一种达托霉素衍生物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种达托霉素衍生物及其制备方法，达托霉素衍生物的制备方法包括：提供一种玫瑰孢链霉菌突变菌株，所述的菌株中以下的基因被失活或敲除：瑰孢链霉菌基因组中色氨酸2，3

【技术实现步骤摘要】
一种达托霉素衍生物及其制备方法


[0001]本专利技术属于药物领域和生物技术工程领域，具体地，本专利技术涉及一类新型达托霉素类似物及其制备方法。

技术介绍

[0002]在过去的一个世纪里，抗生素被大规模生产和广泛使用，使得抗生素耐药性越发的严重和普遍，许多原来被认为是可控的感染再次成为潜在的生命威胁。随着多重耐药菌株的不断出现，使得新型抗生素的需求不断增加。除了利奈唑胺(恶唑烷酮)外，达托霉素是过去40年来唯一获得治疗批准的新型结构抗生素[Invest.Sturg,2013,26:167
‑
169]。
[0003]达托霉素的抗菌谱涵盖了大多数临床相关的革兰氏阳性病原体，包括MRSA和万古霉素耐药金黄色葡萄球菌(VRSA)、万古霉素耐药肠球菌(VRE)、耐糖肽金黄色葡萄球菌(GRSA)、凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)、耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)等[Curr.Opin.Chem.Biol.,2009,13(2):144
‑
151]。由于陆续已经有耐达托霉素的耐药菌出现，开发新型的达托霉素类似物显得尤为迫切和重要。
[0004]达托霉素是一种含有13个氨基酸残基的酸性环状脂多肽，最初是作为A21978C酸性脂肽的次要成分分离出来的，这些脂肽都是由13个氨基酸残基形成共同的母核，其母核的氨基酸序列是L
‑
Trp1‑
L
‑
Asn2‑
L
‑
Asp3‑
L
‑
Thr4‑
>Gly5‑
L
‑
Orn6‑
L
‑
Asp7‑
D
‑
Ala8‑
L
‑
Asp9‑
Gly
10
‑
D
‑
Ser
11
‑
L
‑
threo
‑
3mGlu
12
‑
L
‑
Kyn
13
，母核上连有不同长度的酯酰基侧链。其中L
‑
Kyn
13
的羧基和L
‑
Thr4的羟基之间通过酯键相连，形成一个含有10个氨基酸的环状结构。由于其结构复杂，达托霉素的全合成需要经过繁琐的保护基团和去保护过程，且最终收率较低[J.Am.Chem.Soc.,2004,126(51):17025
‑
17031]，使得通过化学全合成来获得达托霉素或其类似物是一项艰巨的挑战。
[0005]为了提高达托菌素的抗菌活性以及其他特性，本领域一直在尝试开发达托霉素各类衍生物或类似物，然而迄今为止尚未成功开发出制备达托霉素类似物的环保经济的方法。因此，本领域迫切需要开发各类新型的达托霉素类似物的制备方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供了一种新型的达托霉素衍生物。
[0007]本专利技术的另一目的是提供了一种新型达托霉素类似物的制备方法。
[0008]本专利技术的另一目的是提供了一种用于制备达托霉素素类似物的突变合成元及其制备方法和用途。
[0009]本专利技术第一方面提供了一种新型的达托霉素衍生物，所述达托霉素类似物具有式I所示的结构：
[0010][0011]其中，式I中苯环上的取代基R数量为1
‑
4个，各自独立地选自下列之一：卤素，C1
‑
C6烷基，
‑
OH，C1
‑
C6烷氧基，
‑
SH，C1
‑
C6烷硫基，
‑
NH2，
‑
NH(C1
‑
C4烷基)，
‑
N(C1
‑
C4烷基)2，
‑
C(O)H，
‑
COOH，
‑
COOC1
‑
C4烷基，
‑
CONH2，
‑
CONH(C1
‑
C4烷基)，
‑
CON(C1
‑
C4烷基)2，氧代基。
[0012]进一步地，式I中苯环上的取代基R数量优选为1个。
[0013]在另一优选例中，所述R为卤素。
[0014]在另一优选例中，所述R为F。
[0015]在另一优选例中，所述达托霉素类似物具有式Ia结构：
[0016][0017]在另一优选例中，所述达托霉素类似物具有式Ib结构：
[0018][0019]本专利技术第二方面是提供一种可用于产生达托霉素在第13位是取代犬尿氨酸的衍生物的瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)突变菌株，所述的菌株中下组基因被失活或敲除：瑰孢链霉菌基因组中色氨酸2，3
‑
双加氧酶基因，瑰孢链霉菌基因组上犬尿氨酸甲酰胺酶基因、瑰孢链霉菌基因组上犬尿氨酸酶基因。
[0020]本专利技术第三方面提供了一种制备达托霉素类似物的方法，包括以下步骤：
[0021](a)用突变合成元饲喂本专利技术第一方面所述的瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)突变菌株，进行发酵，从而产生达托霉素在第13位是取代犬尿氨酸的衍生物；
[0022](b)从发酵产物中分离出所述的达托霉素类似物。
[0023]进一步地，所述突变合成元具有式II所示的结构，
[0024][0025]式II中苯环上的取代基R与式I中相同。
[0026]在另一优选例中，所述R为卤素。
[0027]在另一优选例中，所述R为F。
[0028]在另一优选例中，所述R为4
‑
F。
[0029]在另一优选例中，所述R为5
‑
F。
[0030]在另有一优选例中，所述方法还包括合成所述突变合成元的步骤。
[0031]本专利技术第四方面提供了一种制备具有式II所示突变合成元的方法，包括步骤：
[0032](a)式III化合物与L
‑
丝氨酸在色氨酸合成酶的催化下进行反应，生成式IV化合物；
roseosporus)突变菌株发酵的培养基，其特征在于，所述培养基含有式II所示的突变合成元。
[0048]应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
[0049]图1表示突变合成元5
‑
F
‑
犬尿氨酸的合成路线。
[0050]图2为突变合成元5
‑
F
‑
犬尿氨酸的核磁1H
‑
NMR(600MHz,D2O)。
[0051]图3为突变合成元5...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种达托霉素衍生物，其特征在于，所述衍生物如式I所示其中，式I中苯环上的取代基R数量为1
‑
4个，各自独立地选自下列之一：卤素，C1
‑
C6烷基，
‑
OH，C1
‑
C6烷氧基，
‑
SH，C1
‑
C6烷硫基，
‑
NH2，
‑
NH(C1
‑
C4烷基)，
‑
N(C1
‑
C4烷基)2，
‑
C(O)H，
‑
COOH，
‑
COOC1
‑
C4烷基，
‑
CONH2，
‑
CONH(C1
‑
C4烷基)，
‑
CON(C1
‑
C4烷基)2，氧代基。2.如权利要求1所述的一种达托霉素衍生物的制备方法，其特征在于所述达托霉素衍生物为达托霉素在13位犬尿氨酸芳环上H被取代的类似物，其制备方法包括以下步骤：(a)提供一种可用于生产达托霉素在13位犬尿氨酸芳环上H被取代的类似物的玫瑰孢链霉菌突变菌株，所述的菌株中以下的基因被失活或敲除：瑰孢链霉菌基因组中色氨酸2，3
‑
双加氧酶基因，瑰孢链霉菌基因组上犬尿氨酸甲酰胺酶基因、瑰孢链霉菌基因组上犬尿氨酸酶基因；(b)在发酵培养基中，用突变合成元饲喂所述的玫瑰孢链霉菌突变菌株，进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴杰群，王亚楠，朱进妹，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：