【技术实现步骤摘要】
替普瑞酮的检测方法及替普瑞酮的检测试剂盒
[0001]本申请属于生物样品中的药品检测
,更具体地说,是涉及替普瑞酮的检测方法及替普瑞酮的检测试剂盒。
技术介绍
[0002]由于多数慢性胃炎患者无任何症状,因此难以获得确切的患病率,幽门螺杆菌现症感染者几乎均存在慢性活动性胃炎,绝大多数血清学检测(现症感染或既往感染)阳性者存在慢性胃炎,除幽门螺杆菌感染外,胆汁反流、药物、自身免疫等因素也可引起慢性胃炎。替普瑞酮胶囊适用于急性胃炎、慢性胃炎急性加重期的胃粘膜病变(糜烂、出血、潮红、浮肿)的改善;胃溃疡。
[0003]替普瑞酮属于胃粘膜保护剂,抗溃疡作用显著,不会对肠胃正常生理功能产生影响,确保胃酸正常分泌及正常胃动力。替普瑞酮通过促进胃粘膜分泌,内源性前列腺素生成及热休克蛋白HSP70表达。热休克蛋白HSP70能诱导炎症细胞凋亡,减轻机体炎症反应,并能修复受损的蛋白质,以此促使受损蛋白质修复。另外,替普瑞酮能增强胃粘膜分泌,以此提高胃粘膜屏障及保护功能,并能刺激胃粘膜再生,促进胃粘膜修复。替普瑞酮脂溶性高,其吸收需在胆汁酸乳化的帮助下进行,在空腹状态下几乎不吸收,所以,餐后服药的血浆中替普瑞酮的含量比空腹服药的血浆中替普瑞酮的含量高,目前该药物的临床药动学研究均在餐后条件下进行。
[0004]关于替普瑞酮检测的文献非常少,目前采用的检测方法的前处理大多采用固相萃取或液液萃取,然后将萃取物进行浓缩,待测物替普瑞酮的损失率高,导致检测结果误差大。
技术实现思路
[0005]基于此,本申请 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种替普瑞酮的检测方法,其特征在于:包括预处理,所述预处理包括以下步骤:提供含有替普瑞酮的血浆样品,将所述血浆样品与内标工作液进行混合,然后加入沉淀剂,所述沉淀剂包括甲醇和乙腈,进行蛋白沉淀,得到内标混合液;将所述内标混合液进行固液分离处理,取清液,得到内标样品。2.如权利要求1所述的替普瑞酮的检测方法,其特征在于:所述血浆样品包括待测样品和不同浓度的标准样品,所述预处理包括以下步骤:将所述待测样品、标准样品分别与所述内标工作液进行混合处理,然后分别加入所述沉淀剂,进行蛋白沉淀,分别得到内标待测混合液、内标标准混合液;将所述内标待测混合液、内标标准混合液分别进行固液分离处理,取清液,分别对应得到内标待测样品、内标标准样品。3.如权利要求2所述的替普瑞酮的检测方法,其特征在于:进行所述预处理后,还包括以下步骤:取不同浓度的所述内标标准样品,进行LC
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MS/MS色谱检测,得到标准图谱,进行线性回归,得到血浆中替普瑞酮的线性回归方程及相关系数;将所述内标待测样品在与所述内标标准样品相同的检测条件下进行LC
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MS/MS色谱检测,得到所述内标待测样品的质谱分析结果,确定所述内标待测样品中替普瑞酮的含量。4.如权利要求3所述的替普瑞酮的检测方法,其特征在于:所述LC
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MS/MS色谱检测中,液相色谱的检测条件如下:色谱柱:Waters ACQUITY UPLC Protein BEH C4;自动进样器温度:4℃
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10℃;柱温:30℃
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50℃;流速:0.3mL.min
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0.4mL.min
‑1;进样量:15μL
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20μL;流动相A相:pH为4
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5的有机酸水溶液,所述有机酸为挥发性酸;流动相B相:体积浓度为30%
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60%的甲醇乙腈溶液;洗脱方式为梯度洗脱;和/或,所述LC
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MS/MS色谱检测中,所述质谱的检测条件如下:离子源:电喷雾离子源;离子源温度:400℃;源喷射电压:5000V;入口电压:10V;碰撞气:10psi;气帘气:25psi;离子源气体1:75psi;离子源气体2:50.0psi;电离模式:正离子;信号采集模式:MRM;电离模式:正离子;离子对:
离子对Q1(Da)Q3(Da)去簇电压(V)碰撞能(V)扫描时间(ms)待测物331.200231.30060.00019.500300.0内标334.200234.30055.00016.000300.0。5.如权利要求4所述的替普瑞酮的检测方法,其特征在于:所述梯度洗脱的程序包括:提供质量百分含量为35%的流动相A相溶液,提供质量百分含量为65%的流动相B相溶液,于0
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0.70min进行第一梯度洗...
【专利技术属性】
技术研发人员:欧阳忠华,唐智,董峻,
申请(专利权)人:长沙都正生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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