用于诊断神经病理性疼痛的标记物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于诊断神经病理性疼痛的标记物及其应用，所述标志物包括XLOC_035479、miR

【技术实现步骤摘要】
用于诊断神经病理性疼痛的标记物及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种用于诊断神经病理性疼痛的标记物及其应用。

技术介绍

[0002]神经病理性疼痛(Neuropathic pain，NP)是躯体感觉系统的损伤或疾病而直接造成的疼痛，如糖尿病性周围神经病变、三叉神经痛、创伤或放化疗后神经病变、幻肢痛、癌痛等引起的疼痛。随着全球人口老龄化、糖尿病和化疗后癌痛发生率的增加，NP的发病率逐年上升。国际疼痛学会认为NP发病率约为3.3％
‑
8.2％，一般人群的NP患病率高达8.0％，糖尿病患者中NP的发病率更高达22％，而其中中国约有9000万NP患者。NP病程长，迁延不愈，严重影响了患者的生命质量，给患者及其家庭和社会带来沉重的经济负担，NP已成为一个主要的公共卫生问题。然而，由于NP的发病机制尚不完全清楚，NP的诊断和治疗仍然面临着巨大的挑战，发现新的干预NP的靶点具有极其重要的社会和临床价值。
[0003]长链非编码RNA(Long non
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coding RNA,LncRNA)是一类长度大于200nt且自身不具备或编码少量蛋白能力的RNA，最初被认为不具有生物学功能。随着高通量测序技术的广泛应用，LncRNA丰富的生物学功能在各类生物体中不断被发现，可在多层面、多水平调控基因的表达，包括影响蛋白泛素化降解、结合起始因子调控基因翻译、形成互补双链干扰mRNA剪切、结合mRNA后提高稳定性上调基因表达、与microRNA(miRNA)结合成竞争性内源RNA(competingendogenous RNA,ceRNA)等机制，从而影响疾病的发生和发展。迄今为止，已有报道表明LncRNA在人类各种疾病的病因中发挥功能性作用。越来越多研究者也证实LncRNA参与NP的发病机制，LncRNA可能作为预测、预后、诊断和治疗的生物标志物出现，但LncRNA调控NP的生物学功能和机制仍不明确。
[0004]miRNAs是一种长度为21
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25个核苷酸的内源性非编码小分子单链RNA，在进化过程中高度保守，成为基因表达的“微观管理者”，广泛地调控复杂的细胞生命活动。miRNAs主要通过结合3
’
非翻译区(3
’‑
untranslated region，3
’‑
UTR)引起靶基因mRNA的降解或抑制其翻译。目前研究证实外周神经损伤后miRNA调控细胞自噬起着重要的作用。Shi等人发现外周神经损伤后miR
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195上调，抑制miR
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195的表达能激活自噬，抑制神经炎症，降低NP。Xie等人在CCI大鼠模型中发现miR
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183通过靶向调控mTOR/VEGF信号通路抑制NP。因此，如何从分子水平发掘用于神经病理性疼痛诊断的标志物具有重要的临床意义和实践价值。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于一种用于诊断神经病理性疼痛的标记物及其应用。为了实现本专利技术的目的，拟采用如下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种用于诊断神经病理性疼痛的标记物，所述标志物包括XLOC_035479、miR
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183和mTOR，其中XLOC_035479位于5号染色体的168847439
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168849101，全长1663bp。
[0007]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述XLOC_035479和mTOR的表达上调，所述miR
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183的表达下调。
[0008]本专利技术另一方面还涉及一种用于诊断神经病理性疼痛的试剂盒，所述试剂盒用于定量检测XLOC_035479、miR
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183和mTOR的表达。
[0009]本专利技术另一方面还涉及一种治疗神经病理性疼痛的药物，所述药物用于敲除、失活或下调XLOC_035479的表达。
[0010]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述药物还包括过表达miR
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183的试剂。
[0011]本专利技术另一方面还涉及上述标记物的应用，所述标记物用于制备诊断神经病理性疼痛试剂中的应用。
[0012]本专利技术另一方面还涉及上述药物的应用，所述药物用于制备治疗神经病理性疼痛的药物中的应用。
[0013]本专利技术的有益效果在于：本专利技术首次发现了探讨LncRNA(XLOC_035479)与miR
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183结合可以用于诊断神经病理性疼痛，进而调控mTOR介导脊髓神经元自噬在神经病理性疼痛中的作用研究，可以作为神经病理性疼痛提供潜在的治疗靶点。
附图说明
[0014]图1体外实验检测XLOC_035479、miR
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183和mTOR的表达；注：(A)qRT
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PCR显示谷氨酸刺激可以增强PC12细胞中XlOC_035479和mTOR的mRNA表达；而miR
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183的mRNA表达下调；(B
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C)Western blotting显示谷氨酸刺激可以增强PC12细胞中可以增强mTOR的蛋白表达。*P<0.05；**P<0.01。
[0015]图2不同时间点测量SNI大鼠机械痛；注：不同时间点测量SNI大鼠机械痛，*P<0.05。
[0016]图3体内实验检测XLOC_035479、miR
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183和mTOR的表达；注：(A)qRT
‑
PCR显示SNI后脊髓组织中XlOC_035479和mTOR的mRNA表达上调；miR
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183的mRNA表达下调；(B)Western blotting显示谷SNI后脊髓组织中mTOR的蛋白表达上调。*P<0.05；**P<0.01。
[0017]图4XLOC_035479
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/
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大鼠触觉痛减轻；注：两对照组(WT Sham组与KO sham组)无明显差异；与WT SNI组比，KO SNI组机械痛阈值上升，差异有统计学意义，*P<0.5。
[0018]图5筛选XLOC_035479siRNA；注：qRT
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PCR检测siRNA转染XLOC_035479的效率。
[0019]图6敲减XLOC_035479，抑制PC12细胞的自噬活动；注：(A)GFP
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LC3检测干扰谷氨酸诱导PC12细胞的XLOC_035479，降低PC12细胞的自噬活性；(B
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C)qRT PCR结果显示干扰谷氨酸诱导PC12细胞的XLOC_035479，下调LC3II/I的mRNA表达；上调P62的mRNA表达；(D
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F)Western Blotting结果显示干扰谷氨酸诱导PC12细胞的XLOC_035479，下调LC3II/I的蛋白表达本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于诊断神经病理性疼痛的标记物，所述标志物包括XLOC_035479、miR
‑
183和mTOR，其中XLOC_035479位于5号染色体的168847439
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168849101，全长1663bp。2.根据权利要求1所述的标记物，所述XLOC_035479和mTOR的表达上调，所述miR
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183的表达下调。3.一种用于诊断神经病理性疼痛的试剂盒，所述试剂盒用于定量检测XLOC_035479、miR
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183和mTOR的表达，其中XLOC_035479位于5号染色体的16...

【专利技术属性】
技术研发人员：周俊，唐思敏，程久荣，林子强，邓英东，张祥声，曹誉，
申请(专利权)人：南方医科大学第三附属医院广东省骨科研究院，
类型：发明
国别省市：