本发明专利技术提供了LncRNAADAMSTL1在制备诊断或治疗膝骨关节炎的产品中的应用，所述产品通过检测LncRNAADAMSTL1的表达水平诊断膝骨关节炎，LncRNAADAMSTL1在膝骨关节炎的生物学样品中的表达水平下降；所述产品通过提高LncRNAADAMSTL1的表达水平治疗膝骨关节炎。本发明专利技术通过构建大鼠膝骨关节炎模型，在膝骨关节炎模型三组共表达的24134个LncRNA中筛选发现了LncRNAADAMSTL1的新用途，并进一步研究了LncRNAADAMSTL1表达对膝骨关节炎的影响，为膝骨关节炎的诊断和治疗提供了新的可行性方案。骨关节炎的诊断和治疗提供了新的可行性方案。骨关节炎的诊断和治疗提供了新的可行性方案。
【技术实现步骤摘要】
LncRNA ADAMSTL1在制备诊断或治疗膝骨关节炎的产品中的应用
[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及LncRNAADAMSTL1在制备诊断或治疗膝骨关节炎的产品中的应用。
技术介绍
[0002]膝骨关节炎(knee osteoarthritis，KOA)是一种以退行性病理改变为基础的疾患，多见于中老年人群，其症状多表现为膝盖部位红肿痛、上下楼梯痛、坐起立行时膝部酸痛不适等。膝骨关节炎起病于关节软骨，逐步侵蚀至软骨下骨及周围组织，导致局灶性、侵蚀性的关节病变，从而引发膝关节疼痛、活动障碍及畸形，患病率随年龄增长而升高。KOA可分为原发性与继发性，原发性KOA指关节软骨和骨发生退行性改变，目前其发病机制尚未明确；继发性KOA指已知有骨关节疾病，由于原有疾病未能控制或未发现而导致的骨关节炎，常见原因有先天性关节畸形、儿童期发生的骨关节病、骨骺滑脱、外伤或机械刺激等。
[0003]膝骨关节炎的治疗有多种，根据不同的病因来采取不同的治疗方式进行治疗膝骨关节炎。目前临床多以药物和物理疗法治疗，且效果多不确切。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于提供LncRNAADAMSTL1在制备诊断或治疗膝骨关节炎的产品中的应用，为临床膝骨关节炎的诊断和治疗提供新的可行性方案。
[0005]本专利技术为实现上述目的采用的技术方案为：
[0006]LncRNAADAMSTL1在制备诊断或治疗膝骨关节炎的产品中的应用，所述LncRNA ADAMSTL1的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
[0007]优选地，所述产品通过检测LncRNAADAMSTL1的表达水平诊断膝骨关节炎。
[0008]更优选地，诊断膝骨关节炎的产品包括试剂或试剂盒。
[0009]更优选地，LncRNAADAMSTL1在膝骨关节炎的生物学样品中的表达水平下降。
[0010]优选地，所述产品通过提高LncRNAADAMSTL1的表达水平治疗膝骨关节炎。
[0011]更优选地，治疗膝骨关节炎的产品包括表达LncRNAADAMSTL1的腺病毒载体。
[0012]本专利技术的有益效果在于：
[0013]本专利技术通过构建大鼠膝骨关节炎模型，在膝骨关节炎模型三组共表达的24134个LncRNA中筛选发现了LncRNAADAMSTL1的新用途，并进一步研究了LncRNA ADAMSTL1表达对膝骨关节炎的影响，为膝骨关节炎的诊断和治疗提供了新的可行性方案。
附图说明
[0014]图1：LNC
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RNA高通量测序筛选结果，(A)差异基因Venn图；(B)差异LncRNA数目柱状图；(C)各样本基因表达差异热图。
[0015]图2：q
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PCR验证四个LncRNA的表达，(A)ENSRNOT00000086980；(B)
[0016]ENSRNOT00000088392；(C)ENSRNOT00000078243；(D)ENSRNOT00000081676；与对照组相比，*P<0.05；#与模型组相比，#P<0.05。
[0017]图3：大鼠膝骨关节炎模型构建过程示意图。
[0018]图4：qPCR检测对照组和模型组大鼠关节软骨组织中LncRNAADAMSTL1表达情况(*P＜0.05VSControl)。
[0019]图5：载体pAdEasy
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U6
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CMV
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EGFP的图谱。
[0020]图6：FISH实验检测LncRNAADAMSTL1在细胞中的定位。
[0021]图7：LncRNAADAMSTL1测序结果比对。
[0022]图8：PCR检测各组中LncRNAADAMSTL1的表达水平。*p<0.05，与对照组相比。
[0023]图9：TUNEL检测各组动物关节软骨组织细胞凋亡的结果。
具体实施方式
[0024]为了更清楚地说明本专利技术，下面结合实施例并对照附图对本专利技术作进一步详细说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本专利技术的保护范围。
[0025]实施例
[0026]本专利技术的整个实验流程主要包括以下几个方面：
[0027]一、LncRNAADAMSTL1的筛选
[0028]在经过1周的适应性饲养后，对大鼠左后肢构建骨关节炎模型。动物经2％戊巴比妥钠麻醉，消毒左后肢，暴露膝关节腔，切断内侧副韧带和前交叉韧带进行动物模型构建。在造模4周后，采用电针进行治疗，电针电极分别插入内膝眼和外膝眼，给予8Hz，10V疏密波脉冲电刺激30min，每周连续治疗5天后休息2天，持续4周。
[0029]采用Illumina测序平台对对照大鼠、骨关节炎大鼠和电针治疗的骨关节炎大鼠膝关节软骨组织进行高通量测序，测序结果表明，三组共表达的LncRNA数为24134个(图1A)，电针治疗组相较于骨关节炎模型组具有更多的差异表达的LncRNA(图1B)，图1C为高通量测序的热图。
[0030]根据A组
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对照组(Control)、B组
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骨关节炎模型组(OA)和C组
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电针治疗组(ele
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acu+OA)的差异表达LncRNA，结合Starbase、miRBase等预测网站以及文献报道，从差异基因中选择ENSRNOT00000078243(SEQ ID NO:1)、ENSRNOT00000081676(SEQ ID NO:2)、ENSRNOT00000086980(SEQ ID NO:3)、ENSRNOT00000088392(SEQ ID NO:4)四个LncRNA进行q
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PCR验证，从验证结果中选择在模型组中低表达、电针治疗后表达升高，或模型组高表达、而电针治疗后表达降低的基因作为目的基因。结果如图2A
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2D所示。从验证结果中，我们选择ENSRNOT00000086980(又名LncRNAADAMSTL1)作为目的基因。二、LncRNAADAMSTL1在膝骨关节炎的表达情况
[0031](一)实验材料
[0032]1、材料(货号，厂家)：27只(多余动物为实验候补动物)SD大鼠，3周，雄性，厂家：北京华阜康生物科技股份有限公司，许可证号：SCXK(京)2019
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0008)，饲养条件(普通饲料饲养，温度20～26℃，湿度40％～70％)。
[0033]2、实验试剂(厂家，货号)：
[0034]3‑
MA
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Cat.#：HY
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19312，MCE
[0035]雷帕霉素
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
Lot#：C13152877，麦克林
[0036]本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.LncRNAADAMSTL1在制备诊断或治疗膝骨关节炎的产品中的应用，所述LncRNAADAMSTL1的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。2.根据权利要求1所述的LncRNAADAMSTL1在制备诊断或治疗膝骨关节炎的产品中的应用，其特征在于，所述产品通过检测LncRNAADAMSTL1的表达水平诊断膝骨关节炎。3.根据权利要求2所述的LncRNAADAMSTL1在制备诊断或治疗膝骨关节炎的产品中的应用，其特征在于，诊断膝骨关节炎的产品包括试剂或试剂盒。4.根据权利要求2或3所述的LncRN...
【专利技术属性】
技术研发人员：江斌，熊忠贤，
申请(专利权)人：江西中洪博元生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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