一种检测中成药中非法添加的对乙酰氨基酚的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测组合物中非法添加的对乙酰氨基酚的方法。该方法包括如下步骤：用高效液相色谱－质谱联用法通过监测以下离子来进行对乙酰氨基酚的结构确证：母离子１５２．１、子离子１１０．１和子离子９３．１，用高效液相色谱法进行对乙酰氨基酚的含量测定。本发明专利技术方法中高效液相色谱－质谱联用法通过３种离子的检测使检出的对乙酰氨基酚结构得到确证，检验结论准确无误；本发明专利技术方法对各种实验条件进行了摸索优化，方法专属性强，灵敏度、准确度高，稳定性好，实用性强。因此，本发明专利技术方法在中成药中非法添加对酰氨基酚检测中将有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物分析检测
，特别涉及检测组合物中对乙酰氨基酚的方法。
技术介绍
药品是人类用于预防、治疗、诊断疾病的特殊商品，关系到广大消费者的用药 安全、健康，因此需要对其实施有效监管。中成药应是以中草药为原料，经制剂 加工制成各种不同剂型的中药制品，包括丸、散、膏、丹各种剂型。但目前打着 纯中药、无毒副作用的旗号暗地里添加化学原料药或成品西药造假的行为层出不 穷，由于掺入的化学原料种类、数量、毒性不为人所知，服用人的安全无法保障， 对个人、对社会已经造成了严重的危害。在中成药中非法添加对乙酰氨基酚可能致患者发生粒细胞缺乏症、高铁血红蛋 白血症、过敏性皮炎(皮疹、皮肤瘙痒等)、肝炎、血小板减少等，因此，需要建 立高效的方法检测部分中成药中非法添加的对乙酰氨基酚，及时发现药品质量问 题，尽快消除药品安全隐患。文献报道的对乙酰氨基酚测定方法有容量分析法、紫 外分光光度法和高效液相色谱法。由于难以将对乙酰氨基酚从中成药中提取出来， 容量分析法及紫外分光光度法均不适用于中药复杂体系中对乙酰氨基酚的测定。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种检测组合物中非法添加的对乙酰氨基酚含量的方法。 本专利技术所提供的检测组合物中对乙酰氨基酚的方法，包括如下步骤用高效液 相色谱-质谱联用法通过监测以下离子来进行组合物中的对乙酰氨基酚的鉴别与结 构确证母离子152. 1、子离子110. 1和子离子93. 1，用高效液相色谱法进行对乙酰氨基酚的含量测定。所述高效液相色谱-质谱联用法中，采用的流动相的水相可为10-50mmol/L乙 酸铵水溶液，有机相具体可为甲醇；所述水相优选为10mmol/L乙酸铵水溶液。所述高效液相色谱-质谱联用法中最好用所述流动相进行梯度洗脱，所述流动 相的起始点为95%体积水相5%体积有机相，中间经过的点包括20%体积水相80% 体积有机相，终点为95%体积水相5%体积有机相。3所述高效液相色谱-质谱联用法中，离子源电喷雾源；扫描模式多级反应 监测；极性阳离子；以及碰撞能10 20V。所述高效液相色谱法中的流动相的水相可为0. 1 0.5% (质量百分含量)磷酸 水溶液，有机相为甲醇；所述水相优选为0. 1%磷酸水溶液。所述高效液相色谱法中用所述流动相进行梯度洗脱，所述流动相的起始点和终 点中水相与有机相的体积比为(89% 92%) : (11% 8%)。所述高效液相色谱法中包括如下步骤用50%-70% (体积百分含量)甲醇溶液 对所述组合物进行提取，得到提取液，将所述提取液进行所述高效液相色谱检测。所述组合物可为中成药组合物，具体可为治感冒类中成药组合物或抗风湿类中 成药组合物。本专利技术方法中高效液相色谱-质谱联用法通过3种离子峰的检测使对乙酰氨基 酚的结构得到确证，检验结论准确无误；本专利技术方法对各种实验条件迸行了摸索优 化，方法专属性强，灵敏度高、准确度高，稳定性好，实用性强。由于中药非法添 加化学药物的违法现象还将持续，而分析检测技术的发展总体上未能超越掺假制假的发展速度。对治感冒中成药中化学药物非法添加的研究工作，是针对目前药品安 全监管新情况新问题的检测方法的首创。因此，本专利技术方法在中成药等组合物的非 法添加对乙酰氨基酚检测中将有广阔的应用前景。 附图说明图1为对乙酰氨基酚的产物离子图。 图2为多级反应监测模式下总离子流图。 图3为多级反应监测模式下提取质谱图。 图4为对乙酰氨基酚裂解过程图。 图5为高效液相色谱图。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。 实施例1、实验方法的选择及效果检测 对照品(对乙酰氨基酚)购自中国药品生物制品检定所。 一、实验方法的选择 (一)对乙酰氨基酚高效液相色谱-质谱联用结构确证色谱条件用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以10-50mmol/L乙酸铵水溶液 为流动相A，以甲醇为流动相B，进行梯度洗脱。质谱条件三重四极杆型质谱仪；离子源电喷雾源；扫描模式多级反应监 测；极性阳离子；电子倍增器电压增益800 V;干燥气温度350°C;干燥气流 速9 1/min;雾化器压力40Psi;毛细管电压4000V;母离子152.1;子离子 110,1;子离子93.1;碰撞能10 20V;离子传输电压IOOV。对照品溶液的制备将对乙酰氨基酚对照品溶于甲醇，制成每lml含10Pg的溶 液；取上述溶液5ml，置100ml容量瓶中，加10 50mmol/L乙酸铵水溶液稀释至 100ml，得到对照品溶液。供试品溶液的配制取供试品粉末O. lg，加入甲醇25ml，超声15分钟，过滤， 取滤液5ml，置10ml容量瓶中，加10 50mmol/L乙酸铵水溶液，稀释至10ml。测定法分别精密吸取对照品溶液3W与供试品溶液5W，注入高效液相色谱-质谱联用仪。(二)高效液相色谱含量测定法实验条件的选择1、 检测波长的选择对乙酰氨基酚对照品(浓度约O. lrag/ml)，在190 370nm波长范围内进行扫 描，在243nm处有最大吸收，故确定检测波长为243nm。2、 流动相的选择用不同比例的流动相分离样品，当流动相的比例为磷酸水溶液(89 92%)-甲 醇(11 8%)的混合溶液时分离较好(即水相与有机相的体积比为(89 92%):(11 8%))，阴性对照样品在对乙酰氨基酚相应出峰时间处无干扰；但供试品中 成分复杂，待对乙酰氨基酚峰出完后再用梯度洗脱洗脱出其它组分。3、 提取溶剂的选择取同一批号的样品，加入不同浓度的乙醇、甲醇各25ml，超声处理15分钟， 测定，结果表明50% 70%甲醇水溶液提取效果好，50%甲醇水溶液最佳。4、 色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1 0.5%磷酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长243nm。二、实验效果的检测 (一)具体的实验方法 1.高效液相色谱-质谱联用法高效液相色谱条件Z0RBAX SB-C18 (2. 1 X50mm， 3. 5Wn)色谱柱，填充介质为 十八烷基硅烷键合硅胶；柱温30。C，以1O隱ol/L乙酸铵水溶液为流动相A，以甲 醇为流动相B，按下表进行梯度洗脱，流速0.3ml/min。表l、梯度洗脱步骤<table>table see original document page 6</column></row><table>质谱条件离子源电喷雾源；扫描模式多级反应监测；极性阳离子；电 子倍增器电压增益800V;干燥气温度350°C;干燥气流速91/min;雾化器压 力40Psi;毛细管电压4000V;母离子152.1;子离子110.1;子离子93.1;离子传输电压100V;碰撞能15V。停留时间150ms;扫描时间Omin-泵停止时间。对照品溶液的制备称取对乙酰氨基酚对照品，加甲醇制成每lml含lOPg的溶 液，量取上述溶液5ml，置100ml容量瓶中，加1Ommol/L乙酸铵水溶液稀释至100ml。供试品溶液的配制取供试品粉末O. lg，加入甲醇25ml，超声15分钟，过滤， 取滤液5ml，置10ml容量瓶中，力卩10mmol/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测组合物中对乙酰氨基酚的方法，包括如下步骤：用高效液相色谱－质谱联用法通过监测以下离子来进行组合物中的对乙酰氨基酚的鉴别与结构确证：母离子１５２．１、子离子１１０．１和子离子９３．１，用高效液相色谱法进行对乙酰氨基酚的含量测定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘成红，罗晓茹，魏立平，武向锋，王亚南，吴艳，徐闯，
申请(专利权)人：中国人民解放军总后勤部卫生部药品仪器检验所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]