本发明专利技术公开了穿心莲总内酯与新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯的生产工艺，该工艺为先制备穿心莲茎叶提取物，经石油醚脱除叶绿素等脂溶性杂质，将其热溶于低级醇或含水低级醇，以活性炭回流脱色，析除大部分穿心莲内酯结晶后，经过氧化铝柱或碱洗脱去黄酮类，得到穿心莲总内酯，将其以三氯甲烷或二氯甲烷冷溶２－４次，过滤，得滤液与不溶物两部分，滤液浓缩，经溶剂结晶与重结晶，或柱层析分离分别得到脱水穿心莲内酯与去氧穿心莲内酯纯品。不溶物经溶剂结晶与重结晶或柱层析分离分别得到新穿心莲内酯及穿心莲内酯纯品。本发明专利技术生产设备简单，工艺路线简化易操作，可实现大批量工业化生产，所得穿心莲总内酯中新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯所占比例高，杂质含量少。所得新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯单体纯度均达９８％以上，可作为中药化学对照品使用，或作为医药及化工原料应用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中草药提取与分离，更确切地说涉及新穿心莲内酯、脱水穿 心莲内酯及去氧穿心莲内酯的生产工艺。
技术介绍
穿心莲又名一见喜，为爵床科植物穿心莲Andrographis Paniculata (Burm. f.) Nees的干燥地上部分。原产印度，我国华东、中南等地区均有 栽培。性苦，寒，归心、肺、大肠、膀胱经。具有清热解毒、凉血、消肿止 痛等功效。临床主要用于感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泄泻 痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，毒蛇咬伤等证。穿心莲的主要成分含有二萜内酯与黄酮类化合物。二萜内酯类主要为穿 心莲内酯、去氧穿心莲内酯、新穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯，其中以穿心 莲内酯含量最髙，占1.5%以上。穿心莲内酯因在药材中含量髙而易提取， 故对穿心莲内酯的研究较深入。现代药理研究表明，穿心莲内酯及其衍生物具有抗炎抗菌、抗病毒、抗 肿瘤、免疫调节、治疗心脑血管疾病、保肝利胆等作用。新穿心莲内酯、脱 水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯因在药材中含量较低，常规提取方法不易大 量提取，故对其研究相对较少，但因其与穿心莲内酯结构相近，故药理活性 相近。如均具有一定的抗炎抗菌、抗病毒活性；中国专利申请CN1511522的 专利"穿心莲二萜内酯在抑制血管生成中的应用"公开了包括穿心莲内酯、 脱水穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯和新穿心莲内酯在内的穿心莲二萜内酯化 合物具有抑制血管生成的作用，可以作为制备抑制血管生成的治疗和预防药 物应用。又因结构上的差异，有的方面表现出更强的活性或不同于穿心莲内 酯的新的药理作用。如穿心莲内酯与新穿心莲内酯对卡介苗(BCG)诱导的小鼠腹膜巨噬细 胞经脂多糖(LPS)刺激产生NO的抑制作用试验显示口服新穿心莲内酯(5、 25mg/kg)对NO产生的抑制率分别为35y。、 40%,而口服相同剂量的穿心 莲内酯不抑制NO产生，该结果提示新穿心莲内酯在穿心莲抗炎作用中起关 键作用(Biol Pharm Bull， 2002, 25(9)， 1169 1774}。另外有研究发现新穿心莲内酯具有治疗中暑的作用(中国工业医学杂 志，2O07, 20(1)， 36 37}。然而目前穿心莲总内酯与新穿心莲内酯、脱水 穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯的生产工艺却存在很多缺陷。如目前临床主要应用穿心莲粗提取物，主要通过水或醇类简单提取，含 杂质很多，服用剂量大，且粗提取物有效成分含量以穿心莲内酯为主，其它 内酯的含量很低，从而影响临床的疗效。现有穿心莲二萜单体成分分离比较 常用的方法为将穿心莲内酯以乙醇提取，回收乙醇，经石油醚洗除叶绿素等 脂溶性杂质，水液用氯仿振摇，放置过夜，水和氯仿层之间析出物分离新穿 心莲内酯与穿心莲内酯，氯仿层用于分离脱水穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯(杨云等主编，天然药物化学成分提取与分离手册(修订版)，中国中医药 出版社，582 583)。首先该方法大量使用有毒试剂氯仿萃取，不利于操作 人员的劳动保护，环境污染严重，其次，用氯仿萃取时乳化严重，需长时间 静置，生产效率低下，另外二萜内酯与黄酮等成分并存，相互助溶，该方法 提取很不完全，收得率很低。中国专利申请CN1962650的专利" 一种髙纯度脱水穿心莲内酯的制备 方法"公开了髙纯度脱水穿心莲内酯的制备方法，将穿心莲用乙醇热浸提取， 过滤，过大孔吸附树脂柱，收集有效洗脱液，洗脱液浓缩后真空干燥，得干 粉，用甲醇溶解，装入硅胶柱，用氯仿和甲醇混合溶剂洗脱，收集有效成份 的洗脱液后浓縮，用乙醇结晶，重结晶，得髙纯度的脱水穿心莲内酯。该方 法经大孔吸附树脂除杂后仍混有不少杂质，直接上硅胶柱层析，使用溶剂量 大，分离工艺复杂，且采用有毒试剂氯仿和甲醇作为洗脱剂，同样不利于操 作人员的劳动保护及环境保护。现有的生产工艺缺点使得目前市场上高纯度 的新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯难以买到，无法满足药 理活性的筛选和临床应用的需求。
技术实现思路
本专利技术目的是由于穿心莲提取物及新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及 去氧穿心莲内酯存在很强的药理活性，临床应用与实验研究均需要大量的髙 品质穿心莲总内酯及各单体纯品，然而目前的生产工艺存在不少缺点，不能 满足需求，故寻找一种工艺简便，适合工业化批量生产的生产工艺极为重要。本专利技术的技术方案是通过以下步骤实现1、 通过常规提取方法，包括采用乙醇等溶剂冷浸、热浸或渗漉等方法 对穿心莲茎叶进行提取，回收乙醇制备含穿心莲内酯、新穿心莲内酯、脱水 穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯的提取物，并用石油醚脱除叶绿素等脂溶性杂 质。2、 上述所得脱叶绿素提取物热溶于含C^Cs的低级醇或含水低级醇， 以活性炭回流脱色，趁热过滤，回收溶剂至适量，缓慢加水适量，放置，析 出大部分穿心莲内酯结晶，过滤，母液浓缩，放置，再析出小部分穿心莲内 酯结晶，过滤，滤液回收溶剂至干，得浸膏。3、 上述所得浸膏溶于有机溶剂，包括低级醇或含水低级醇，乙酸乙酯、 乙酸丁酸，乙酸甲酯、丙酮、含水丙酮、乙酸乙酯-石油醚混合液、乙酸丁 酯-石油醚混合液。过氧化铝柱，有机溶剂洗脱，洗脱液浓缩，得脱黄酮杂 质浓縮物。或溶于脂溶性溶剂，如乙酸乙酯，乙酸丁酸，正丁醇、乙酸乙酯 -石油醚混合液、乙酸丁酯-石油醚混合液等，弱碱洗去黄酮杂质，Nacl溶液 或水洗涤，溶剂浓縮，得脱黄酮杂质浓缩物。或溶于脂溶性溶剂，弱碱洗去 黄酮杂质，Nacl溶液或水洗涤，溶剂浓缩，溶于有机溶剂，再过氧化铝柱， 有机溶剂洗脱，洗脱液浓縮，得脱黄酮杂质浓縮物。4、 上述所得脱黄酮杂质浓縮物热溶于有机溶剂中，包括低级醇或含水 低级醇，乙酸乙酯、乙酸丁酸，乙酸甲酯、丙酮、含水丙酮、乙酸乙酯-石 油醚混合液、乙酸丁酯-石油醚混合液，放冷析晶，过滤，得穿心莲总内酯。5、上述所得的穿心莲总内酯以三氯甲垸或二氯甲烷冷溶2-4次，过滤， 得滤液与不溶物两部分。滤液浓縮，浓缩物主要为脱水穿心莲内酯与去氧穿 心莲内酯，仅含微量穿心莲内酯与新穿心莲内酯，再经溶剂结晶与重结晶， 或柱层析分离分别得到脱水穿心莲内酯与去氧穿心莲内酯纯品。不溶物主要 为穿心莲内酯与新穿心莲内酯混合物，仅含微量脱水穿心莲内酯与去氧穿心 莲内酯，再经溶剂结晶与重结晶或柱层析分离分别得到新穿心莲内酯及穿心 莲内酯纯品。产品检测使用髙效液相色谱仪，紫外检测器。ds-ODS柱；流动相乙 腈水(35: 65);脱水穿心莲内酯检测波长254nm;新穿心莲内酯与穿 心莲内酯检测波长225nm;去氧穿心莲内酯检测波长205nm;流速 1.0ml/min。样品进样浓度约0.1mg/ml，进样量为10lM,穿心莲总内酯采用6外标法进行定量分析。新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯的 纯度分析采用峰面积归一化法检测。 本专利技术的优点是1、 本专利技术所得的穿心莲总内酯中新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去 氧穿心莲内酯所占比例髙，三者总含量大于50%。总内酯中新穿心莲内酯、 穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯的总量大于80%。2、 由于穿心莲茎叶提取物中穿心莲内酯占总内酯的主要成分，含量远 高于其它内酯，故先分出提取物中的大部穿心莲内酯，有利于各单体分离的 后续处理，可大大减少后续处理过程中的溶剂使用量，从而节约时间和成本。3、 穿心莲茎叶本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种穿心莲总内酯与新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯的生产工艺，包括： （１）制备含穿心莲内酯、新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯的穿心莲茎叶提取物，并用石油醚脱除叶绿素等脂溶性杂质； （２）上述所得脱叶绿素 提取物热溶于低级醇或含水低级醇，以活性炭回流脱色，趁热过滤，回收溶剂至适量，缓慢加水适量，放置，析出大部分穿心莲内酯结晶，过滤，母液浓缩，放置，再析出小部分穿心莲内酯结晶，过滤，滤液回收溶剂至干，得浸膏； （３）上述所得浸膏溶于有机溶 剂，过氧化铝柱，有机溶剂洗脱，洗脱液浓缩，得脱黄酮杂质浓缩物； 或溶于脂溶性溶剂，弱碱洗，Ｎａｃｌ溶液或水洗，溶剂浓缩，得脱黄酮杂质浓缩物； 或溶于脂溶性溶剂，弱碱洗，Ｎａｃｌ溶液或水洗，溶剂浓缩，溶于有机溶剂，过氧化铝柱，有机 溶剂洗脱，洗脱液浓缩，得脱黄酮杂质浓缩物； （４）上述所得脱黄酮杂质浓缩物热溶于有机溶剂中，放冷析晶，过滤，得穿心莲总内酯； （５）上述所得的穿心莲总内酯以三氯甲烷或二氯甲烷冷溶２－４次，过滤，得滤液与不溶物两部分。滤液浓缩，浓 缩物经溶剂结晶与重结晶，或柱层析分离分别得到脱水穿心莲内酯与去氧穿心莲内酯纯品；不溶物经溶剂结晶与重结晶或柱层析分离分别得到新穿心莲内酯及穿心莲内酯纯品。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周一君，杨增，石荣火，卢扬，陆荣，
申请(专利权)人：雷允上药业有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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