十四肽生长抑素的制备方法技术

一种十四肽生长抑素的制备方法，其特征在于，采用以下步骤：　Ａ．分别制备中间体ａ、中间体ｂ和中间体ｃ；　＊＊＊　中间体ａ　Ｚ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｔｒｐ－ＯＨ　中间体ｂ　＊＊＊　中间体ｃ　在中间体ａ的制备中，采 用ＤＣＣ及３－（二乙氧基磷酰基）－１，２，３，－苯并三嗪－４－酮作为缩合剂，　在中间体ｂ的制备中，采用ＤＣＣ作为缩合剂；　在中间体ｃ的制备中，采用叠氮基磷酸二苯脂作为缩合剂；　Ｂ．中间体ｂ，中间体ｃ以叠氮基磷酸二苯脂作为缩 合剂进行缩合，得到下述的中间体ｄ：　＊＊＊　中间体ｄ　Ｃ．中间体ａ和中间体ｄ以３－（二乙氧基磷酰基）－１，２，３，－苯并三嗪－４－酮作为缩合剂进行缩合得到十四肽生长抑素。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物的制备方法，具体地说，本专利技术是一种十四肽生长 抑素的制备方法。
技术介绍
十四肽生长抑素是有十四个氨基酸残基组成的、具有生物活性的多 肽氨基酸产品。适用于急性胃溃疡出血，糜烂和出血性胃炎所致的出血、 严重急性食道静脉曲张出血、胰胆和胃肠娄及急性胰腺炎的治疗以及胰 脉术后并发症的预防。十四肽生长抑素具有以下的结构式和结构简式i i Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-T/p-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys中国专利申请第03128951.7号(申请日2003年05月29日，公开 日2004年12月08日)公开了一种生长抑素多肽的合成方法，该合成 方法将Wang树脂为起始原料，以Fmoc保护的氨基酸为单体，逐个接 上氨基酸，用切肽试剂(TFA/EDT/H20/TIS)进行切肽，加入乙醚沉淀粗5肽，在pH7.0-10.0，于15-35。C下，通空气氧化，用C18柱进行分离纯 化。但目前尚没有发现专门用于提高十四肽生长抑素收率的制备方法 的文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种。为了实现上述的专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案 一种，采用以下步骤 步骤A.分别制备中间体a、中间体b和中间体C;Fmoc tBu I IBoc-Ala-Gly-Cys隱Lys-Asn-OH 中间体aNH.2Z-Phe-Phe-Trp-OH 中间体btBu tBu FmocI I IH-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OMe 中间体cI I tBu tBu6在中间体a的制备中，采用0(30及3- (二乙氧基磷酰基)-1， 2， 3，-苯并三嗪-4-酮作为缩合剂，在中间体b的制备中，采用DCC作为縮合剂； 步骤B.中间体b，中间体c以叠氮基磷酸二苯脂作为缩合剂进行缩合，得到下述的中间体d:tBu tBu PmocI I IZ-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser國Cys-OMe 中间体dI I tBu tBu步骤C.中间体&和中间体(1以3- (二乙氧基磷酰基)-1， 2， 3， 苯并三嗪_4-酮作为縮合剂进行縮合得到十四肽生长抑素。如式1所示,中间体(a)+中间体(b)-S---------------------------------------sH-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn—Phe-Phe醒Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH式1在本专利技术中，具体采用以下方法制备中间体a:采用DMF,DCC及3- (二乙氧基磷酰基)-1， 2， 3，-苯并三嗪-4-酮作为縮合剂的条件下， 控制反应温度-20 3(TC ，反应0.5 8小时。反应完成后，加固体NaOH或 10%~30%的液体NaOH进行皂化反应，得到中间体a。如式2所示。Fmoc tBu I IBoc-Ala-Gly-OH + Cys-Lys-Asn-OMe__IN.H2Fmoc t:Bu I IBoc-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-OH 中间体a 式2INH2在本专利技术中，具体采用以下方法制备中间体b:采用DCC，乙酸乙酯或氯甲酸苄脂为溶剂，控制反应温度在0 4(TC，反应0.5 8小时，反应完成后，加固体NaOH或10%~30%的液体NaOH进行皂化反应，得到中间体b。如式3所示。Z-Phe-Phe-OH + Trp-OMe------------------..........Z-Phe-Phe-Trp-OH 中间体b式38在本专利技术中，具体采用以下方法制备中间体C:采用DMF， DCM 或乙酸乙酯为溶剂，反应温度在0 3(TC，反应0.5 8小时，以下述两种 化合物进行縮合反应，得中间体c。如式4所示。<formula>formula see original document page 9</formula>在本专利技术中，具体采用以下方法制备中间体d:中间体b和中间体 c以叠氮基磷酸二苯脂作为縮合剂；在DMF, DPPA, 二氧六环和DCM 存在的条件下反应，反应温度为-20 40。C之间，反应2 40小时，-10 30 。C结晶，得中间体d。在上述的步骤C中，中间体3和中间体(1以3- (二乙氧基磷酰基) -1， 2， 3，-苯并三嗪-4-酮或叠氮基磷酸二苯脂作为縮合剂，在DMF、 二氧六环、乙醚、DCM、 DFA、 40%溴化氢乙酸溶液或哌啶存在的条件下，在-20 3(TC反应，用双氧水或空气氧化，经真空干燥除去反应体系中的溶剂，得十四肽生长抑素。叠氮基磷酸二苯脂作为縮合剂时，是把R-COOH进行叠氮化(R-CON3)，然后再进行縮合反应。在本专利技术所指明的流程中，所使用的保护基、縮合剂为Fmoc:芴甲氧羰基，作为氨基酸保护基，巯基保护基。BOC:叔丁氧羰基，作为氨基酸保护基，羟基保护基。 Z:苄氧羰基，作为氨基酸保护基。OMe:甲酯基团，作为羧基保护基。DPPA:叠氮基磷酸二苯脂，作为新型縮合剂。DEPBT: 3- (二乙氧基磷酰基)-1， 2, 3，-苯并三嗪-4-酮，作为新型缩合剂。在本专利技术所指明的流程中，所使用的溶剂或试剂为DMF: N.N-二甲基甲酰胺；二氧六环；TFA:三氟乙酸；(浓度为0—50%);DCM: 二氯甲烷；乙酸乙脂；哌啶20—607。的DMF溶液。 本专利技术具有以下的优点本专利技术具有肽链接完全、纯化简单易行、收率高、目标产物十四肽 生长抑素光学活性高及化学纯度高的优点。目标产物十四肽生长抑素收率为8—10% (按酪氨酸甲酯计)。 具体实施例方式制备中间体a:采用DMF，DCC及3- (二乙氧基磷酰基)-1， 2， 3，10-苯并三嗪-4-酮作为縮合剂的条件下，控制反应温度25。C，反应5小时。 反应完成后，加20wt。/。的液体NaOH进行皂化反应，得到中间体a。采用DCC，乙酸乙酯或氯甲酸苄脂为溶剂，控制反应温度在20。C， 反应5小时，反应完成后，加20wtM的液体NaOH进行皂化反应，得 到中间体b。采用DMF， DCM或乙酸乙酯为溶剂，反应温度在15°C，反应5 小时，以下述两种化合物做加成反应，得中间体c。Fmoc-Cys-Ome 化合物1.tBu tBuI I Z-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-OH 化合物2I I tBu tBu中间体b和中间体c以叠氮基磷酸二苯脂作为縮合剂，在DMF, DPPA， 二氧六环和DCM存在的条件下反应，反应温度为20°C，反应 IO小时，-l(TC结晶，得中间体d。中间体3和中间体(1以3- (二乙氧基磷酰基)-1， 2， 3，-苯并三嗪 -4-酮作为縮合剂，在DMF存在的条件下，在2(TC反应，用双氧水氧化， 经真空干燥除去反应体系中的溶剂，得十四肽生长抑素。实施例2制备中间体a:采用DMF,DCC及3- (二乙氧基磷酰基)-1， 2， 3，-苯并三嗪-4-酮作为縮合剂的条件下，控制反应温度25。C，反应2小时。 反应完成后，加20wt。/o的液体NaOH进行皂化反应，得到中间体a。采用DCC，乙酸乙酯或氯甲酸苄脂为溶剂，控制反应温度在2(TC， 反应2小时，反应完成后，加20wt。/。的液体NaO本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种十四肽生长抑素的制备方法，其特征在于，采用以下步骤：　Ａ．分别制备中间体ａ、中间体ｂ和中间体ｃ；　＊＊＊　中间体ａ　Ｚ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｔｒｐ－ＯＨ　中间体ｂ　＊＊＊　中间体ｃ　在中间体ａ的制备中，采 用ＤＣＣ及３－（二乙氧基磷酰基）－１，２，３，－苯并三嗪－４－酮作为缩合剂，　在中间体ｂ的制备中，采用ＤＣＣ作为缩合剂；　在中间体ｃ的制备中，采用叠氮基磷酸二苯脂作为缩合剂；　Ｂ．中间体ｂ，中间体ｃ以叠氮基磷酸二苯脂作为缩 合剂进行缩合，得到下述的中间体ｄ：　＊＊＊　中间体ｄ　Ｃ．中间体ａ和中间体ｄ以３－（二乙氧基磷酰基）－１，２，３，－苯并三嗪－４－酮作为缩合剂进行缩合得到十四肽生长抑素。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴永平，刘留，王思回，刘纯，
申请(专利权)人：吴永平，
类型：发明
国别省市：32