TIMP1作为胆管癌的标志物制造技术

本发明专利技术涉及一种用于评定患者样品中胆管癌的体外方法，其包括以下步骤：a)确定所述患者样品中组织金属蛋白酶抑制剂

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】TIMP1作为胆管癌的标志物


[0001]本专利技术涉及用于评定患者样品中胆管癌的体外方法和用于执行所述方法的试剂盒。此外，本专利技术涉及作为标志物分子的TIMP1以及包含TIMP1和MMP2的标志物组合分别在胆管癌的体外评定中的用途。

技术介绍

[0002]胆管癌(缩写为CCA或CCC)是一种起源于胆管上皮细胞的高度致命的恶性胆道肿瘤。CCA占所有消化道肿瘤的约3％，是仅次于肝细胞癌(缩写为HCC)的第二常见的原发性肝脏肿瘤。基于其解剖起源，CCA分类为肝内(缩写为iCCA)、肝门部(缩写为pCCA)或远端(缩写为dCCA)CCA(Rimola J.等人，Hepatology，2009，50(3)：791
‑
798)。CCA(特别是iCCA)的发病率似乎在增加，在西方国家可能高达每年每100,000人中2.1例，泰国东北部的已知发病率最高(每100,000人中＞80例；Martha M.Kirstein，Arndt Vogel，Epidemiology and Risk Factors 0f Cholangiocarcinoma，Visc Med 2016；32：395
‑
400)。
[0003]CCA与HCC具有相似的风险因素，包括肝硬化、慢性病毒性肝炎、酒精过量、糖尿病和肥胖症。其他公认的CCA风险因素与慢性胆系炎症有关，例如肝胆吸虫、原发性硬化性胆管炎(缩写为PSC)、胆道囊肿、肝石病和毒素(Bridgewater J.等人，J Hepatol.2014，6：1268
‑
893，8
‑
14；Khan S.A.等人，Consensus document.Gut.，2002，51 Suppl 6：VI1
‑
9；Khan S.A.等人，Gut.2012，61(12)：1657
‑
1669；Alvaro D.等人，Dig Liver Dis.，2010，42：831
‑
838；Benavides M.等人，Clin Transl Oncol.，2015，17：982
‑
987；Benson III A.B.等人，J Natl Compr Canc Netw.，2009，7：350
‑
391；Cai J.Q.等人，J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci.，2014，34：469
‑
475；Rerknimitr R.等人，J Gastroenterol Hepatol.，2013，28：593
‑
607)。
[0004]CCA诊断通常很复杂，并且需要使用多种诊断方式在良性与恶性结构之间进行区别，以将CCA与其他原发性肝肿瘤(主要是HCC和混合型HCC
‑
CCA)区分开来并对肿瘤进行分期和分级。CCA(特别是iCCA)与HCC之间的区分对于手术计划和预后评定至关重要。成像方法，如动态计算机断层扫描，可以基于异质性造影剂摄取以及胆管癌延迟期不存在造影剂清除来区分HCC与CCA(Rimola J.等人，Hepatology 2009，50(3)：791
‑
798)。然而，肝内胆管癌的这些经典特征并不普遍存在于所有CCA病例中(Iavarone M.等人，J Hepatol.，2013，58：1188
‑
93；Kim S.H.等人，J Comput Assist Tomogr.，2012，36：704
‑
09)。
[0005]迄今为止，没有可用于CCA特异性诊断的特异性血液测试。糖类抗原CA19
‑
9和CA
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125以及癌胚抗原CEA是关于疑似CCA的最广泛使用的标志物，但它们的诊断性能非常有限。CA19
‑
9在胰腺癌、结直肠癌和胃癌以及非恶性病症(诸如PSC(原发性硬化性胆管炎)和阻塞性黄疸)中升高。此外，缺乏Lewis抗原的患者(占总人口的10％)不能产生CA19
‑
9，因此无法从检测中获益。CA19
‑
9在CCA患者中的敏感性和特异性分别为40％至70％和50％至80％，其中阳性预测值为16％至40％。CEA在20％至30％的CCA患者中升高，而CA
‑
125在大约40％至50％的患者中升高，这不足以进行准确诊断(Alsaleh M.等人，Int J Gen Med.，2018，12：
13
‑
23；Khan S.A.等人，Gut.，2002，51Suppl 6：VI1
‑
9；PatelA.H.等人，Am J Gastroenterol，2000，95：204
‑
207；Hultcrantz R.等人，J Hepatol，1999，30：669
‑
673)。这些局限性得到了主要国际指南的认可，建议仅将CEA和CA19
‑
9测量作为胆管癌管理中的支持性而非诊断性工具(Khan S.A.等人，Consensus document.Gut.，2002，51 Supp1 6：VI1
‑
9；Khan S.A.等人，Gut.2012，61(12)：1657
‑
1669；Alvaro D.等人，Dig Liver Dis.，2010，42：831
‑
838；Benavides M.等人，Clin Trans1 Oncol.，2015，17：982
‑
987；Benson IIIA.B.等人，J Natl Compr Canc Netw.，2009，7：350
‑
391；Cai J.Q.等人，J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci.，2014，34：469
‑
475；Rerknimitr R.等人，J Gastroenterol Hepatol.，2013，28：593
‑
607)。
[0006]因此，根据当前关于肝内胆管癌诊断和管理的EASL指南，鉴定新型生物标志物以用于更具体的CCA诊断和分层被认为是未满足的医疗需求之一(Bridgewater J.，J Hepatol.，2014，6：1268
‑
89)。
[0007]如上所述，目前所有用于胆管癌的诊断和鉴别诊断的方法都存在较大的不足：
[0008]超声：超声检查(缩写为US)对于排除胆结石是可靠的，但依赖于操作者，并且单独使用时不足以调查研究疑似CCA。US可能遗漏小肿瘤并且无法准确界定肿瘤范围(Khan S.A.等人，Gut.，2002，51 Suppl 6：VI 1
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9；Khan S.A.等人，Gut.2012，61(12)：1657
‑
1669)。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于评定患者样品中胆管癌的体外方法，所述方法包括：a)确定所述患者样品中组织金属蛋白酶抑制剂
‑
1(TIMP1)的水平，其中所述患者样品选自由以下项组成的组：来自个体的血清、血浆和全血样品，b)将在步骤(a)中确定的TIMP1的水平与TIMP1的参考水平进行比较，以及c)通过将在步骤(a)中确定的所述水平与所述TIMP1的参考水平进行比较来评定所述患者样品中的胆管癌，其中与所述TIMP1的参考水平相比TIMP1的增加水平指示所述患者样品中的胆管癌。2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(a)包括：在体外使来自所述个体的所述血清、血浆或全血样品的一部分与对TIMP1具有特异性结合亲和力的抗体或其片段接触，从而在所述抗体或其片段与存在于所述患者样品中的TIMP1之间形成复合物，所述抗体具有可检测标记；将在所述接触步骤中形成的所述复合物与不构成所述复合物的抗体或其片段分离；将来自构成在所述接触步骤中形成的所述复合物的抗体或其片段的所述可检测标记的信号量化，所述信号与存在于所述个体的所述患者样品中的TIMP1的量成比例，由此基于经量化的信号来计算所述个体的所述样品中TIMP1的水平；并且/或者其中步骤(b)包括：将在所述量化步骤中确定的所述个体的所述患者样品中TIMP1的所计算水平值与TIMP1的参考水平进行比较；并且/或者其中步骤(c)包括：当所述TIMP1的所计算水平值大于所述TIMP1的参考水平时，提供对所述个体中胆管癌的评定。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗体或其片段分离自经免疫的动物，其中所述动物选自由以下项组成的组：小鼠、兔、绵羊、鸡、山羊和豚鼠。4.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(a)包括夹心型免疫测定。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤(c)由计算装置执行。6.一种用于评定患者样品中胆管癌的体外方法，所述方法包括：(a
′
)确定所述患者样品中组织金属蛋白酶抑制剂
‑
1(TIMP1)的水平，其中所述患者样品选自由以下项组成的组：来自个体的血清、血浆和全血样品，(b
′
)确定所述患者样品中胆管癌的基质金属蛋白酶
‑
2(MMP2)的水平，以及(c
′
)通过将步骤(a
′
)和(b
′
)的确定结果进行比较来评定胆管癌，其中TIMP1和MMP2的水平指示CCA。7.根据权利要求6所述的方法，其中步骤(a
′
)包括：在体外使来自所述个体的所述血清、血浆或全...

【专利技术属性】
技术研发人员：F，
申请(专利权)人：豪夫迈，
类型：发明
国别省市：