【技术实现步骤摘要】
生产3
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脱氢莽草酸的重组微生物、其构建方法及应用
[0001]本公开涉及生物
,具体涉及生产3
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脱氢莽草酸的重组微生物、其构建方法及应用,以及更具体地,涉及前述重组微生物在制备3
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脱氢莽草酸中的应用。
技术介绍
[0002]3‑
脱氢莽草酸(3
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dehydroshikimate,DHS)是微生物及植物体内芳香族氨基酸生物合成代谢途径中的一种重要中间产物,对维系生物正常发育、完成代谢过程具有重要作用。DHS可被进一步催化形成莽草酸(Shikimate)及其芳香族氨基酸和衍生物,以及原儿茶酸(Protocatechuate)、香草醛(Vanillin)、儿茶酚(Catechol)、没食子酸(Gallate)、已二酸(Adipate)、水杨酸(Salicylic acid)等一系列重要化工产品。利用3
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脱氢莽草酸合成这些化工产品可以避免有毒的苯和甲苯等原料的使用,减少对人体和环境影响。与此同时,3
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脱氢莽草酸还是一种十分有效的抗氧化剂,其活性甚至优于没食子酸、没食子酸丙酯(Propyl gallate)、对苯二酚(BHQ)、丁羟甲苯(BHT)、生育酚(α
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tocopherol)等一些商品化的抗氧化剂,具有重要的应用价值。此外,DHS作为一种小分子手性化合物,还可以作为药物合成中非常有潜力的合成中间体。因此,研究DHS的生产具有重要的应用前景。
[0003]目前,利 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种生产3
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脱氢莽草酸的重组微生物,其中,所述重组微生物与野生型菌株或出发菌株相比,具有如下(a)~(c)所示的至少一种特性:(a)增强的脱氢奎尼酸合成酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平;(b)降低或消失的丙酮酸激酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平;(c)增强的脱氢奎尼酸合成酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平,和降低或消失的丙酮酸激酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平。2.根据权利要求1所述的重组微生物,其中,在野生型菌株或出发菌株中,在起始脱氢奎尼酸合成酶翻译的起始密码子的上游插入调控元件P2或P3,以增强脱氢奎尼酸合成酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平;或敲除野生型微生物或出发菌株中编码丙酮酸激酶的基因,以降低或消除丙酮酸激酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平;其中,调控元件P2的序列如SEQ ID NO:4所示,调控元件P3的序列如SEQ ID NO:2所示。3.根据权利要求1或2所述的重组微生物,其中,与野生型微生物或出发菌株相比,还具有如下(d)所示的特性:(d)增强的3
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脱氧
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D
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阿拉伯庚酮糖
‑7‑
磷酸合成酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平;可选的,在起始3
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脱氧
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D
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阿拉伯庚酮糖
‑7‑
磷酸合成酶翻译的起始密码子的上游插入调控元件P1、P2或P3,以增强3
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脱氧
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D
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阿拉伯庚酮糖
‑7‑
磷酸合成酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平;优选的,所述调控元件P1的序列如SEQ ID NO:3所示,调控元件P2的序列如SEQ ID NO:4所示,调控元件P3的序列如SEQ ID NO:2所示。4.根据权利要求3所述的重组微生物,其中,所述重组微生物与野生型微生物或出发菌株相比,还具有如下(e)所示的特性:(e)增强的脱氢奎尼酸脱水酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平;可选的,在起始脱氢奎尼酸脱水酶翻译的起始密码子的上游插入调控元件P1、P2或P3,以增强脱氢奎尼酸脱水酶的酶活性和/或其编码基因的表达水平;优选的,在起始脱氢奎尼酸脱水酶翻译的起始密码子的上游插入调控元件P2或P3,以增强脱氢奎尼酸脱水...
【专利技术属性】
技术研发人员:王钦宏,宋国田,陈五九,江小龙,吴凤礼,彭彦峰,张媛媛,
申请(专利权)人:中国科学院天津工业生物技术研究所,
类型:发明
国别省市:
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