8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述表面活性剂的浓度为0
9.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述第一重链可变区包括：
10.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述重链CDR1具有SEQ ID NO:31、32、33或45所示的序列；
11.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述第一重链包括SEQ ID NO:5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18或19所示的氨基酸序列。
12.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述第二重链可变区包括SEQ ID NO:42所示的CDR1，SEQ ID NO:43所示的CDR2和SEQ ID NO:44所示的CDR3。
13.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述轻链具有SEQ ID NO:1、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30所示的序列。
14.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述第一重链的Fc段包含H315R突变、所述第二重链的Fc段包括K319E突变，所述Fc段氨基酸突变位点使用Kabat的Eu编号系统。
15.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，包括：
16.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，包括；
17.一种固体抗体组合物，其特征在于，所述固体抗体组合物是通过固化权利要求1-16中任一项所述的液体抗体组合物而获得的。
18.根据权利要求17所述的固体抗体组合物，其特征在于，所述固化为冻干处理。
19.一种递送装置，其特征在于，包括权利要求1-16中任一项所述的液体抗体组合物或权利要求17所述的固体抗体组合物。
20.权利要求1-16中任一项所述的液体抗体组合物或权利要求17所述的固体抗体组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
21.根据权利要求20所述的用途，其特征在于，所述肿瘤包括黑色素瘤、肺癌、肾癌、霍奇金淋巴瘤、头颈鳞癌、尿路上皮癌、急慢性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、直肠癌、前列腺癌、肾癌和多发性骨髓瘤。
...【技术特征摘要】
1.一种液体抗体组合物，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述靶向pd-l1和cd47的双特异性抗体的浓度为10-100mg/ml，优选地，为30-80mg/ml。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述酸性缓冲液选自柠檬酸缓冲液、醋酸缓冲液和组氨酸缓冲液中的至少一种，优选地，为组氨酸缓冲液。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述酸性缓冲液的浓度为5-25mm，优选地，为10-20mm。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述糖类为蔗糖或海藻糖，优选地，为蔗糖，所述多元醇为甘露醇或山梨醇。
6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述糖类稳定剂的浓度为3％-9％(w/v)，优选地，为5％(w/v)。
7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述表面活性剂为聚山梨酯-20、聚山梨酯-80、聚山梨酯-60或聚山梨酯-40，优选地，为聚山梨酯-20或聚山梨酯-80。
8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述表面活性剂的浓度为0.02％-0.06％(w/v)，优选地，为0.02％-0.04％(w/v)。
9.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述第一重链可变区包括：
10.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述重链cdr1具有seq id no:31、32、33或45所示的序列；
11.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述第一重链包括seq id no:5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18...
【专利技术属性】
技术研发人员：季霜仪，章燕珍，汤沛霈，熊文瑞，王安，李纲，
申请(专利权)人：迈威上海生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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