一种岗梅总皂苷的提取方法及其质量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种岗梅总皂苷的提取方法及其质量检测方法，提取方法包括步骤：取岗梅根或茎药材，加入４～１２倍量６０％乙醇提取１．５－２小时，再加２～１０倍量６０％乙醇提取１．０－１．５小时，滤过，合并滤液；减压浓缩至无醇味，加水稀释至上样浓度为０．１－０．５ｇ生药／ｍｌ，上已预处理的ＡＢ－８大孔树脂柱；水洗树脂柱至澄清，然后用６０％－８０％乙醇洗脱；收集６０％－８０％乙醇洗脱液减压浓缩，干燥得岗梅总皂苷；质量检测方法包括ＴＬＣ色谱鉴别和岗梅总皂苷中ｉｌｅｘｏｓｉｄｅＸ？ＸＩＸ的含量测定。采用本发明专利技术的精制工艺，岗梅总皂苷和ｉｌｅｘｏｓｉｄｅＸ？ＸＩＸ的保留率得到了极大的提高，所得提取物中纯度更高；所得岗梅总皂苷具有抗炎、镇痛、解热及抗病毒等作用；采用特征性皂苷ｉｌｅｘｏｓｉｄｅ？Ｘ？ＸＩＸ为对照品，准确度和精确度更高，结果更具可信度；岗梅总皂苷提取物的质量检测方法可为岗梅总皂苷提取物的质量控制提供参考。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从岗梅药材中提取岗梅总皂苷的方法及用途，本专利技术还涉及一种岗梅总皂苷的质量检测方法。
技术介绍
岗梅为冬青科植物梅叶冬青的干燥根及茎，收载于《广东省中药材标准》(第一册)粤D/WS-058-2003项下，主产于广东、广西等地，为岭南习用中药。功能主治为清热解毒，生津止渴，利咽消肿，散瘀止痛；用于感冒发热，肺热咳嗽，热病津伤口渴，咽喉肿痛，跌打瘀痛。主要含三萜皂苷、内酯(香豆素)及少量生物碱。 大孔吸附树脂为一种有机高聚吸附剂，具有选择性吸附有机化合物的能力，应用于皂苷类成分的富集纯化有较好的效果，但其吸附性能及其解吸、纯化条件参数因化合物的理化性质的不同而不同。冯达星等(大孔树脂富集纯化岗梅根中总皂苷的研究，广东药学院学报2004年6月)采用大孔吸附树脂LSA-20对岗梅根中的总皂苷进行了提取，纯化前总固形物中岗梅根总皂苷含量为5.3％，纯化后总固形物中岗梅根总皂苷含量为62.98％，精制度达11.86倍。但LSA-20树脂对岗梅总皂苷的比吸附量与解析率不是很高，纯化后总固形物中岗梅根总皂苷含量亦不算高。 现有技术中岗梅总皂苷的提取精制工艺是以岗梅总皂苷的含量作为指标来考察的，对岗梅总皂苷的标定均采用人参皂苷Re为对照品。人参皂苷Re与岗梅总皂苷显色后的紫外-可见吸收曲线两者基本一致，在无岗梅特征性皂苷ilexosideX X IX作为对照品的前提下，通常以人参皂苷Re为对照品标定岗梅总皂苷。然而，一方面，以人参皂苷Re为对照品来标定岗梅总皂苷的准确度和精确度不是很高；另一方面，仅采用岗梅总皂苷的含量这一种指标来考察岗梅总皂苷提取工艺，具有模糊性，对提取工艺的验证有一定的影响。因此，急需采用更有说服力的指标，对现有的岗梅总皂苷的提取方法作出改进。 此外，现有技术对提取的岗梅总皂苷的质量检测方法尚属空白。
技术实现思路
本专利技术的目的之一即在于针对现有技术的缺陷，提供一种岗梅总皂苷的新的提取方法，该提取方法采用新的工艺参数，以岗梅总皂苷中特征性单体皂苷ilexosideX X IX和基于ilexoside X X IX标定的岗梅总皂苷的含量和保留率为指标进行考察。 为实现上述目的，本专利技术采取了以下技术方案 一种岗梅总皂苷的提取方法，包括以下步骤 (1)取岗梅根或茎药材，加入4～12倍量60％乙醇提取第一次，再加2～10倍量60％乙醇提取第二次，滤过，合并滤液； (2)将步骤(1)得到的滤液减压浓缩至无醇味，加水稀释至上样浓度为0.1-0.5g生药/ml，上已预处理的AB-8大孔树脂柱； (3)水洗树脂柱至澄清，弃去过柱液及水洗液，然后用60％-80％乙醇洗脱； (4)收集60％-80％乙醇洗脱液减压浓缩，减压或喷雾干燥得岗梅总皂苷。 优选地，所述步骤(1)中加入8倍量60％乙醇提取第一次，再加6倍量60％乙醇提取第二次；所述步骤(2)中上样浓度为0.2g生药/ml；最大上样量以岗梅总皂苷计为119.43mg岗梅总皂苷计/g干树脂；所述步骤(3)中用3倍柱体积80％乙醇洗脱。 采用上述提取方法提取的岗梅总皂苷具有抗炎、镇痛、解热及抗病毒等作用，通过加入常规药用辅料可制备为用于急性咽炎和抗病毒的片剂、胶囊、颗粒、滴丸、口服液、合剂等剂型，还可作为添加剂加入饮料、牙膏、漱口水、口香糖中，用于口腔保健。 本专利技术的另一目的在于提供一种采用上述提取方法得到的岗梅总皂苷的质量检测方法。 为实现上述目的，本专利技术采取了以下技术方案 一种岗梅总皂苷提取物的质量检测方法，包括以下步骤 (1)岗梅总皂苷的鉴别(TLC色谱鉴别) 取岗梅总皂苷提取物0.1-0.2g，加水5-15ml使溶解，用以水饱和的正丁醇提取2-3次，每次5-15ml，合并正丁醇液，加0.8％-1.2％氢氧化钠溶液洗涤2-3次，每次15-25ml，取正丁醇液用以正丁醇饱和的水洗至中性，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；同法制成岗梅对照药材溶液；照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，分别吸取上述溶液各5μl点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1∶6∶1.5∶0.7∶0.1的氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇∶水∶甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上，显相同颜色斑点； (2)岗梅总皂苷中ilexoside X X IX的含量测定(HPLC-ELSD) ①色谱条件 以C18柱为固定相，乙腈-0.2％甲酸为流动相，进行梯度洗脱；漂移管温度40℃，载气压力2.5bar，流速1ml/min，柱温室温；理论塔板数以ilexosideX X IX计大于4000，对称因子为0.95～1.05，与相邻峰的分离度大于1.5； ②对照品溶液的制备 取ilexosideX X IX对照品5mg，精密称定，置5ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得； ③供试品溶液的制备 取岗梅总皂苷2g，精密称定，用70％乙醇定容至100ml，微孔滤膜滤过，即得。 分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，按①色谱条件测定，计算ilexoside X X IX的含量。 优选地，所述岗梅总皂苷提取物中所含ilexoside X X IX的重量百分含量为5％-15％。 与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果 1、采用本专利技术大孔树脂AB-8精制工艺，经过大孔吸附树脂纯化，岗梅总皂苷和ilexosideX X IX的保留率得到了极大的提高，醇洗液中总皂苷的保留率达83.71％，ilexosideX X IX的保留率达89.46％，岗梅总皂苷和ilexoside X X IX的泄露率很低，所得提取物中总皂苷的含量可达93％，ilexoside X X IX的含量可达8％以上；； 2、本专利技术岗梅总皂苷的提取工艺及大孔树脂的精制工艺中采用特征性皂苷ilexoside XX IX为对照品，ilexoside X X IX与岗梅总皂苷的紫外吸收曲线一致(见图1)，同时以岗梅总皂苷的含量和ilexoside X X IX的含量为指标进行定量考察，与现有技术中仅采用人参皂苷Re来标定总皂苷相比，准确度和精确度更高，结果更具可信度。 3、本专利技术提供了一种岗梅总皂苷提取物的质量检测方法，HPLC-ELSD对岗梅总皂苷中ilexoside X X IX的分离效果好，灵敏度高，可用于岗梅药材及岗梅总皂苷中ilexosideX X IX的含量测定，可为岗梅总皂苷提取物的质量控制提供参考。 附图说明 图1为岗梅ilexoside X X IX与岗梅总皂苷显色后在400-700nm波长的紫外吸收曲线，其中图中上面曲线为ilexoside X X IX显色后吸收曲线；下面曲线为岗梅总皂苷显色后吸收曲线； 图2为不同上样浓度对岗梅总皂苷吸附量的影响； 图3为岗梅总皂苷的动态吸附曲线； 图4为不同洗脱溶媒对岗梅总皂苷的洗脱率； 图5为不同洗脱溶媒对ilexoside X X IX的洗脱率； 图6为不同体积的洗脱溶媒对岗梅总皂苷的洗脱率； 图7为不同体积的洗脱溶媒对il本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种岗梅总皂苷的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：（１）取岗梅根或茎药材，加入４～１２倍量６０％乙醇提取１．５－２小时，再加２～１０倍量６０％乙醇提取１．０－１．５小时，滤过，合并滤液；（２）将步骤（１）得到的滤液减压浓缩至无醇味，加水稀释至上样浓度为０．１－０．５ｇ生药／ｍｌ，上已预处理的ＡＢ－８大孔树脂柱；（３）水洗树脂柱至澄清，然后用６０％－８０％乙醇洗脱；（４）收集６０％－８０％乙醇洗脱液减压浓缩，干燥得岗梅总皂苷。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张军，张晓琦，李润美，汤毅，叶文才，赖小平，
申请(专利权)人：广州中医药大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]