酮洛芬凝胶有关物质的分析方法技术

本发明专利技术公开了一种酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，采用高效液相色谱法，将酮洛芬凝胶待测样品用pH<3.0的稀释剂溶解配制成供试品溶液，以磷酸溶液或磷酸盐溶液为流动相A、乙腈为流动相B，在十八烷基硅烷键合硅胶的小粒径色谱柱上进行梯度洗脱。本发明专利技术的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，能有效克服已有药典标准方法耗时长、灵敏度低、分离效果差、峰形不稳定等缺陷，且能同时分析原料药和制剂工艺杂质及降解杂质；降低了酮洛芬凝胶检测成本，提高工作效率，有助于完善该品种的质量控制和安全保证。证。证。

【技术实现步骤摘要】
酮洛芬凝胶有关物质的分析方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，特别涉及一种酮洛芬凝胶有关物质的分析方法。

技术介绍

[0002]酮洛芬（α
‑
甲基
‑3‑
苯甲酰基
‑
苯乙酸）是白色结晶性粉末；无臭或几乎无臭。分子式为C
16
H
14
O3，分子量为254.29，该结构式如下：。
[0003]酮洛芬是2
‑
芳基丙酸类非甾体抗炎药物，主要通过可逆性抑制环氧合酶（COXs）、促炎肽和/或脂氧化酶（LOXs）的活性，从而抑制致炎性物质前列腺素（PGs）、白三烯（LTs）及血栓素（TXs）的生物合成，使缓激肽释放减少，进而发挥其良好的解热、镇痛和抗炎作用。酮洛芬在临床上广泛用于治疗各种类风湿关节炎、风湿性关节炎、强直性脊柱炎、骨性关节炎、痛风性关节炎以及痛经、牙痛、术后疼痛、癌症疼痛和急性肾绞痛等各种疼痛。国内外酮洛芬上市剂型主要为片剂、胶囊剂、栓剂、搽剂、凝胶、凝胶贴膏和贴剂等。
[0004]酮洛芬凝胶主要用于各种骨骼肌损伤的急慢性软组织(肌肉、韧带、筋膜)扭伤、挫伤，以及肌肉劳损所引起的疼痛；也可用于骨关节炎的对症治疗。目前国内上市的酮洛芬凝胶共有两种规格（2.5%和3%），已收载该品种有关物质检测方法的药典标准包括进口注册标准JX20190266和英国药典2022年版（英文缩写为BP2022）。该两种方法所涉及的检测手段对于酮洛芬凝胶仍有部分杂质不能检测出来，并且耗时长，灵敏度低，分离效果差，峰形不稳定，仍有待改进。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种能有效地分析和检测酮洛芬凝胶制剂中有关物质的方法，该方法耗时短，灵敏度高，分离效果好，能有效改善色谱峰峰形。
[0006]根据本专利技术的一个方面，提供一种酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，采用高效液相色谱法，将酮洛芬凝胶待测样品用pH<3.0的稀释剂溶解配制成供试品溶液，以磷酸溶液或磷酸盐溶液为流动相A、乙腈为流动相B，在十八烷基硅烷键合硅胶的小粒径色谱柱上进行梯度洗脱。
[0007]进一步地，所述小粒径色谱柱为粒径≤3.0μm的色谱柱。
[0008]进一步地，所述稀释剂的组成为磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液，其中，所述磷酸盐缓冲溶液的pH值<3.0，所述磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为75～83：25～17。优选地，所述磷酸盐缓冲溶液选自磷酸二氢钾水溶液、磷酸二氢钠水溶液，采用磷酸调节pH值，pH值优选为<3.0，磷酸盐缓冲液与乙腈比例优选为80:20。
[0009]进一步地，所述酮洛芬凝胶有关物质的分析方法采用的梯度洗脱的程序为：。
[0010]进一步地，所述流动相A为磷酸溶液或磷酸盐溶液，pH值为3.45～3.52。其中，优选地，所述磷酸盐缓冲溶液选自磷酸二氢钾水溶液、磷酸二氢钠水溶液，采用磷酸调节pH值。
[0011]进一步地，所述酮洛芬凝胶有关物质的分析方法所要检测分析的有关物质包括以下杂质：
。
[0012]进一步地，所述的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，包括以下步骤：1）供试品溶液的配制：取酮洛芬凝胶用稀释剂溶解配制成含酮洛芬0.25mg/ml的溶液，离心，取上清液滤过，即得；优选地，离心转速为8000～10000r/min；优选地，取上清液滤过时，滤膜采用聚四氟乙烯（PTFE）材质，孔径为0.22～0.45
µ
m；2）对照品溶液的制备：取杂质C对照品、杂质A对照品和酮洛芬乙酯对照品各适量，用稀释剂配制成每1ml中约含杂质C 0.5μg、杂质A 0.5μg、酮洛芬乙酯5μg的溶液；
3）对照溶液的配制：取供试品溶液，用稀释剂稀释100倍，即得；4）采用高效液相色谱测定：采用C18的小粒径色谱柱，取对照品溶液、对照溶液、供试品溶液，注入色谱仪，进行梯度洗脱。
[0013]进一步地，所述的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，液相色谱的分析条件包括以下（i）至（iv）中的一项或者多项：（i）柱温为30℃～38℃，（ii）流速为0.95～1.05ml/min，（iii）检测波长为231～235nm，（iv）进样量10～20 μl。
[0014]本专利技术的有益效果：本专利技术的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，能有效克服已有药典标准方法耗时长、灵敏度低、分离效果差、峰形不稳定等缺陷，且能同时分析原料药和制剂工艺杂质及降解杂质；降低了酮洛芬凝胶检测成本，提高工作效率，有助于完善该品种的质量控制和安全保证。本专利技术方法所有仪器设备及试剂均为常规用品，试验操作无苛刻条件，成本低廉，色谱柱的使用寿命长；本专利技术的检测方法专属性好，各杂质和主峰之间、各已知杂质之间均有良好的分离；灵敏度高，适合进行杂质控制，能够满足有关物质检测的要求。
附图说明
[0015]图1为不同pH值稀释剂下杂质C峰形对比图。
[0016]图2为系统适用性试验的色谱图。
[0017]图3为空白凝胶干扰试验空白凝胶的色谱图。
[0018]图4为空白凝胶干扰试验自制酮洛芬凝胶供试品溶液的色谱图。
[0019]图5为强制降解试验酸破坏供试品溶液的色谱图。
[0020]图6为强制降解试验碱破坏供试品溶液的色谱图。
[0021]图7为强制降解试验高温固体破坏供试品溶液的色谱图。
[0022]图8为强制降解试验氧化破坏供试品溶液的色谱图。
[0023]图9为强制降解试验光照固体破坏供试品溶液的色谱图。
具体实施方式
[0024]下面通过具体实施例对本申请作进一步详细说明。以下实施例仅对本申请进行进一步说明，不应理解为对本申请的限制。
[0025]本专利技术所用的试剂和原辅料均市售可得。
[0026]实施例1考察稀释剂的pH值。
[0027]稀释剂的组成为：不同pH值的磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液（体积比80:20）。不同pH值的磷酸盐缓冲液为：66～70g/L的磷酸二氢钾溶液（分别用磷酸调节pH值至3.5、3.0、2.8、2.0）
‑
水（体积比2:55）。
[0028]杂质C对照品贮备液：取杂质C对照品适量，分别用pH3.5、pH3.0、pH2.8、pH2.0稀释剂稀释制成含杂质C约20μg/ml的溶液。
[0029]供试品加标溶液（pH3.5）：取自制酮洛芬凝胶（规格：2.5%）500mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀释剂（pH3.5）20ml，同时量取1.25ml杂质C对照品贮备液（以pH3.5稀释剂配制）置同一50ml量瓶中，振摇使溶解，用稀释剂（pH3.5）稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液滤过，即得。
[0030]供试品加标溶液（pH3.0）：取自制酮洛芬凝胶（规格：2.5%）500mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀释剂（pH3.0）20ml，同时量取1.25ml杂质C对照品贮备液（以pH3.0稀释剂配制）置本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，采用高效液相色谱法，其特征在于，将酮洛芬凝胶待测样品用pH<3.0的稀释剂溶解配制成供试品溶液，以磷酸溶液或磷酸盐溶液为流动相A、乙腈为流动相B，在十八烷基硅烷键合硅胶的小粒径色谱柱上进行梯度洗脱。2.根据权利要求1所述的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，其特征在于，所述小粒径色谱柱为粒径≤3.0μm的色谱柱。3.根据权利要求1所述的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，其特征在于，所述稀释剂的组成为磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液，其中，所述磷酸盐缓冲溶液的pH值<3.0，所述磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为75～83：25～17。4.根据权利要求1所述的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：。5.根据权利要求1所述的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，其特征在于，所述流动相A为磷酸溶液或磷酸盐溶液，其pH值为3.45～3.52。6.根据权利要求5所述的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲溶液选自磷酸二氢钾水溶液、磷酸二氢钠水溶液，采用磷酸调节pH值。7.根据权利要求1～6任一项所述的酮洛芬凝胶有关物质的分析方法，其特征在于，所述有关物质包括以下杂质：
。8....

【专利技术属性】
技术研发人员：罗丽娜，聂宁，胡晓露，李丽彩，
申请(专利权)人：湖南普道医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：