结合TROP2的纳米抗体及其用途制造技术

本申请提供一种与人TROP2特异性结合的重链抗体、或其抗原结合部分。还提供编码该抗体或其抗原结合部分的核酸分子，用于表达该抗体或其抗原结合部分的表达载体、宿主细胞和方法。本申请还提供包含该抗体或其抗原结合部分的免疫偶联物和药物组合物，以及使用该TROP2抗体或其抗原结合部分的治疗方法。抗体或其抗原结合部分的治疗方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合TROP2的纳米抗体及其用途
[0001]相关申请和引用并入
[0002]本申请要求2020年11月3日提交的中国申请202011209105.X的优先权。
[0003]前述申请、在其中引用或在其审查过程中引用的所有文件(“申请引用文件”)、在本文中引用或提及的所有文件(包括但不限于本文引用的所有文献、专利、公开的专利申请)(“本文引用文件”)、以及在本文引用文件中引用或提及的所有文件，连同本文或任意本文引用并入文件中提及的任何制造商手册、说明书、产品规格和产品页，均通过引用的方式并入本文，且可能在实施本专利技术时采用。更具体而言，所有参考文件均通过引用的方式并入，如同各文件具体且个别地通过引用的方式并入。在本公开中提及的任何Genbank序列通过引用的方式并入，这些Genbank序列为本公开最早有效递交日的序列。
专利

[0004]本申请大体上涉及分离的单克隆重链抗体、或其抗原结合部分，其与人TROP2结合，具有高亲和力和功能性。还提供编码该抗体或其抗原结合部分的核酸分子，用于表达该抗体或其抗原结合部分的表达载体、宿主细胞和方法。本申请还提供可以包含该抗体或其抗原结合部分的双特异性分子、免疫偶联物、嵌合抗原受体、溶瘤病毒和药物组合物，以及使用本申请的TROP2抗体或其抗原结合部分的治疗方法。

技术介绍

[0005]TROP2是一种跨膜糖蛋白，又称为表皮糖蛋白1(EGP
‑
1)、膜成分表面标志物
‑
1(M1S1)、肿瘤相关钙离子信号转导子2(TACSTD2)和胃肠肿瘤相关抗原733
‑
1(GA733
‑
1)。各TROP2分子由疏水性前导肽、胞外结构域、跨膜结构域和胞质尾部组成。其胞质尾部含有高度保守的磷脂酰肌醇4，5
‑
二磷酸(PIP2)结合序列和位于303位的丝氨酸磷酸化位点(Zaman S et al.，(2019)Targeting Trop
‑
2 in solid tumors：futureprospects.Onco Targets Ther.12：1781
‑
1790)。TROP2的结合搭档包括IFG
‑
1、Claudin
‑
1、Claudin
‑
7、cyclin D1和PKC(Shvartsur A et al.，(2015)Trop2 and its overexpression in cancers：regulation and clinical/therapeutic implications.Genes Cancer.6(3
‑
4)：84
‑
105)。
[0006]TROP2在正常组织中低水平表达，在例如胚胎器官发育和胎儿生长中起作用，而在所有癌症类型中均发现TROP2表达上调，无论正常对应物的基线TROP2水平如何(Mustata RC et al.，(2013)Identification of Lgr5
‑
independent spheroid
‑
generating progenitors of the mouse fetal intestinal epithelium.Cell Reports.5(2)：421
‑
432；Guerra E et al.，(2012)mTrop1/Epcam knockout mice develop congenital tufting enteropathy through dysegulation of intestinal e
‑
cadherin/β
‑
catenin.PLoS ONE.7(11)：e49302；Trerotola M et al.，(2013)Upregulation of Trop
‑
2 quantitatively stimulates human cancer growth.Oncogene.32(2)：222
‑
233)。研究显示，TROP2表达所依赖的一些转录因子与癌症发展相关，例如TP63/TP53L和Wilm肿瘤1(WT1)，且已证实TROP2参与许多与肿瘤发生相关的细胞信号通路。例如，TROP2信号通路，通
In Vivo Antitumor Activity Mediated by Antibody
‑
dependent Cellular Cytotoxicity.Anticancer Res.36(11)：5937
‑
5944)。当前，大多数处于临床前和临床试验中的TROP2靶向治疗剂是抗体
‑
药物偶联物(ADC)，包括DS
‑
1062a、IMMU
‑
1 32和PF
‑
06664178，迄今为止在实体瘤治疗中取得了一些令人鼓舞的结果，且毒性较小(Zaman S et al.，(2019)同上)。
[0009]需要另外的具有低内化活性的TROP2抗体用作裸抗体、或具有高内化活性用于制备ADC。
[0010]本申请中对于任何文件的引用或标识，并不是承认这些文件是本专利技术的现有技术。

技术实现思路

[0011]本申请提供一种分离的重链抗体、或其抗原结合部分，其结合TROP2(例如，人TROP2)，且与现有技术TROP2抗体例如赛妥珠单抗(IMMU
‑
132的抗体部分)相比，具有相当的(如果不是更高的话)与人和/或猴TROP2的结合亲和力/能力、以及相当的(如果不是更高的话)内化活性。
[0012]本申请的重链抗体或其抗原结合部分可以用于多种应用，包括体外和体内的TROP2蛋白检测(若放射性标记的话)、以及TROP2相关疾病(例如癌症)的治疗。
[0013]因此，在一个方面，本申请涉及结合TROP2的分离的单克隆重链抗体(例如，骆驼源、嵌合或人源化抗体)或其抗原结合部分，其具有可变区，该可变区可以包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，其中该VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区可以分别包含与(1)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝D、X2＝G)；(2)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝E、X2＝G)；(3)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝D、X2＝A)；(4)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝I、X2＝G)；(5)SEQ ID NOs：1、2(X1＝E、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝E、X2＝G)；(6)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝A、X3＝D、X4＝S)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种重链抗体或其抗原结合部分，其与TROP2结合，包含可变区，所述可变区包含CDR1区、CDR2区和CDR3区，其中所述CDR1区、CDR2区和CDR3区分别包含与(1)SEQ ID NOs：1、2(x1＝D、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝D、X2＝G)；(2)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝E、X2＝G)；(3)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝D、X2＝A)；(4)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝I、X2＝G)；(5)SEQ ID NOs：1、2(X1＝E、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝E、X2＝G)；(6)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝A、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝E、X2＝G)；(7)SEQ ID NOs：1、2(X1＝E、X2＝G、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝D、X2＝A)；(8)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝A、X3＝D、X4＝S)和3(X1＝D、X2＝A)；(9)SEQ ID NOs：1、2(X1＝E、X2＝G、X3＝E、X4＝S)和3(X1＝E、X2＝G)；(10)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝A、X3＝E、X4＝S)和3(X1＝E、X2＝G)；(11)SEQ ID NOs：1、2(X1＝E、X2＝G、X3＝D、X4＝T)和3(X1＝D、X2＝A)；或(12)SEQ ID NOs：1、2(X1＝D、X2＝A、X3＝D、X4＝T)和3(X1＝D、X2＝A)具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的重链抗体或其抗原结合部分，其中所述可变区包含与SEQ ID NOs：4(X1＝S、X2＝Q、X3＝D、X4＝G、X5＝P；X1＝S、X2＝Q、X3＝E、X4＝G、X5＝P；X1＝S、X2＝Q、X3＝D、X4＝A、X5＝P；X1＝S、X2＝Q、X3＝I、X4＝G、X5＝P；或X1＝T、X2＝G、X3＝D、X4＝G、X5＝L)、5(X1＝E、X2＝G、X3＝D；X1＝D、X2＝A、X3＝D；X1＝E、X2＝G、X3＝E；或X1＝D、X2＝A、X3＝E)；6(X1＝E、X2＝G、X3＝S；X1＝D、X2＝A、X3＝S；X1＝E、X2＝G、X3＝T；或X1＝D、X2＝A、X3＝T)、7、8(X1＝F、X2＝Y、X3＝K、X4＝A；X1＝L、X2＝F、X3＝K、X4＝A；X1＝L、X2＝Y、X3＝R、X4＝A；X1＝L、X2＝Y、X3＝K、X4＝R；或X1＝L、X2＝Y、X3＝K、X4＝A)、9(X1＝F、X2＝Y、X3＝K、X4＝...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈明久，马志清，
申请(专利权)人：博奥信生物技术南京有限公司，
类型：发明
国别省市：