应用于罗库溴铵肌松残留阻滞作用预警的基因多态性引物组合物、检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术属于个体化用药基因检测技术领域，尤其为一种应用于罗库溴铵肌松残留阻滞作用预警的基因多态性引物组合物、检测试剂盒及检测方法，该引物组合物包括SLCO1A2 rs7967354位点扩增引物、SLCO1A2 rs11045995位点扩增引物和测序引物，该引物组合物为本发明专利技术检测试剂盒的关键组份，能够保证多重PCR反应时无交叉干扰，同时生成两种扩增产物，分别为SLCO1A2 rs7967354多态性位点扩增产物83 bp以及SLCO1A2 rs11045995多态性位点扩增引物149 bp；该检测方法所涉及的焦磷酸测序技术是基于实时反应、边合成边测序的新型核酸序列分析技术，该技术具有操作简便、检测成本较低、快捷、准确、可高通量检测，同时也无需荧光标记和电泳分析等操作，在罗库溴铵不良反应预警方面有着良好的应用价值。着良好的应用价值。着良好的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
应用于罗库溴铵肌松残留阻滞作用预警的基因多态性引物组合物、检测试剂盒及检测方法


[0001]本专利技术属个体化用药基因检测
，具体涉及一种应用于罗库溴铵肌松残留阻滞作用预警的基因多态性引物组合物、检测试剂盒及检测方法。

技术介绍

[0002]罗库溴铵(Rocuronium Bromide)是临床上围手术期麻醉诱导应用最广泛的非去极化肌松药，它通过作用于骨骼肌神经肌肉接头的乙酰胆碱受体，阻断神经肌肉兴奋信息的正常传递从而产生骨骼肌松弛作用，具有起效快、肌松持续时间短、恢复迅速、较好的心血管系统稳定性等优点
[1]。
[0003]然而，罗库溴铵在满足气管插管和手术需要的同时也带来了肌松残留阻滞作用的隐患，肌松残留阻滞作用是罗库溴铵在使用过程中所产生的常见不良事件，使患者在术毕拔除气管导管后出现残余神经肌肉阻滞作用，导致患者主观上不适感受，如：乏力、复视等不适症状，以及呼吸肌乏力、低氧血症、反流误吸等一系列肺部并发症。
[0004]另外，研究表明，肌松残留阻滞作用是不同类型外科手术死亡的主要原因，同时会导致ICU停留时间本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种应用于罗库溴铵肌松残留阻滞作用预警的基因多态性引物组合物，其特征在于，所述引物组合物能够在同一PCR体系中扩增SLCO1A2基因的两个单核苷酸突变位点，所述引物组合物包括：(1)SLCO1A2基因rs7967354位点正向扩增引物(SEQ ID NO.l)：5
’‑
CAGTGATTGGATTTAAGCCTATG
‑3’
；(2)SLCO1A2基因rs7967354位点反向扩增引物(SEQ ID NO.2)：5
’‑
TTTGCAAATAGAGCATTTACAAG
‑3’
；(3)SLCO1A2基因rs11045995位点正向扩增引物(SEQ ID NO.4)：5
’‑
AGACCAGAGCCACTAAATCATTTC
‑3’
；(4)SLCO1A2基因rs11045995位点反向扩增引物(SEQ ID NO.5)：5
’‑
TGGGAGGACTCTTCAGGATAAA
‑3’
。2.根据权利要求1所述的应用于罗库溴铵肌松残留阻滞作用预警的基因多态性引物组合物，其特征在于，所述引物组合物还包括下面的测序引物：(1)SLCO1A2基因rs7967354位点测序引物(SEQ ID NO.3)：5
’‑
GATTGGATTTAAGCCTATG
‑3’
；(2)SLCO1A2基因rs11045995位点测序引物(SEQ ID NO.6)：5
’‑
CATTTTAAAGACTTCTGAGC
‑3’
。3.根据权利要求1所述的应用于罗库溴铵肌松残留阻滞作用预警的基因多态性引物组合物，其特征在于，所述SLCO1A2基因rs7967354位点正向扩增引物和SLCO1A2基因rs11045995位点正向扩增引物的5
’
端均进行生物素标记。4.一种应用于罗库溴铵肌松残留阻滞作用预警的基因多态性检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求3所述的应用于罗库溴铵残留阻滞作用预警相关基因多态性引物组合物，还包括多重PCR扩增反应试剂、焦磷酸测序试剂及试剂盒盒体，权利要求3所述的应用于罗库溴铵残留阻滞作用预警相关基因多态性的引物组合物、所述多重PCR扩增反应试剂、焦磷酸测序试剂设在所述试剂盒盒体中。5.根据权利要求4所述的应用于罗库溴铵残留阻滞作用预警相关基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述多重PCR扩增反应试剂采用焦磷酸测序PCR试剂盒PCR Kit，主要组分为PyroMark PCR Master Mix(2
×
)，包括：热启动TaqDNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸dNTPs、MgCl2(3mM)；其他组分包括：扩增反应特异性增强剂Q
‑
Solution(5
×
)、CoralLoad Concentrate(10
×
)。6.根据权利要求5所述的应用于罗库溴铵残留阻滞作用预警相关基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述焦磷酸测序试剂包括：PyroMark退火缓冲液；DNA聚合酶，该DNA聚合酶包括焦磷酸测序所需的ATP硫酸化酶、荧光素酶、腺苷三磷酸双磷酸酶；底物复合物，该底物复合物为腺苷
‑
5'
‑
磷酸硫酸酐；脱氧核苷酸三磷酸复合物dNTP，该dNTP为人工修饰的α
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明周，
申请(专利权)人：河南省人民医院，
类型：发明
国别省市：