IL-2Rβγc结合化合物和其用途制造技术

公开了IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】IL
‑
2R
βγ
c结合化合物和其用途
[0001]本申请是于2020年11月4日提交的美国申请第17/089,515号的部分继续申请，所述申请根据35 U.S.C.
§
119(e)要求于2019年11月5日提交的美国临时申请第62/930,758号的权益，所述美国临时申请中的每一个通过引用整体并入。


[0002]本公开涉及跨物种IL
‑
2Rβγc结合化合物。跨物种IL
‑
2Rβγc结合化合物可以充当IL
‑
2R激动剂或部分IL
‑
2R激动剂。
[0003]序列表
[0004]与本申请相关的序列表通过EFS
‑
Web以电子格式提交并且通过引用整体并入。

技术介绍

[0005]重组人白细胞介素
‑
2(IL
‑
2)是临床研究的首批免疫肿瘤药物之一并于20世纪90年代由FDA批准用于治疗一些特别具有挑战性的癌症，如黑色素瘤和肾癌。IL
‑
2是有效的，在至多10％的患有这些肿瘤的患者中产生持久的应答，但其效用受到非常严重的剂量限制性毒性的限制。另外，IL
‑
2在引导T细胞介导的抗肿瘤应答中的功效受到同时IL
‑
2驱动的T细胞抑制系统上调的损害。人们一直在寻找降低IL
‑
2疗法毒性的策略，并且以避免对抗肿瘤活性的免疫抑制限制。迄今为止，已经开发出适度有效的策略来控制这种强效生物的全身性暴露，并且由此控制毒性。对IL
‑
2复杂生物学的阐明导致了对天然IL
‑
2分子的修饰，从而改变了肿瘤毒性和抑制的平衡。然而，这些方法受到使用天然IL
‑
2作为模板的限制，由此保留了亲本分子的不希望的、结构驱动的生物活性的元件。
[0006]对其抗肿瘤性质至关重要的是，IL
‑
2对NK和细胞毒性CD8+ T细胞发挥有效的刺激作用。然而，抗肿瘤作用被IL
‑
2引导的刺激T调节细胞(Treg)所矛盾地抑制，这有效地减弱了抗肿瘤免疫应答。IL
‑
2的这种双重作用在很大程度上受在负责免疫稳态的各种细胞上表达的IL
‑
2受体(IL
‑
2R)亚基的性质控制。IL
‑
2被在许多类型的免疫细胞上有差别地和有条件地表达的三种受体亚基的组合识别。被称为IL
‑
2Rβ(β)和IL
‑
2Rγ
‑
共同(γc)的这两个信号传导亚基在通过与IL
‑
2结合而进入正确取向的位置时启动信号传导。IL
‑
2以约1nM的IC
50
与IL
‑
2Rβγc结合以形成活性三元复合物。大多数免疫细胞以不同水平表达IL
‑
2Rβ和IL
‑
2Rγc亚基。还有第三种非信号传导IL
‑
2R亚基，IL
‑
2Rα(CD25)，其在免疫细胞亚群，特别是Treg上表达。IL
‑
2Rαβγc的复合物对IL
‑
2具有非常高的亲和力(约10pM)，并且因此表达所有三个亚基的细胞对IL
‑
2更加敏感。用于提高IL
‑
2R激动剂抗肿瘤效力的流行且得到充分支持的策略涉及对IL
‑
2R选择性进行工程化，以降低IL
‑
2与IL
‑
2Rα亚基的结合，同时维持IL
‑
2Rβγc结合和信号传导，以有利于细胞毒性效应子T细胞(Teff细胞)通过Treg在肿瘤位点处浸润和刺激。
[0007]临床环境中IL
‑
2毒性的原因还不太清楚；但被认为是过度的外周免疫刺激表达IL
‑
2Rβγc的T细胞并伴随过度释放炎性细胞因子的结果。由于天然细胞因子的半衰期短，所以经常施用维持充分肿瘤暴露所需的高剂量IL
‑
2会诱发毒性。
[0008]解决IL
‑
2作为有用的免疫肿瘤疗法的局限性的策略利用突变体、融合蛋白或经化学修饰的IL
‑
2来改变免疫调节因子的复杂生物学。然而，在临床前和临床开发期间，很难优化选择性IL
‑
2Rβγc结合和经修饰的IL
‑
2的信号传导。这限制了生物活性IL
‑
2蛋白作为用于赋予多种新性质的起点的用途。

技术实现思路

[0009]根据本专利技术，IL
‑
2Rβ配体选自：SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个中的任一个的氨基酸序列；SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个的截短的氨基酸序列；具有1至4个氨基酸取代的SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个的氨基酸序列；具有1至4个侧接甘氨酸的SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个的氨基酸序列；与SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种IL
‑
2Rβ配体，其选自：SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个中的任一个的氨基酸序列；SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个的截短的氨基酸序列；具有1至4个氨基酸取代的SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个的氨基酸序列；具有1至4个侧接甘氨酸的SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个的氨基酸序列；与SEQ ID NO:2661
‑
2891、2900
‑
2926、911
‑
930、9301、9308、2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个具有大于60％序列相似性的氨基酸序列；或前述任一种的组合，其中所述IL
‑
2Rβ配体以小于100μM的IC50与hu
‑
IL
‑
2Rβ亚基结合，如使用噬菌体ELISA竞争测定所确定的。2.根据权利要求1所述的IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体包括SEQ ID NO:2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体与具有SEQ ID NO:2859、2934、3100
‑
3128、3130
‑
3151、3160
‑
3166、3170
‑
3186和3200
‑
3207中的任一个的IL
‑
2Rβ配体具有大于60％氨基酸序列相似性。4.根据权利要求1至3中任一项所述的IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体以小于100μM的IC50与hu
‑
IL
‑
2R结合，如使用噬菌体ELISA竞争测定所确定的。5.根据权利要求1至4中任一项所述的IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体以小于100μM的IC50与cyno
‑
IL
‑
2Rβ亚基结合，如使用噬菌体ELISA竞争测定所确定的。6.根据权利要求1至5中任一项所述的IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体以小于100μM的IC50与cyno
‑
IL
‑
2R结合，如使用噬菌体ELISA竞争测定所确定的。7.根据权利要求1所述的IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体具有选自SEQ ID NO:2858和SEQ ID NO:2859的氨基酸序列。8.根据权利要求1所述的IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体具有与选自SEQ ID NO:2858和SEQ ID NO:2859的氨基酸序列具有大于60％序列相似性的氨基酸序列。9.根据权利要求1至8中任一项所述的IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体在C末端上、在N末端上或在C末端和N末端两者上独立地包括1至4个侧接甘氨酸。10.一种IL
‑
2Rβ结合化合物，其包括根据权利要求1至9中任一项所述的IL
‑
2Rβ配体。11.根据权利要求10所述的IL
‑
2Rβ结合化合物，其中所述IL
‑
2Rβ配体与构建体配偶体结合。12.根据权利要求11所述的IL
‑
2Rβ结合化合物，其中所述构建体配偶体选自IgG Fc片
段、ZW1_A片段、Cys
‑
臼片段、Cys
‑
杵片段、抗体和蛋白质。13.根据权利要求11至12中任一项所述的IL
‑
2Rβ结合化合物，其中所述IL
‑
2Rβ配体通过构建体连接子与所述构建体配偶体结合。14.根据权利要求10至13中任一项所述的IL
‑
2Rβ结合化合物，其中所述IL
‑
2Rβ结合化合物以小于100μM的IC50与hu
‑
IL
‑
2R结合，如使用噬菌体ELISA竞争测定所确定的。15.根据权利要求10至14中任一项所述的IL
‑
2Rβ结合化合物，其中所述IL
‑
2Rβ结合化合物以小于100μM的IC50与cyno
‑
IL
‑
2R结合，如使用噬菌体ELISA竞争测定所确定的。16.根据权利要求10至15中任一项所述的IL
‑
2Rβ结合化合物，其中所述IL
‑
2Rβ结合化合物包括IL
‑
2Rγc配体和IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rγc配体以小于100μM的IC50与hu
‑
IL
‑
2Rγc亚基结合；所述IL
‑
2Rβ配体以小于100μM的IC50与所述hu
‑
IL
‑
2Rβ亚基结合；并且所述IC50是使用噬菌体ELISA竞争测定确定的。17.根据权利要求10至16中任一项所述的IL
‑
2Rβ结合化合物，其中所述IL
‑
2Rβ结合化合物包括IL
‑
2Rγc配体和IL
‑
2Rβ配体，其中所述IL
‑
2Rγc配体以小于100μM的IC50与cyno
‑
IL
‑
2Rγc亚基结合；所述IL
‑
2Rβ配体以小于100μM的IC50与cyno
‑
IL
‑
2Rβ亚基结合；并且所述IC50是使用噬菌体ELISA竞争测定确定的。18.一种IL
‑
2Rβγc配体，其包括：根据权利要求1至9中任一项所述的IL
‑
2Rβ配体；以及IL
‑
2Rγc配体，其中所述IL
‑
2Rγc配体包括：SEQ ID NO:944
‑
1028、1032
‑
1060和1601
‑
1613中的任一个的氨基酸序列；SEQ ID NO:944
‑
1028、1032
‑
1060和1601
‑
1613中的任一个的截短的氨基酸序列；具有1至4个氨基酸取代的SEQ ID NO:944
‑
1028、1032
‑
1060和1601
‑
1613中的任一个的氨基酸序列；具有1至4个侧接甘氨酸的SEQ ID NO:944
‑
1028、1032
‑
1060和1601
‑
1613中的任一个的氨基酸序列；与SEQ ID NO:944
‑
1028、1032
‑
1060和1601
‑
1613中的任一个具有大于60％序列相似性的氨基酸序列；或前述任一种的组合，其中所述IL
‑
2Rγc配体以小于100μM的IC50与所述hu
‑
IL
‑
2Rγc亚基结合，如使用噬菌体ELISA竞争测定所确定的。19.根据权利要求18所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述IL
‑
2Rγc配体包括：SEQ ID NO:965的氨基酸序列；SEQ ID NO:965的截短的氨基酸序列；具有1至4个氨基酸取代的SEQ ID NO:965的氨基酸序列；具有1至4个侧接甘氨酸的SEQ ID NO:965的氨基酸序列；与SEQ ID NO:965具有大于60％序列相似性的氨基酸序列；或前述任一种的组合。20.根据权利要求18所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述IL
‑
2Rγc配体包括SEQ ID NO:
965的氨基酸序列。21.根据权利要求18所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体包括选自SEQ ID NO:2858和SEQ ID NO:2859的氨基酸序列；并且所述IL
‑
2Rγc配体包括SEQ ID NO:965的氨基酸序列。22.根据权利要求18所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述IL
‑
2Rβγc配体包括SEQ ID NO:4100
‑
4137、4160
‑
4168和4170
‑
4185中的任一个的氨基酸序列。23.根据权利要求18所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述IL
‑
2Rβγc配体与选自SEQ ID NO:4100
‑
4137、4160
‑
4168和4170
‑
4185中的任一个的氨基酸序列具有大于60％序列相似性。24.根据权利要求18至23中任一项所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述IL
‑
2Rβ配体通过配体连接子与所述IL
‑
2Rγc配体结合。25.根据权利要求24所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述配体连接子包括刚性配体连接子。26.根据权利要求25所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述刚性配体连接子包括(P)n，其中n是1至50的整数(SEQ ID NO:9419)。27.根据权利要求25所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中所述刚性配体连接子包括(PA)n，其中n是1至50的整数(SEQ ID NO:9418)。28.根据权利要求18至27中任一项所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中hu
‑
IL
‑
2R亚基结合比率为10至10,000，其中所述hu
‑
IL
‑
2R亚基结合比率为用于将所述IL
‑
2Rβ配体与所述hu
‑
IL
‑
2Rβ亚基结合的IC50与用于将所述IL
‑
2Rγc配体与所述hu
‑
IL
‑
2Rγc亚基结合的IC50的比率。29.根据权利要求18至27中任一项所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中hu
‑
IL
‑
2R亚基结合比率为0.1至0.0001，其中所述hu
‑
IL
‑
2R亚基结合比率为用于将hu
‑
IL
‑
2Rβ配体与所述IL
‑
2Rβ亚基结合的IC50与用于将所述IL
‑
2Rγc配体与所述hu
‑
IL
‑
2Rγc亚基结合的IC50的比率。30.根据权利要求18至27中任一项所述的IL
‑
2Rβγc配体，其中hu
‑
IL
‑
2R亚基结合比率为0.1至10，其中所述hu
‑
IL
‑
2R亚基结合比率为用于将所述IL
‑
2Rβ配体与所述hu
‑
IL
‑
2Rβ亚基结合的...

【专利技术属性】
技术研发人员：威廉，
申请(专利权)人：麦地金公司，
类型：发明
国别省市：