一种六价铬离子吸附富集多肽及其载体的制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种六价铬离子吸附富集多肽及其载体的制备方法与应用。所述载体通过以下方法制备而成:200mg的γ

【技术实现步骤摘要】
一种六价铬离子吸附富集多肽及其载体的制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，特别涉及一种六价铬离子吸附富集多肽及其载体的制备方法与应用。

技术介绍

[0002]铬是一种自然存在的金属元素，存在于岩石、土壤、火山尘埃和气体中，也存在于动植物中。这种元素最常见的形式是金属形式的铬(0)，三价铬Cr(III)和六价铬Cr(VI)。六价铬是一种已知的毒素，诱变剂和致癌物。三价铬在50多年前就被确认为哺乳动物体内必需的微量元素，是正常葡萄糖代谢所必需的。事实上，人类缺乏铬会导致与II型糖尿病和心血管疾病相关的症状。金属氧阴离子铬酸盐(CrO
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)是一种广泛存在的环境污染物，因为它广泛应用于工业和国防领域，如制革、电镀、油漆颜料制造、不锈钢焊接和核武器生产。Cr(VI)是高溶性和毒性的，它可以通过消化道、呼吸道、皮肤和粘膜侵入人体，长期接触会导致突变和致癌。例如Cr(VI)暴露在培养细胞中导致一系列基因组损伤，包括DNA单链和双链断裂、氨基酸和蛋白质与DNA的结合、DNA链间交联和Cr
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DNA加合物。Cr毒性还与各种体内非特异性还原剂(如谷胱甘肽、NADH、NADPH和半胱氨酸)或细胞单电子还原酶在细胞内将Cr(VI)部分还原为不稳定的中间Cr(V)过程中产生的活性氧中间体有关。
[0003]传统的六价铬检测方法需要通过强酸，高温消解或者萃取的方法来提取六价铬再进行仪器检测。基于上述情况，本专利技术提出了一种六价铬离子吸附富集及制备方法。
专利技术内容
[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种六价铬离子吸附富集多肽。
[0005]本专利技术的另一目的在于，提供一种六价铬离子吸附富集多肽载体。
[0006]本专利技术的再一目的在于，提供一种六价铬离子吸附富集多肽载体的制备方法。
[0007]本专利技术的再一目的在于，提供上述多肽和多肽载体的应用。
[0008]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0009]一种六价铬离子吸附富集多肽，为以下多肽的至少一种：
[0010]Cbp
‑
1，其氨基酸序列为NHIYGRTTPEWR；
[0011]Cbp
‑
2，其氨基酸序列为YSDSTSAMRGLM；
[0012]Cbp
‑
3，其氨基酸序列为LGVANPLRSATD；
[0013]Cbp
‑
4，其氨基酸序列为IYRSDTSCKMCE；
[0014]Cbp
‑
5，其氨基酸序列为GFFQVPGQHVNK；
[0015]Cbp
‑
6，其氨基酸序列为DYKTHGFPALRH；
[0016]Cbp
‑
7，其氨基酸序列为HFVKTPARWAWG；
[0017]Cbp
‑
8，其氨基酸序列为FIGLPVITEIPF；
[0018]Cbp
‑
9，其氨基酸序列为YGNAHIARLLVP。
[0019]优选的，所述的六价铬离子吸附富集多肽为Cbp
‑
1、Cbp
‑
4、Cbp
‑
6和Cbp
‑
7中的至少一种。
[0020]优选的，所述的六价铬离子吸附富集多肽为Cbp
‑
6和Cbp
‑
7中的至少一种。
[0021]一种六价铬离子吸附富集多肽载体的制备方法，包括如下步骤：
[0022](1)将γ
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Fe2O3纳米粒子分散在水中，加入壳聚糖混匀，然后加入戊二醛，搅拌，干燥得到nano载体；
[0023](2)将六价铬离子吸附富集多肽溶于溶液中，取步骤(1)制备得到的nano载体加入，搅拌，过滤，洗涤，干燥，得到六价铬离子吸附富集多肽载体。
[0024]步骤(1)所述的γ
‑
Fe2O3纳米粒子与壳聚糖的质量比为1：2～8；优选为1:4。
[0025]步骤(1)所述的水的量以能溶解溶质为准。
[0026]步骤(1)所述的戊二醛与γ
‑
Fe2O3纳米粒子的比为1mL:30～100mg；优选为1mL：50mg。
[0027]步骤(1)所述的搅拌的条件为40～50℃下搅拌2～4h；优选为45℃下搅拌3h。
[0028]步骤(2)所述的六价铬离子吸附富集多肽与nano载体的质量比为1:5～20；优选为1:10。
[0029]步骤(2)所述的溶液为磷酸盐溶液。
[0030]步骤(2)所述的搅拌的条件为800～900rpm搅拌6～8h。
[0031]上述制备方法制备得到的六价铬离子吸附富集多肽载体。
[0032]上述六价铬离子吸附富集多肽及其载体在制备六价铬吸附剂中的应用。
[0033]上述六价铬离子吸附富集多肽及其载体在吸附六价铬中的应用。
[0034]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0035]1、本专利技术所述的六价铬离子吸附富集多肽制备简单，且能够快速吸附溶液中的六价铬离子。
[0036]2、通过将多肽负载在磁性核心上，可以实现快速收回和分离水体中六价铬离子的目的。
[0037]3、由于实现了载体负载，因此可以重复多次使用该载体，能选择性地高度吸附六价铬，再经过稀硝酸洗脱从而有效从液体中富集六价铬。
附图说明
[0038]图1九条多肽和原始肽库对六价铬离子的亲和力。
[0039]图2四条对六价铬的亲和力较高的多肽对不同金属离子的亲和力。
[0040]图3实施例2中各个吸附剂的单位吸附量。
[0041]图4实施例2中各个吸附剂的脱出量。
[0042]图5实施例2中各个吸附剂的脱出率。
具体实施方式
[0043]下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。
[0044]下面实施方案中若未注明具体试验条件，则通常按照常规试验条件或按照试剂公
司所建议的试验条件。所使用的材料、试剂等，若无特殊说明，均为从商业途径得到的试剂和材料。
[0045]实施例1筛选对六价铬特异性结合多肽序列
[0046](1)金属络合树脂的制备。在Ni
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NTA Sefinose(Bio Basic Inc公司，加拿大)，树脂上用六价铬离子取代预负载的镍离子，制备了六价铬离子固定树脂。具体地说，为了从Ni
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NTA
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Sefinose树脂上剥离Ni(II)，首先用足够的EDTA溶液(0.5mol/L，pH 8.0)洗涤树脂珠，直到树脂从蓝色变为无色。然后用柠檬酸盐缓冲液(pH 4.4)漂洗三次，并在4℃下储存以备将来使用，该不含金属的树脂标记为M
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树脂。为制备六价铬固定本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种六价铬离子吸附富集多肽，其特征在于为以下多肽的至少一种：Cbp
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1，其氨基酸序列为NHIYGRTTPEWR；Cbp
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2，其氨基酸序列为YSDSTSAMRGLM；Cbp
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3，其氨基酸序列为LGVANPLRSATD；Cbp
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4，其氨基酸序列为IYRSDTSCKMCE；Cbp
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5，其氨基酸序列为GFFQVPGQHVNK；Cbp
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6，其氨基酸序列为DYKTHGFPALRH；Cbp
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7，其氨基酸序列为HFVKTPARWAWG；Cbp
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8，其氨基酸序列为FIGLPVITEIPF；Cbp
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9，其氨基酸序列为YGNAHIARLLVP。2.根据权利要求1所述的六价铬离子吸附富集多肽，其特征在于：所述的六价铬离子吸附富集多肽为Cbp
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1、Cbp
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4、Cbp
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6和Cbp
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7中的至少一种。3.一种六价铬离子吸附富集多肽载体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将γ
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Fe2O...

【专利技术属性】
技术研发人员：林影，郑穗平，江士波，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：