一种靶向CD47的单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术为一种靶向CD47的单克隆抗体及其应用，提供了以高亲和力与人CD47特异性结合的分离的单克隆抗体。还提供了编码本发明专利技术抗体的核酸分子、用于表达本发明专利技术抗体的表达载体、宿主细胞和方法，以及包含本发明专利技术抗体的药用组合物。本发明专利技术还公开了所述的抗体用于治疗肿瘤疾病的用途。病的用途。

【技术实现步骤摘要】
一种靶向CD47的单克隆抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物制药领域，具体而言，涉及针对人CD47的单克隆抗体及其在疾病 治疗中的应用。

技术介绍

[0002]自免疫检查点如PD1/PDL1发现以来,免疫检查点抗体迅速转化成为临床治疗方案， 成为肿瘤治疗领域中最重要的进展之一(Sharpe AH.Immunological reviews. 2017；276(1):5
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8)。近年来研究表明，CD47
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SIRPα信号轴是巨噬细胞和其他先天免疫 细胞的吞噬免疫检查点(Logtenberg et al.,Immunity 2020；52,742
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752).Matlung HL,et al.Immunological reviews.2017；276(1):145
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164)。CD47(整合素相关蛋白) 属于免疫球蛋白超家族，含有一个胞外V区、五次跨膜结构域和一个可变剪接的短的胞 内结构域。CD47在正常细胞表面广泛表达，通过与巨噬细胞表面的SIRPα (signal
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regulatory proteinα)结合，释放“别吃我”的信号，从而保护健康细胞 不被巨噬细胞“吃掉”(Chao,M.P.et al.Cell 2010；142,699)。老化的红细胞、 血小板和淋巴造血细胞缺乏CD47会导致巨噬细胞快速清除这些细胞。然而，多种肿瘤 细胞表面过量表达CD47，可以通过与吞噬细胞上表达的SIRPα结合而抑制吞噬作用。 大量临床前研究数据表明，单克隆抗体或Fc融合蛋白能有效阻断CD47
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SIRPα轴，激活 巨噬细胞的吞噬功能，对多种肿瘤有显著的杀伤作用(Zhang M.et al.PloS one. 2016；11(4):e01535509,Ring NG.et al.PNAS 2017；114(49):E10578
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E10585)。CD47 抗体已在人类淋巴瘤、膀胱癌、结肠癌、胶质细胞瘤和乳腺癌等的各种临床前模型中显 示出功效(Advani R.et al.NEJM.2018；379(18):1711
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1721)。目前处于临床研究中的 抗CD47药物主要如表1中所列。
[0003]表1 CD47抗体研发情况
[0004][0005]尽管抗CD47抗体在部分癌种中的治疗进展令人鼓舞，但单药治疗效果有限，临床 实验中也观察到抗CD47抗体治疗的有效性因癌症类型和不同的研究而不同，近期也爆 出由于毒性问题美国药监局FDA暂停magrolimab多项临床试验的新闻，给CD47单抗开 发蒙上阴影。因此联合用药以及在除血液肿瘤之外的实体瘤中的治疗仍亟待探索,开发 更有效的抗CD47抗体将具有重大意义。
[0006]专利技术概述
[0007]本专利技术提供了以高亲和力与人CD47特异性结合的分离的单克隆抗体。还提供了编码 本专利技术抗体的核酸分子、用于表达本专利技术抗体的表达载体、宿主细胞和方法，以及包含 本专利技术抗体的药用组合物。
[0008]在一方面，本专利技术提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含：
[0009](a)重链可变区CDR1，其包含与选自SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO： 14或SEQ ID NO：20所示一致的氨基酸序列；
[0010](b)重链可变区CDR2，其包含与选自SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO： 15或SEQ ID NO：21所示一致的氨基酸序列；
[0011](c)重链可变区CDR3，其包含与选自SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO： 16或SEQ ID NO：22所示一致的氨基酸序列；
[0012](d)轻链可变区CDR1，其包含与选自SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO： 12、
SEQ ID NO：17或SEQ ID NO：23所示一致的氨基酸序列；
[0013](e)轻链可变区CDR2，其包含与选自SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：18、或SEQ ID NO： 24所示一致的氨基酸序列；和
[0014](f)轻链可变区CDR3，其包含与选自SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO： 13、SEQ ID NO：19或SEQ ID NO：25所示一致的氨基酸序列；
[0015]其中所述抗体或其抗原结合部分与人CD47特异性结合。
[0016]在另一实施方案中，本专利技术提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其重链可 变区和轻链可变区的CDR序列同源性至少为91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％， 99％或100％。
[0017]在另一实施方案中，本专利技术提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含：
[0018](a)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO： 2和SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨 基酸序列分别与SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列一致； 或
[0019](b)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：7、SEQ ID NO： 8和SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨 基酸序列分别与SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列一 致；或
[0020](c)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO： 2和SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨 基酸序列分别与SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：13所示的氨基酸序列一 致；或
[0021](d)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3 的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：19所示的氨基酸 序列一致；或
[0022](e)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3 的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：24和SEQ ID NO：25所示的氨基酸 序列一致；
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含：(a)重链可变区CDR1，其包含与选自SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：20所示一致的氨基酸序列；(b)重链可变区CDR2，其包含与选自SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：15或SEQ ID NO：21所示一致的氨基酸序列；(c)重链可变区CDR3，其包含与选自SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：16或SEQ ID NO：22所示一致的氨基酸序列；(d)轻链可变区CDR1，其包含与选自SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：17或SEQ ID NO：23所示一致的氨基酸序列；(e)轻链可变区CDR2，其包含与选自SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：18、或SEQ ID NO：24所示一致的氨基酸序列；和(f)轻链可变区CDR3，其包含与选自SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：19或SEQ ID NO：25所示一致的氨基酸序列；其中所述抗体或其抗原结合部分与人CD47特异性结合。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于，其包含：(a)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列一致；或(b)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8和SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列一致；或(c)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：13所示的氨基酸序列一致；或(d)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：19所示的氨基酸序列一致；或(e)重链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22所示的氨基酸序列一致，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：24和SEQ ID NO：25所示的氨基酸序列一致；其中所述抗体或其抗原结合部分与人CD47特异性结合。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于，其包含：(a)重链可变区，其氨基酸序列与SEQ ID NO：26所示的氨基酸序列一致；以及轻链可变区，其氨基酸序列与SEQ ID NO：30所示的氨基酸序列一致；或(b)重链可变区，其氨基酸序列与SEQ ID NO：34所示的氨基酸序列一致；以及轻链可变区，其氨基酸序列与SEQ ID NO：38所示的氨基酸序列一致；或(c)重链可变区，其氨基酸序列与SEQ ID NO：42所示的氨基酸序列一致；以及轻链可变区，其氨基酸序列与SEQ ID NO：46所示的氨基酸序列一致；或(d)重链可变区，其氨基酸序列与SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：林基祯，方树彬，翁焕娇，
申请(专利权)人：福州创方医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：