制备冻干蛋白配制品的加速方法技术

本文披露了制备冻干配制品的加速方法，这些配制品包含表现出改善的储存稳定性的蛋白质，如抗体或双特异性抗原结合分子

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】制备冻干蛋白配制品的加速方法


[0001]本披露提供了用于制备冻干配制品的加速方法，这些配制品包含表现出改善的储存稳定性的蛋白质，如抗体或双特异性抗原结合分子
。
[0002]通过引用并入以电子方式提交的材料
[0003]通过引用整体并入的是与本文同时提交的计算机可读核苷酸
/
氨基酸序列表，其鉴定如下：文件名：
I
‑
56846_Seqlisting.txt
；大小：
345,286
字节；创建于：
2022
年5月
12
日
。

技术介绍

[0004]基于蛋白质的药物
(
如含有抗体
、
抗体片段以及双特异性抗原结合分子的药物
)
对于治疗各种疾病和病症变得日益重要
。
然而，蛋白质仅临界稳定
(marginally stable)
并且极易受到化学和物理降解二者的影响
。
化学降解是指涉及共价键的修饰，如脱酰胺化
、
氧化
、
裂解
、
剪切
/
片段化
、
形成新的二硫桥键
、
水解
、
异构化或去糖基化
。
物理降解包括蛋白质去折叠
、
对表面的不希望的吸附
、
和聚集
。
处理这些物理和化学不稳定性是蛋白质药物开发中最具挑战性的任务之一
(Chi
等人
,Pharm Res[
药物研究
],
第
20
卷，第9期
,2003
年9月
,
第
1325
‑
1336
页
,Roberts,Trends Biotechnol.[
生物技术趋势
]2014
年7月；
32(7):372
‑
80)。
[0005]特别地，需要保护半衰期延长的抗原结合分子
(
例如，包含半衰期延长模式的双特异性
T
细胞接合剂如
Fc
分子
)
，以防止蛋白质聚集和
/
或其他降解事件
。
分子的蛋白质聚集是有问题的，因为它会损害治疗性蛋白的生物活性和质量
(
规格
)。
此外，由于从最终产物中去除聚集体所需的复杂的纯化步骤，分子的聚集可能降低了产物产率
。
最近，人们还越来越关注并且有越来越多的证据证明聚集蛋白
(
甚至是人源化或全人源蛋白质
)
的存在可以显著增加患者对活性蛋白质单体产生免疫应答的风险，导致形成中和抗体和抗药性，或其他不良副作用
(Mahler JPharm Sci.[
药物科学杂志
]2009
年9月；
98(9):2909
‑
34)。
[0006]通常将基于蛋白质的药物配制品冻干，并且以固态储存以帮助在储存过程中保持配制品中蛋白质
(
如抗体或双特异性抗原结合分子
)
的完整性
。
然而，许多当前的冻干蛋白配制品的方法与已知方法相比不能更快产生随时间变化表现出合适的稳定性的固态配制品
。
因此，需要新的加速方法，该方法产生表现出改善的储存稳定性的冻干蛋白配制品
。

技术实现思路

[0007]在一方面，本披露提供了制备冻干配制品的快速方法，该方法包括
(a)
冷却含有包含蛋白质
、
糖以及表面活性剂的液体配制品的冻干室至约
‑
35℃
至约
‑
50℃
的温度范围以产生冷冻配制品，并且将该室在约
‑
40℃
至约
‑
50℃
的温度范围下保持约
1.0
小时至约
3.0
小时的时间段；
(b)
加热该室至约
‑
35℃
至约
‑
20℃
的温度范围和约
75
毫托至约
125
毫托的压力范围以产生初次干燥配制品，并且将该室在约
‑
35℃
至约
‑
20℃
的温度范围下和约
75
毫托至约
125
毫托的压力范围下保持约
12
小时至约
24
小时的时间段；
(c)
加热该室至约
20℃
至约
30℃
的温度范围以产生二次干燥配制品，并且将该室在约
20℃
至约
30℃
的温度范围下和约
50
毫
托至约
100
毫托的压力范围下保持约5小时至约
12
小时的时间段，以产生该冻干配制品；其中该液体配制品具有约3‑7的
pH
，并且不含有甘露糖醇；并且该方法缺少退火步骤
。
[0008]在另一方面，本披露提供了通过本披露的方法制备的冻干蛋白配制品
。
[0009]通过阅读以下详细说明，其他方面和优点对于本领域普通技术人员将显而易见
。
尽管本文披露的方法易于应用于各种形式的实施例，但在理解本披露为说明性的而不旨在将本专利技术限于本文所述的特定实施例的情况下，以下描述包括特定实施例
。
附图说明
[0010]图1显示出，通过视觉检查对完成循环后的干燥产物饼的宏观塌陷的任何迹象和总体质量进行评估
。BITE B
的产物饼被确定为可接受，并且显示了从几个角度拍摄的照片
。
[0011]图2显示出高分子量
(HMW)
物质的相对面积％的值随时间变化的作图
。
数据表明在研究过程中没有聚集不稳定性
。
具体实施方式
[0012]本文披露了制备冻干配制品的加速方法，这些配制品包含表现出改善的稳定性的蛋白质，如抗体或双特异性抗原结合分子
(
例如，半衰期延长的双特异性抗原结合分子
)。
本披露的加速冻干方法有利地导致降低的物理降解
(
如聚集
)
，以及降低的化学降解
(
如降低的剪切和脱酰胺化
)。
此外，本文披露的加速冻干方法能够稳定低浓度和高浓度蛋白配制品，如含有抗体和双特异性抗原结合分子的配制品
。
[0013]定义
[0014]如本文所用，术语“药物配制品”涉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种制备冻干配制品的方法，该方法包括：
(a)
冷却含有包含蛋白质
、
糖以及表面活性剂的液体配制品的冻干室至约
‑
35℃
至约
‑
50℃
的温度范围以产生冷冻配制品，并且将该室在约
‑
40℃
至约
‑
50℃
的温度范围下保持约
1.5
小时至约
5.0
小时的时间段；
(b)
加热该室至约
‑
30℃
至约
‑
20℃
的温度范围和约
75
毫托至约
125
毫托的压力范围以产生初次干燥配制品，并且将该室在约
‑
30℃
至约
‑
20℃
的温度范围下和约
75
毫托至约
125
毫托的压力范围下保持约
12
小时至约
24
小时的时间段；
(c)
加热该室至约
20℃
至约
30℃
的温度范围以产生二次干燥配制品，并且将该室在约
20℃
至约
30℃
的温度范围下和约
50
毫托至约
100
毫托的压力范围下保持约5小时至约
12
小时的时间段，以产生该冻干配制品；其中该液体配制品具有约3‑7的
pH
，并且不含有甘露糖醇；并且该方法缺少退火步骤
。2.
如权利要求1所述的方法，其中该步骤
(a)
的冷却进行至约
‑
45℃
的温度
。3.
如权利要求1或2所述的方法，其中该步骤
(a)
的冷却以约
0.3℃/min
至约
1℃/min
的速率范围进行
。4.
如权利要求3所述的方法，其中该步骤
(a)
的冷却以约
0.5℃/min
的速率进行
。5.
如权利要求1‑4中任一项所述的方法，其中该步骤
(a)
的保持在约
‑
45℃
的温度下进行
。6.
如权利要求1‑5中任一项所述的方法，其中该步骤
(a)
的保持进行约
1.5
小时至约5小时的时间段
。7.
如权利要求6所述的方法，其中该步骤
(a)
的保持进行约2至3小时
。8.
如权利要求1‑7中任一项所述的方法，其中该步骤
(b)
的加热进行至约
‑
25℃
至
‑
30℃
的温度
。9.
如权利要求1‑8中任一项所述的方法，其中该步骤
(b)
的加热以约
0.1℃/min
至约
1℃/min
的速率范围进行
。10.
如权利要求9所述的方法，其中该步骤
(b)
的加热以约
0.1℃/min
至约
0.5℃/min
的速率范围进行
。11.
如权利要求
10
所述的方法，其中该步骤
(b)
的加热以约
0.3℃/min
的速率进行
。12.
如权利要求1‑
11
中任一项所述的方法，其中该步骤
(b)
的加热在约
75
毫托至约
125
毫托的压力范围下进行
。13.
如权利要求
12
所述的方法，其中该步骤
(b)
的加热在约
100
毫托的压力下进行
。14.
如权利要求1‑
13
中任一项所述的方法，其中该步骤
(b)
的保持在约
‑
25℃
至约
‑
30℃
的温度下进行
。15.
如权利要求1‑
14
中任一项所述的方法，其中该步骤
(b)
的保持在约
75
毫托至约
125
毫托的压力范围下进行
。16.
如权利要求
15
所述的方法，其中该步骤
(b)
的保持在约
100
毫托的压力下进行
。17.
如权利要求1‑
16
中任一项所述的方法，其中该步骤
(b)
的保持进行约
10
小时至约
25
小时的时间段
。18.
如权利要求
17
所述的方法，其中该步骤
(b)
的保持进行约
17
小时
。19.
如权利要求1‑
18
中任一项所述的方法，其中该步骤
(c)
的加热进行至约
25℃
的温
度
。20.
如权利要求1‑
19
中任一项所述的方法，其中该步骤
(c)
的加热升温速率以高达约
0.5℃/min
的速率范围进行
。21.
如权利要求
20
所述的方法，其中该步骤
(c)
的加热升温速率以约
0.1℃/min
至约
0.5℃/min
的速率范围进行
。22.
如权利要求
21
所述的方法，其中该步骤
(c)
的加热以约
0.4℃/min
的速率进行
。23.
如权利要求1‑
22
中任一项所述的方法，其中该步骤
(c)
的保持在约
25℃
的温度下进行
。24.
如权利要求1‑
23
中任一项所述的方法，其中该步骤
(c)
的保持在约
50
毫托至约
100
毫托的压力范围下进行
。25.
如权利要求
24
所述的方法，其中该步骤
(c)
的保持在约
70
毫托的压力下进行
。26.
如权利要求1‑
25
中任一项所述的方法，其中，该步骤
(c)
的保持进行约8小时
。27.
如权利要求1‑
26
中任一项所述的方法，其中该蛋白质是抗体
。28.
如权利要求1‑
26
中任一项所述的方法，其中该蛋白质是双特异性抗原结合分子
。29.
如权利要求
28
所述的方法，其中该双特异性抗原结合分子是半衰期延长的
(HLE)
双特异性抗原结合分子
。30.
如权利要求
29
所述的方法，其中该
HLE
双特异性抗原结合分子包含以下列出的氨基酸序列：
SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：安进公司，
类型：发明
国别省市：