用于治疗眼部疾病的抗-VEGF及抗-TrkB双特异性结合分子制造技术

本发明专利技术涉及特异性结合血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor；VEGF)及原肌球蛋白受体激酶B(Tropomyosin receptor kinase B；TrkB)的结合分子及其在药物中的用途；包含其的药物组合物；及使用其作为药剂用于治疗和/或预防眼部疾病的方法。为药剂用于治疗和/或预防眼部疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗眼部疾病的抗
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VEGF及抗
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TrkB双特异性结合分子


[0002]本专利技术涉及与血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor；VEGF)及原肌球蛋白受体激酶B(Tropomyosin receptor B；TrkB)结合的结合分子及其在药物中的用途；包含其的药物组合物；及使用其作为药剂用于治疗和/或预防眼部疾病的方法。

技术介绍

[0004]黄斑变性且特别是老年性黄斑变性(AMD)为发达国家中失明的主要原因。其晚期阶段分成湿性新生血管性AMD及干性地图状萎缩(geographic atrophy；GA)。wAMD的特征在于眼部新血管形成及血管渗漏增加以及进行性神经退化及感光体损失。抗VEGF治疗为此疾病的当前标准照护。疗法通常由靶向VEGF的药剂(阿瓦斯汀(Avastin)、雷珠单抗(Lucentis)、艾力雅(Eylea)及最近的Beovu)组成，所述药剂通过注射至眼睛后部给药。
[0005]尽管VEGF清除减少血管渗漏且因此最初改善视力，但视网膜仍处于受损条件下，导致进一步的细胞损失。尽管过去十年间已见到针对wAMD伴随玻璃体内抗VEGF的突破性治疗，但无针对地图状萎缩(一种减缓进行性疾病，最终导致失明)的治疗选择。
[0006]在wAMD诊断后两年内且实时成功进行抗VEGF治疗，但几乎三分之一的患者罹患进行性地图状萎缩。其为与进行性视觉障碍相关的较晚阶段。患者失去其视力及独立性。其日常生活因为不能驾驶、阅读、看电视或识别面部而严重受影响。wAMD患者通常在现实世界环境中治疗不足且需要返回门诊以进行频繁的玻璃体内注射。
[0007]目前无治疗可用于任何类型的地图状萎缩，包括在wAMD期间发展的地图状萎缩。此外，一些证据表明，较频繁的抗VEGF治疗可能与较高比率的地图状萎缩发展相关。
[0008]因此，迫切需要提供可在抗VEGF治疗中频繁使用而同时减轻并行地图状萎缩发展的风险的新治疗性生物分子。

技术实现思路

[0010]本专利技术基于将与血管内皮生长因子(VEGF)特异性结合的抗原结合位点与同原肌球蛋白受体激酶B(TrkB)特异性结合的抗原结合位点组合在单一结合分子内的概念。
[0011]在第一方面中，本专利技术涉及一种结合分子，其包含至少一个与血管内皮生长因子(VEGF)特异性结合的抗原结合位点及至少一个与原肌球蛋白受体激酶B(TrkB)特异性结合的抗原结合位点。在关于第一方面的一个实施方案中，结合分子是双特异性的且是四价的。在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，该至少一个与VEGF特异性结合的抗原结合位点为免疫球蛋白(Ig)分子。在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，该至少一个与TrkB特异性结合的抗原结合位点与Ig分子的重链的C端融合。在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，该至少一个与TrkB特异性结合的抗原结合位点包含一个或多个scFv。在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，该至少一个与VEGF特异性结合的抗原结合位点为免疫球蛋白(Ig)分子，且该至少一个与TrkB特
异性结合的抗原结合位点包含一个或多个scFv。在一相关实施方案中，该一个或多个scFv自N端至C端具有VL
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VH定向。在又一相关实施方案中，该一个或多个scFv与Ig分子的重链的C端融合。在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，Ig分子为单克隆抗体、人类单克隆抗体、人源化单克隆抗体、嵌合抗体、(scFv)2或抗体的片段，诸如F(ab')2片段。在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，Ig分子为IgG或F(ab')2。在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，该一个或多个scFv通过肽接头，优选地长度为约4至20个氨基酸的肽接头与Ig分子融合。
[0012]在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，与TrkB特异性结合的抗原结合位点选自：a)包含轻链CDR的抗原结合位点，该轻链CDR包含SEQ ID NO:201(CDR1)、SEQ ID NO:202(CDR2)及SEQ ID NO:203(CDR3)的氨基酸序列，及包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:204(CDR1)、SEQ ID NO:205(CDR2)及SEQ ID NO:206(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:207(CDR1)、SEQ ID NO:208(CDR2)及SEQ ID NO:209(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:210(CDR1)、SEQ ID NO:211(CDR2)及SEQ ID NO:212(CDR3)的氨基酸序列。
[0013]在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，与TrkB特异性结合的抗原结合位点选自：a)包含轻链可变域及重链可变域的抗原结合位点，该轻链可变域包含与SEQ ID NO:213或215的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链可变域包含与SEQ ID NO:214或216的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列。
[0014]在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，结合分子包含SEQ ID NO:222的氨基酸序列、或SEQ ID NO:223的氨基酸序列、或SEQ ID NO:224的氨基酸序列或SEQ ID NO:225的氨基酸序列。
[0015]在关于根据第一方面或其实施方案中的任一者的结合分子的另一实施方案中，与VEGF特异性结合的抗原结合位点选自由抗原结合位点a)至c)组成的组：a)包含轻链CDR的抗原结合位点，该轻链CDR包含SEQ ID NO:145(CDR1)、SEQ ID NO:146(CDR2)及SEQ ID NO:147(CDR3)的氨基酸序列，及包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:148(CDR1)、SEQ ID NO:149(CDR2)及SEQ ID NO:150(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:151(CDR1)、SEQ ID NO:152(CDR2)及SEQ ID NO:153(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种结合分子，其包含至少一个与血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor；VEGF)特异性结合的抗原结合位点及至少一个与原肌球蛋白受体激酶B(Tropomyosin receptor kinase B；TrkB)特异性结合的抗原结合位点。2.根据权利要求1的结合分子，其中该分子是双特异性的且是四价的。3.根据权利要求1或2的结合分子，其中该至少一个与VEGF特异性结合的抗原结合位点为免疫球蛋白(Ig)分子。4.根据权利要求3的结合分子，其中该至少一个与TrkB特异性结合的抗原结合位点与该Ig分子的重链的C端融合。5.根据权利要求1至4中任一项的结合分子，其中该至少一个与TrkB特异性结合的抗原结合位点包含一个或多个scFv。6.根据权利要求1至5中任一项的结合分子，其中该至少一个与VEGF特异性结合的抗原结合位点为免疫球蛋白(Ig)分子，且该至少一个与TrkB特异性结合的抗原结合位点包含一个或多个scFv。7.根据权利要求5或6的结合分子，其中该一个或多个scFv自N端至C端具有VL
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VH定向。8.根据权利要求5至7中任一项的结合分子，其中该一个或多个scFv与该Ig分子的重链的C端融合。9.根据权利要求3至8中任一项的结合分子，其中该Ig分子为单克隆抗体、人类单克隆抗体、人源化单克隆抗体、嵌合抗体、(scFv)2或抗体的片段，诸如F(ab')2片段。10.根据权利要求3至9中任一项的结合分子，其中该Ig分子为IgG或F(ab')2。11.根据权利要求5至10中任一项的结合分子，其中该一个或多个scFv通过肽接头，优选通过长度为约4至20个氨基酸的肽接头与该Ig分子融合。12.根据权利要求1至11中任一项的结合分子，其中与TrkB特异性结合的该抗原结合位点选自：a)包含轻链CDR的抗原结合位点，该轻链CDR包含SEQ ID NO:201(CDR1)、SEQ ID NO:202(CDR2)及SEQ ID NO:203(CDR3)的氨基酸序列，及包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:204(CDR1)、SEQ ID NO:205(CDR2)及SEQ ID NO:206(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:207(CDR1)、SEQ ID NO:208(CDR2)及SEQ ID NO:209(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:210(CDR1)、SEQ ID NO:211(CDR2)及SEQ ID NO:212(CDR3)的氨基酸序列。13.根据权利要求1至12中任一项的结合分子，其中与TrkB特异性结合的该抗原结合位点选自：a)包含轻链可变域及重链可变域的抗原结合位点，该轻链可变域包含与SEQ ID NO:213或215的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链可变域包含与SEQ ID NO:214或216的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列。
14.根据权利要求1至13中任一项的结合分子，其包含SEQ ID NO:222的氨基酸序列、或SEQ ID NO:223的氨基酸序列、或SEQ ID NO:224的氨基酸序列或SEQ ID NO:225的氨基酸序列。15.根据权利要求1至14中任一项的结合分子，其中与VEGF特异性结合的该抗原结合位点选自由抗原结合位点a)至c)组成的组：a)包含轻链CDR的抗原结合位点，该轻链CDR包含SEQ ID NO:145(CDR1)、SEQ ID NO:146(CDR2)及SEQ ID NO:147(CDR3)的氨基酸序列，及包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:148(CDR1)、SEQ ID NO:149(CDR2)及SEQ ID NO:150(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:151(CDR1)、SEQ ID NO:152(CDR2)及SEQ ID NO:153(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:154(CDR1)、SEQ ID NO:155(CDR2)及SEQ ID NO:156(CDR3)的氨基酸序列；b)包含轻链CDR的抗原结合位点，该轻链CDR包含SEQ ID NO:157(CDR1)、SEQ ID NO:158(CDR2)及SEQ ID NO:159(CDR3)的氨基酸序列，及包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:160(CDR1)、SEQ ID NO:161(CDR2)及SEQ ID NO:162(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:163(CDR1)、SEQ ID NO:164(CDR2)及SEQ ID NO:165(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:166(CDR1)、SEQ ID NO:167(CDR2)及SEQ ID NO:168(CDR3)的氨基酸序列；c)包含轻链CDR的抗原结合位点，该轻链CDR包含SEQ ID NO:169(CDR1)、SEQ ID NO:170(CDR2)及SEQ ID NO:171(CDR3)的氨基酸序列，及包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:172(CDR1)、SEQ ID NO:173(CDR2)及SEQ ID NO:174(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:175(CDR1)、SEQ ID NO:176(CDR2)及SEQ ID NO:177(CDR3)的氨基酸序列；或包含重链CDR的抗原结合位点，该重链CDR包含SEQ ID NO:178(CDR1)、SEQ ID NO:179(CDR2)及SEQ ID NO:180(CDR3)的氨基酸序列。16.根据权利要求1至15中任一项的结合分子，其中与VEGF特异性结合的该抗原结合位点选自由抗原结合位点a)至d)组成的组：a)包含轻链可变域及重链可变域的抗原结合位点，该轻链可变域包含与SEQ ID NO:181的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链可变域包含与SEQ ID NO:182的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列；b)包含轻链可变域及重链可变域的抗原结合位点，该轻链可变域包含与SEQ ID NO:183的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、
91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链可变域包含与SEQ ID NO:184的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列；c)包含轻链可变域及重链可变域的抗原结合位点，该轻链可变域包含与SEQ ID NO:189的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链可变域包含与SEQ ID NO:190、191、192或194的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列；d)包含轻链可变域及重链可变域的抗原结合位点，该轻链可变域包含与SEQ IDNO:193的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链可变域包含与SEQ ID NO:190、191、192或194的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列。17.根据权利要求1至15中任一项的结合分子，其中与VEGF特异性结合的该抗原结合位点选自由抗原结合位点a)至d)组成的组：a)包含轻链及重链的抗原结合位点，该轻链包含与SEQ ID NO:185的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链包含与SEQ ID NO:186的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列；b)包含轻链及重链的抗原结合位点，该轻链包含与SEQ ID NO:187的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链包含与SEQ ID NO:188的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列；c)包含轻链及重链的抗原结合位点，该轻链包含与SEQ ID NO:195的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链包含与SEQ ID NO:196、197、198或200的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列；d)包含轻链及重链的抗原结合位点，该轻链包含与SEQ ID NO:199的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列，该重链包含与SEQ ID NO:196、197、198或200的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列。18.一种结合分子，其包含轻链及重链，该轻链包含与SEQ ID NO:1、3、5、7、9、11、13、
15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141或143的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列；该重链包含与SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142或144的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％一致的氨基酸序列。19.一种结合分子，其包含：(i)包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列的轻链及包含SEQ IDNO:42的氨基酸序列的重链；或(ii)包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的轻链及包含SEQ IDNO:44的氨基酸序列的重链；或(iii)包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列的轻链及包含SEQ IDNO:46...

【专利技术属性】
技术研发人员：P，
申请(专利权)人：勃林格殷格翰国际有限公司，
类型：发明
国别省市：