β-甘露聚糖酶高酶活突变体M-Q7S、重组菌及其应用制造技术

技术编号:41483851 阅读:34 留言:0更新日期:2024-05-30 14:32
本发明专利技术涉及生物技术领域,具体涉及β‑甘露聚糖酶高酶活突变体M‑Q7S、重组菌及其应用。本发明专利技术得到的单位点β‑甘露聚糖酶突变体Csman5A‑Q7S,所述的β‑甘露聚糖酶突变体为氨基酸序列为SEQ ID NO:1的β‑甘露聚糖酶的第7位氨基酸天冬酰胺(Q)变为丝氨酸(S)获得。实验表明,突变体Csman5A‑Q7S在整个诱导周期内比酶活显著高于原始Csman5A,在诱导144h后比酶活达到最高值时,突变体Csman5A‑Q7S比酶活达是原始Csman5A比酶活的5.4倍。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体涉及β-甘露聚糖酶高酶活突变体m-q7s、重组菌及其应用。


技术介绍

1、为缓解饲料行业资源短缺的难题,寻找新型饲料原料是当前最重要的任务,其中农副产品废弃物的开发利用成为关注重点。在众多农副产品中,棕榈粕具有资源丰富、价格低廉、不含有黄曲霉毒素以及含有ve抗氧化优势,其作为一种新型饲料原料具有广阔的应用前景。然而,棕榈粕中存在大量难以消化的非淀粉多糖,其中主要以甘露聚糖为主。

2、但是甘露聚糖不易被动物消化道降解,且部分溶于水易形成粘性物质使食糜粘度增大,从而降低营养物质的利用率。β-甘露聚糖酶可以随机水解甘露聚糖主链中β-1,4-糖苷键,产生低分子量的甘露聚糖,是甘露聚糖降解酶系中最重要的糖苷水解酶。因此近年来β-甘露聚糖酶被广泛应用与食品、饲料、能源行业中。目前已经有许多β-甘露聚糖酶被克隆表达,但这些β-甘露聚糖酶往往存在表达量低、酶活力低等问题,例如文献中提到的酶活只有1.5×106u/g(吕潇.嗜糖黄杆菌中两种新的β-甘露聚糖酶的重组表达及功能研究[d].东北师范大学,2023.doi:10.27011/d.本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种β-甘露聚糖酶高酶活突变体M-Q7S,其特征在于,其为氨基酸序列为SEQ ID NO:1的β-甘露聚糖酶的第7位氨基酸天冬酰胺变为丝氨酸获得。

2.编码如权利要求1所述的β-甘露聚糖酶高酶活突变体M-Q7S的核酸。

3.包含如权利要求2所述核酸的重组载体。

4.如权利要求3所述的重组载体,其特征在于,将所述核酸插入到表达载体合适位点,使其核苷酸序列可操作的与表达调控序列相连接,得到重组表达质粒。

5.如权利要求4所述的重组载体,其特征在于,其是酵母表达质粒。

6.包含如权利要求4或5所述的重组载体的重组菌株。

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【技术特征摘要】

1.一种β-甘露聚糖酶高酶活突变体m-q7s,其特征在于,其为氨基酸序列为seq id no:1的β-甘露聚糖酶的第7位氨基酸天冬酰胺变为丝氨酸获得。

2.编码如权利要求1所述的β-甘露聚糖酶高酶活突变体m-q7s的核酸。

3.包含如权利要求2所述核酸的重组载体。

4.如权利要求3所述的重组载体,其特征在于,将所述核酸插入到表达载体合适位点,使其核苷酸序列可操作的与表达调控序列相连接,得到重组表达质粒。

5.如权利要求4所述的重组载体,其特征在于,其是酵母表...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴信高乐
申请(专利权)人:中国科学院天津工业生物技术研究所
类型:发明
国别省市:

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