一种重组人促卵泡生成素CTP-Fc融合蛋白及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种重组人促卵泡生成素CTP

【技术实现步骤摘要】
一种重组人促卵泡生成素CTP
‑
Fc融合蛋白及制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种重组人促卵泡生成素CTP
‑
Fc融合蛋白及制备方法。

技术介绍

[0002]促卵泡生成素(FSH)是垂体前叶嗜碱性细胞分泌的一种促性腺激素，成分为糖蛋白。FSH的主要功能为通过促进颗粒细胞增生、内膜细胞分化、卵泡液形成、卵泡腔扩大，进而促进卵泡生长和发育，提高成熟卵泡的有效率，进而提高排卵率与妊娠率。随着二胎政策甚至三胎政策的放开，难受孕人数增加，刺激了对辅助生殖的需求，开发此类产品具有重要的社会价值。
[0003]伴随制备来源及制备技术的变化，FSH的发展先后经历了三个阶段：脑垂体提取，尿液提取和基因工程技术生产。其中，基因工程技术生产重组FSH制品纯度高，安全性高、质量可控、与提取产品相比活性相当，备受市场认可。临床应用中，FSH需连续1至2周每天皮下注射给药刺激女性卵泡发育，给患者带来诸多不便和痛苦。因此，开发缓释或长效重组FSH类产品是市场的一种需求。

技术实现思路

[0004]本专利技术一个目的是提供SP1信号肽或与其相关的生物材料的用途。
[0005]本专利技术提供了SP1信号肽或与其相关的生物材料在如下A1)
‑
A3)中任一种中的应用：
[0006]A1)制备FSH蛋白或其融合蛋白；
[0007]A2)提高FSH蛋白或其融合蛋白的表达量或产量；
[0008]A3)促进FSH蛋白或其融合蛋白分泌到宿主细胞外；
[0009]所述SP1信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示。
[0010]上述FSH蛋白由FSH的的链和FSH的β链非共价结合而成；
[0011]上述应用中，所述FSH融合蛋白，其A链为FSH的α链，其B链为连接CTP
‑
Fc标签的FSH的β链；
[0012]所述CTP
‑
Fc标签为由CTP标签和Fc标签组成。
[0013]上述连接标签的FSH的β链为在FSH的β链的C端连接标签。
[0014]上述CTP
‑
Fc标签的氨基酸序列如SEQ ID No.8第131
‑
384位所示；
[0015]上述应用中，所述与SP1信号肽相关的生物材料为所述SP1信号肽的编码基因或含有所述编码基因的表达盒、重组载体、重组菌或重组细胞系。
[0016]上述应用中，所述FSH融合蛋白中的A链的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
[0017]所述FSH融合蛋白中的B链的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
[0018]本专利技术另一个目的是提供FSH融合蛋白。
[0019]本专利技术提供的FSH融合蛋白，为如下B1)或B2):
[0020]B1)所述FSH融合蛋白，其A链为FSH的α链，B链为连接CTP
‑
Fc标签的FSH的β链；
[0021]B2)所述FSH融合蛋白，其A链为连接SP1信号肽的FSH的α链，B链为连接SP1信号肽和CTP
‑
Fc标签的FSH的β链；
[0022]优选地，B1)所示的FSH融合蛋白为FSH
‑
CTP
‑
Fc融合蛋白，FSH为人FSH，具体的讲，将CTP
‑
Fc标签融合于人FSH分子的β链的碳末端，形成FSH
‑
CTP
‑
Fc的B链，B链通过CTP
‑
Fc结构的二硫键形成同二聚体；FSH分子的α链(即FSH
‑
CTP
‑
Fc的A链)通过非共价键与B链结合，形成二价FSH分子。
[0023]优选地，B2)所示的FSH融合蛋白为SP1
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FSH
‑
CTP
‑
Fc融合蛋白，FSH为人FSH，具体的讲，将CTP
‑
Fc标签融合于人FSH分子的β链的碳末端，且将SP1信号肽连接在人FSH分子的β链的氮末端，形成SP1
‑
FSH
‑
CTP
‑
Fc的B链，B链通过CTP
‑
Fc结构的二硫键形成同二聚体；将SP1信号肽连接在人FSH分子的α链的氮末端，形成SP1
‑
FSH
‑
CTP
‑
Fc的A链，SP1
‑
FSH
‑
CTP
‑
Fc的A链通过非共价键与B链结合，形成二价FSH分子。
[0024]进一步优选地，上述的FSH
‑
CTP
‑
Fc融合蛋白，上述CTP来自于HCG的β链的CTP；上述Fc来自于IgG1
‑
Fc，上述FSH为人FSH。其中CTP为HCG的β链CTP的第138
‑
165位，Fc为IgG1
‑
Fc，具体的讲，采用人IgG1
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Fc的CH2和CH3区；且去除碳末端的Lys(K)氨基酸，减少分子的电荷异质性。
[0025]所述CTP
‑
Fc标签为由CTP和Fc组成；
[0026]所述SP1信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示。
[0027]上述FSH融合蛋白由FSH的α链和连接CTP
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Fc标签的FSH的β链非共价结合而成；
[0028]上述FSH融合蛋白由连接SP1信号肽的FSH的α链和连接SP1信号肽和CTP
‑
Fc标签的FSH的β链非共价结合而成。
[0029]所述CTP
‑
Fc标签在FSH的α链的C端；
[0030]所述SP1信号肽连接在FSH的α链或β链的N端。
[0031]上述FSH融合蛋白中，B1)中，所述FSH融合蛋白的A链的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述FSH融合蛋白的B链的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；
[0032]或，B2)中，所述FSH融合蛋白的A链的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示；所述FSH融合蛋白的B链的氨基酸序列如SEQ ID No.8所示。
[0033]与上述融合蛋白相关的生物材料也是本专利技术保护的范围。
[0034]上述生物材料为上述融合蛋白的编码基因或含有所述编码基因的表达盒、重组载体、重组菌或重组细胞系。
[0035]上述融合蛋白的编码基因为如下C1
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C4中任一种：
[0036]C1：B1)中，所述FSH融合蛋白的A链的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述FSH融合蛋白的的B链的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；
[0037]C2：B2)中，所述FSH融合蛋白的A链编码基因的核苷酸序列如S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.SP1信号肽或与其相关的生物材料在如下A1)
‑
A3)中任一种中的应用：A1)制备FSH蛋白或其融合蛋白；A2)提高FSH蛋白或其融合蛋白的表达量或产量；A3)促进FSH蛋白或其融合蛋白分泌到宿主细胞外；所述SP1信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述FSH融合蛋白，其A链为FSH的α链，其B链为连接CTP
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Fc标签的FSH的β链。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述与SP1信号肽相关的生物材料为所述SP1信号肽的编码基因或含有所述编码基因的表达盒、重组载体、重组菌或重组细胞系。4.FSH融合蛋白，为如下B1)或B2):B1)所述FSH融合蛋白，其A链为FSH的α链，B链为连接CTP
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Fc标签的FSH的β链；B2)所述FSH融合蛋白，其A链为连接SP1信号肽的FSH的α链，B链为连接SP1信号肽和CTP
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Fc标签的FSH的β链；所述SP1信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示。5.根据权利要求4所述的FSH融合蛋白，其特征在于：B1)中，所述FSH融合蛋白的A链的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述FSH融合蛋白的B链的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；或，B2)中，所述FSH融合蛋白的A链的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示；所述FSH融合蛋白的B链的氨基酸序列如SEQ ID No.8所示。6.与权利要求4或5所述融合蛋白相关...

【专利技术属性】
技术研发人员：张静静，安文琪，邢体坤，宋路萍，王斌，
申请(专利权)人：华兰基因工程有限公司，
类型：发明
国别省市：