一种鲨鱼源小分子多肽及其在制备抗肿瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种鲨鱼源小分子多肽及其在制备抗肿瘤药物中的应用。该鲨鱼源小分子多肽的氨基酸序列如下所示：KGKFKRPPLKRVRMSADAML。本发明专利技术中通过实验发现，该鲨鱼源小分子多肽能特异性结合VEGFR2，阻断VEGFR2及其下游信号通路，进而达到抑制血管生成和抗肿瘤的效果，并且随着浓度的提高，其抑制血管生成和抗肿瘤效果逐渐增强。因此，本发明专利技术中的鲨鱼源小分子多肽可以用于制备抗血管生成或抗肿瘤药物。血管生成或抗肿瘤药物。血管生成或抗肿瘤药物。

【技术实现步骤摘要】
一种鲨鱼源小分子多肽及其在制备抗肿瘤药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，特别涉及一种鲨鱼源小分子多肽及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术介绍

[0002]血管生成为从存在的血管床进行的新血管的发育，是一种复杂的多阶段过程。血管生成对以下正常生理进程是重要的，其中所述生理进程包括但不限于胚胎植入、胚胎发生和发育，以及创伤治愈。血管生成也与非癌疾病的进展相关，如新生血管性青光眼、糖尿病性视网膜炎、动脉粥样硬化、肥胖症、肝炎、肺炎、哮喘等疾病。此外，血管生成与肿瘤生长之间也具有紧密联系。
[0003]人体肿瘤大部分都是实体瘤，肿瘤组织是由肿瘤细胞和间质构成。间质成分主要包括血管、淋巴管、结缔组织、炎症细胞及细胞外基质等成分。其中，结缔组织和血管起营养、支持肿瘤细胞的作用。多项研究表明，血管生成是肿瘤进展的重要机制，肿瘤需要血管生成以确保其生长的氧气和营养。在无血管期，肿瘤主要依靠周围组织的弥散作用来获取营养物质和排泄代谢产物，因而肿瘤的生长通常限制在1
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2mm3，甚至会长时间地潜伏在组织中无明显进展。因此，血管生成对于实体瘤的生长、侵袭非常重要，是影响肿瘤生物学行为恶转移复发的重要因素。新生血管不断生成才能满足肿瘤在生长、发展中的营养代谢的需要。新生的肿瘤血管不仅是肿瘤细胞增殖的内部条件，也是肿瘤细胞浸润和血运转移的第一路径。
[0004]在所有分子中，VEGFR2(血管内皮细胞生长因子受体2)与内皮细胞的增殖和迁移密切相关，并且VEGFR2的mRNA表达水平几乎在所有人体肿瘤中上调，与肿瘤复发、转移和预后不良相关。研究表明，肿瘤细胞及其微环境中产生的VEGF(血管内皮细胞生长因子)与VEGFR2在血管通透性和新血管生成中起关键的作用。VEGF与VEGFR2的结合诱导VEGFR2自磷酸化并激活下游信号，从而影响生理和肿瘤血管生成以及血管通透性。如果使用各种类型的抗血管生成药物抑制肿瘤血管生成，就可以有效地抑制肿瘤生长。最近在小鼠系统中的研究表明，如果能够通过诱导细胞免疫反应从而抑制VEGFR2的表达，就可以抑制肿瘤血管生成。因此，VEGFR2可作为肿瘤靶向治疗的重要靶标。
[0005]肿瘤病人的治疗除了手术切除、放疗外，药物干预是一个重要的手段。目前常用的药物治疗方法是化疗和靶向疗法。化疗的毒副作用众所周知，而靶向疗法目前临床上采用的小分子化合物如伊马替尼(Imatinib)靶向抑制Bcr
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Abl酪氨酸激酶in chronic myelogenic leukemia，埃罗替尼(Erlotinib)抑制EGFR酪氨酸激酶活性，硼替佐米(Bortezomib)抑制蛋白酶体和NF
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κB通路等，但这些药物的半衰期较短且容易导致肿瘤抗药性。目前，Sunitinib和Sorafenib等靶向VEGFR2的小分子抑制剂已经被批准用于治疗相关肿瘤，但目前上市的小分子药物主要针对胞内段，存在毒性大，靶点过多等缺点。蛋白药物如Ramucirumab(雷莫芦单抗)、Bevacizumab(贝伐珠单抗)等可以通过阻断VEGF与VEGFR2结合达到抑制受体信号的作用，但使用一段时间后往往会产生抗药性，并且蛋白类药物由
于分子量较大，注射到人体一般会有免疫原性。
[0006]自1921年发现胰岛素以来，肽类药物已被开发用于治疗各种疾病，包括癌症，免疫疾病，代谢紊乱，病毒感染，心血管疾病和骨质疏松症。目前已鉴定出了7000多种天然存在的多肽，这些肽通常在人体生理学中具有关键作用，包括作为激素、神经递质、生长因子、离子通道配体或抗感染剂的作用。一般来说，多肽是具有高选择性和高有效性的信号分子，可以与特定的细胞表面受体结合，如G蛋白偶联受体(GPCR)或离子通道，在那里它们能够触发细胞内效应，因此多肽为密切模仿自然途径的治疗干预提供了机会。鉴于其具有良好的安全性、耐受性和疗效，迅速成为了设计新型治疗药物的良好选择，与传统小分子相比，这一方面也可能是多肽的主要区别因素。此外，与基于蛋白质的生物制药相比，多肽具有较低的生产复杂性，因此，生产成本也较低，通常接近小分子的生产成本。因此，治疗性多肽是开发抗血管生成药物的新颖且有前途的工具。
[0007]在近20年的临床研究中，有超过300种用于不同疾病应用的治疗性肽正在开发中，有80多种多肽药物进入市场。然而，这些获得批准的多肽药物基本都没有抑制血管生成的作用。

技术实现思路

[0008]本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种鲨鱼源小分子多肽。
[0009]本专利技术的另一目的在于提供所述鲨鱼源小分子多肽的应用。
[0010]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0011]一种鲨鱼源小分子多肽，其氨基酸序列如下所示：KGKFKRPPLKRVRMSADAML。
[0012]所述的鲨鱼源小分子多肽，其氨基酸序列来自鲨鱼软骨蛋白，可通过本领域常规方法合成得到，如Fmoc固相合成法等。
[0013]所述的鲨鱼源小分子多肽在制备抗血管生成和/或抗肿瘤药物中的应用。
[0014]所述的抗血管生成的药物为抑制血管内皮细胞增殖、迁移，抑制肿瘤血管的生成，抑制毛细血管和分支血管的生成，和/或抑制肠道血管生成的药物。
[0015]所述的血管为新生血管。
[0016]所述的血管内皮细胞为人脐静脉内皮细胞。
[0017]所述的肠道血管生成包括斑马鱼幼鱼的肠道血管生成。
[0018]所述的肿瘤为具有VEGFR2(血管内皮细胞生长因子受体2)表达生长依赖性的肿瘤细胞和/或肿瘤组织；优选为肝癌。
[0019]所述的肿瘤细胞包括人肝癌细胞；优选为人肝癌细胞SMMC
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7721、HepG2、Huh7、MHCC97H和MHCC97L中的至少一种；进一步优选为人肝癌细胞MHCC97H或MHCC97L；更优选为人肝癌细胞MHCC97L。
[0020]所述的抗肿瘤药物包括降低ERK1/2的磷酸化水平和/或抑制VEGFR信号通路激活的药物。
[0021]所述的鲨鱼源小分子多肽的有效浓度为12.5～250μmol/L；优选为50μmol/L。
[0022]所述的药物可以含有一种或者是至少两种药学上可以接受的载体。
[0023]所述的载体优选为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、
吸附载体、表面活性剂和润滑剂等。
[0024]所述的药物可采用本领域的常规方法制成各种剂型，包括汤剂、片剂、丸剂、胶囊剂、针剂(粉针剂)、颗粒剂(冲剂)、口服液和糖浆剂，或者采用微纳米技术制成的片剂、胶囊剂、针剂(粉针剂)和颗粒剂等。
[0025]本专利技术先利用CCK8法对HUVEC细胞进行检测，从中筛选出对HUVEC细胞具有显著的抑制增殖效果的短肽，然后在克隆形成实验中进一步观察到了对肿瘤细胞的抑制作用。
[0026]进一步的，本专利技术对小分子多肽(命名为B2)与表达VEGFR2的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鲨鱼源小分子多肽，其特征在于，其氨基酸序列如下所示：KGKFKRPPLKRVRMSADAML。2.权利要求1所述的鲨鱼源小分子多肽在制备抗血管生成和/或抗肿瘤药物中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的肿瘤为具有VEGFR2表达生长依赖性的肿瘤细胞和/或肿瘤组织。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的肿瘤为肝癌。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的抗血管生成的药物为抑制血管内皮细胞增殖、迁移，抑制肿瘤血管的生成，抑制毛细血管和分支血管的生成，和/或抑制肠道血管生成的药物；所述的抗肿瘤药物为降低ERK1/2的磷酸化水平和/或抑制VEGFR信号通路激活的药物。6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈小佳，洪岸，谢俊业，孟其麟，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：