一种有益菌中草药微生态制剂的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种有益菌中草药微生态制剂制备方法，包含以下操作步骤：(1)中草药预处理：选取中草药，分别烘干，粉碎，过筛，备用；(2)一级种子液制备：将有益菌活化后接种于发酵培养基中发酵培养一级种子液；所述的有益菌为胶红酵母、浅红酵母、黄金隐球酵母、枯草芽孢杆菌、沙福芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌中的至少一种；(3)菌种液培养；(4)中药发酵，即得中草药微生态制剂。本发明专利技术方法制备所得中药微生态制剂具有提高免疫力作用，且无毒无害，方法操作容易，发酵效率高。本发明专利技术还提供一种采用该中药微生态制剂制备得到的饲料，该饲料中绿原酸等生物活性物质含量丰富。生物活性物质含量丰富。生物活性物质含量丰富。

【技术实现步骤摘要】
一种有益菌中草药微生态制剂的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物工程技术及饲料添加剂领域，具体涉及一种有益菌中草药微生态制剂的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]近年来，由于我国养殖业的快速发展，消费者对养殖产品的需求量剧增。现代水产畜禽养殖过程中，为了预防和治疗鱼类及畜禽感染疾病，主要用过量抗生素来确保其健康。饲用抗生素的使用极大提升了生产水平，但抗生素的过量使用会使肉制品品质下降。长期滥用抗生素引发的耐药菌生长和抗药基因转移，导致人和动物机体免疫力下降，人类健康也受到严重影响。绿原酸(Chlorogenic acid，CGA)是一类多酚类次生代谢产物，具有抗氧化、抑菌、抗病毒、抗肿瘤以及调节免疫力等多种生物学活性，因此，在养殖业、医药等方面有良好的发展前景。
[0003]绿原酸具有很高的经济价值，国内和国际市场需求大。目前绿原酸的获得途径主要是通过植物提取和化学合成两种途径。化学合成的绿原酸不仅价格昂贵，且其在结构、功能与生物可利用度方面与天然的绿原酸有很大的差别。天然绿原酸具有稳定性高、安全性好和易于吸收的优点，但从植物中提取天然绿原酸常会面临植物生长周期长、提取工艺复杂等问题。因此，挖掘产绿原酸的微生物菌株，通过发酵工程替代从植物中提取生产绿原酸是一种具有市场前景的策略。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种有益菌中草药微生态制剂，包含有多种活性成分、有益菌及其代谢产物。该中药微生态制剂具有提高免疫力作用，且无毒无害，方法操作容易，发酵效率高。r/>[0005]本专利技术还提供一种采用该中药微生态制剂制备得到的饲料，该饲料中绿原酸等生物活性物质含量丰富。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供的技术方案如下：
[0007]一种有益菌中草药微生态制剂制备方法，包含以下操作步骤：
[0008](1)中草药预处理：选取中草药，分别置于50
‑
60℃烘干，粉碎机粉碎，过60
‑
80目筛，备用；所述的中草药为1
‑
10份甘草、50
‑
100份黄芪、50
‑
100份茯苓、1
‑
50份山药、1
‑
50份白术和1
‑
50份党参；
[0009](2)一级种子液制备：将有益菌活化后接种于发酵培养基中，在25
‑
37℃、pH为6.5
‑
7.5的条件下发酵24
‑
96h，培养一级种子液；所述的有益菌为胶红酵母、浅红酵母、黄金隐球酵母、枯草芽孢杆菌、沙福芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌中的至少一种；其中，所述的胶红酵母为胶红酵母B11Y(Rhodotorula mucilaginosa B11Y)，保藏号为CCTCC NO：M 2023082；所述的沙福芽孢杆菌为沙福芽孢杆菌SC
‑
11(Bacillus safensis SC
‑
11)，保藏号为CCTCC NO：M 2022543；其余有益菌筛自中草药叶片中；
[0010](3)菌种液培养：将步骤(2)中所得一级种子液转接于发酵培养基中，进行二级发酵扩大培养，培养到达对数生长期，终止发酵，得到菌种液，备用；
[0011](4)中药发酵：将步骤(1)中过筛备用的中草药均匀混合，加入2倍纯净水(质量比)浸泡6
‑
12h后pH值调节为6.5
‑
7.5，蒸汽灭菌(121℃，15
‑
20min)，冷却后加入占中草药总质量10％
‑
20％步骤(3)备用的菌种液，25
‑
37℃发酵48
‑
96h，发酵结束后，在40
‑
50℃烘干，即得中草药微生态制剂。
[0012]作为优选，步骤(2)中所述的活化为将有益菌接种于发酵固体培养基，于28℃恒温培养72h活化；所述的发酵固体培养基为向所述发酵培养基加入琼脂后所得，琼脂添加量为20g/L。
[0013]作为优选，步骤(2)和步骤(3)中所述的发酵培养基为BE培养基或沙氏液体培养基；其中，所述的BE培养基组成为牛肉浸粉5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，溶于1L去离子水中，调pH至7.2
‑
7.4；所述的沙氏液体培养基组成为蛋白胨10g，葡萄糖40g，溶于1L去离子水中。BE培养基用来发酵枯草芽孢杆菌、沙福芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的培养基，沙氏液体培养基是用来发酵胶红酵母、浅红酵母、黄金隐球酵母的培养基。
[0014]作为优选，步骤(3)中所述一级种子液的接种量为1％体积比。
[0015]作为优选，步骤(4)发酵期间每隔6
‑
12h搅拌一次。
[0016]如上所述的中草药微生态制剂在制备饲料中的应用。
[0017]一种包含上述中草药微生态制剂的饲料，在常规饲料中加入常规饲料质量1％
‑
5％的上述中草药微生态制剂，混合均匀。制得的饲料成品具有良好的稳定性和芳香味，适口性和诱食性好。
[0018]与现有技术相比，本专利技术的有益效果：
[0019](1)本专利技术中草药微生态制剂制备方法简单，利用有益菌的发酵，将中药中的一些大分子有益活性物质转变成小分子物质而被直接利用，提高了药效，营养价值高，利于鱼类和畜禽吸收，有提高鱼类畜禽存活率的效果；制备所得中草药微生态制剂可调节使用剂量，易于保存，方便应用；
[0020](2)本专利技术使用的红酵母菌自身也能产生绿原酸等有益成分，有利于提高鱼类和畜禽的免疫力和抗病力，减少抗生素的使用；
[0021](3)本专利技术所用菌种均为中草药中筛选出的有益天然微生物，不会有毒素产生，对于大规模应用生产安全可靠；本专利技术中草药成分与有益菌发酵产物有耦合作用，可明显提高畜禽存活率和抗病能力，提高消化酶活性和肠道健康，有效防治鱼类及畜禽的死亡，促进其健康生长；
[0022](4)本专利技术采用红酵母等有益菌发酵中草药是在较温和的条件下进行，操作简单，并能尽可能保护中草药中有益成分活性。
[0023]保藏信息说明
[0024]胶红酵母B11Y(Rhodotorula mucilaginosa B11Y)于2023年1月12日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏号为CCTCC NO：M 2023082。
[0025]沙福芽孢杆菌SC
‑
11(Bacillus safensis SC
‑
11)于2022年05月03日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏号为CCTCC NO：M 2022543。
附图说明
[0026]图1为常规饲料中添加不同中草药微生态制剂对加州鲈鱼肝脏组织的结构切片；其中，a.空白组；b.红酵母组；c.阳性对照组；d.芽孢杆菌组；标尺＝100μm。
[0027]图2为常规饲料中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种有益菌中草药微生态制剂制备方法，其特征在于，包含以下操作步骤：(1)中草药预处理：选取中草药，分别烘干，粉碎，过筛，备用；所述的中草药为1
‑
10份甘草、50
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100份黄芪、50
‑
100份茯苓、1
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50份山药、1
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50份白术和1
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50份党参；(2)一级种子液制备：将有益菌活化后接种于发酵培养基中，在25
‑
37℃、pH为6.5
‑
7.5的条件下发酵24
‑
96h，培养一级种子液；所述的有益菌为胶红酵母、浅红酵母、黄金隐球酵母、枯草芽孢杆菌、沙福芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌中的至少一种；其中，所述的胶红酵母为胶红酵母B11Y(Rhodotorula mucilaginosa B11Y)，保藏号为CCTCC NO：M 2023082；所述的沙福芽孢杆菌为沙福芽孢杆菌SC
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11(Bacillus safensis SC
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11)，保藏号为CCTCC NO：M 2022543；其余有益菌筛自中草药叶片中；(3)菌种液培养：将步骤(2)中所得一级种子液转接于发酵培养基中，进行二级发酵，培养到达对数生长期，终止发酵，得到菌种液，备用；(4)中药发酵：将步骤(1)中过筛备用的中草药混合，加水浸泡6
‑
12h后pH值调节为6.5
‑
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【专利技术属性】
技术研发人员：樊宪伟，朱文虎，李有志，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：