PD-1结合抗体及其用途制造技术

本申请涉及一种与人PD

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PD
‑
1结合抗体及其用途
[0001]相关申请和引用并入
[0002]本申请要求2020年8月31日提交的美国专利申请63/072,421的优先权。
[0003]在本文中引用或提及的所有文件(包括但不限于本文引用的所有文献、专利、公开的专利申请)(“本文引用文件”)，在本文引用文件中引用或提及的所有文件，以及本文或任意本文引用并入文件中提及的任何制造商手册、说明书、产品规格和产品页，均通过引用的方式并入本文，且可能在实施本专利技术时采用。更具体而言，所有参考文件均通过引用的方式并入，如同各文件具体且个别地通过引用的方式并入。在本公开中提及的任何Genbank序列通过引用的方式并入，这些Genbank序列为本公开最早有效递交日的序列。
专利

[0004]本申请大体上涉及分离的单克隆抗体，特别是小鼠源、嵌合或人源化单克隆抗体，或其抗原结合部分，其与PD
‑
1结合，具有高亲和力和功能性。还提供编码该抗体或其抗原结合部分的核酸分子，用于表达该抗体或其抗原结合部分的表达载体、宿主细胞以及方法。本申请还提供可以包含该抗体或其抗原结合部分的双特异性分子、免疫偶联物、嵌合抗原受体和药物组合物，以及使用本申请的PD
‑
1抗体或其抗原结合部分的治疗方法。

技术介绍

[0005]免疫系统对有害的入侵物造成损伤，而同时豁免健康细胞。这种免疫防御和自身耐受间的平衡对正常生理功能而言十分关键，是通过免疫反应的多重检查和制衡实现的。例如，效应免疫细胞只有在通过免疫检查点后才能发挥全部功能。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)和程序性细胞死亡蛋白1(PD
‑
1)是最早发现的两个抑制性免疫检查点受体，作为免疫反应的制动器，并提供免疫抑制性信号。CTLA4在T细胞活化过程的早期被诱导，并与CD28竞争结合CD80/CD86。PD
‑
1随后表达并与程序性细胞死亡1配体1(PD
‑
L1)和/或PD
‑
L2结合以对抗TCR/CD28诱导的积极信号(Sharpe AH，Pauken KE.(2018)Nat Rev Immunol.18(3)：153
‑
167)。
[0006]PD
‑
1是一种跨膜蛋白，包含膜近端的免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)和膜远端的酪氨酸转换基序(ITSM)(Thomas，M.L.(1995)J Exp Med 181：1953
‑
6；Vivier，E and Daeron，M(1997)Immunol Today 18：286
‑
91)。与PD
‑
L1结合后，PD
‑
1激活引起ITSM磷酸化，从而募集含有Src同源区域2结构域的磷酸酶1/2和slam相关蛋白，使TCR和CD28近端信号分子例如ZAP70去磷酸化，以及使下游信号通路例如PI3K/AKT和Ras
‑
MEK
‑
ERK通路失活(Sharpe AH，Pauken KE.(2018)同上；Yokosuka T et al.，(2012)J Exp Med.209(6)：1201
‑
17)。根据情况的不同，PD
‑1‑
PD
‑
L1信号通路可诱导效应T细胞的凋亡、失能和耗竭，固有淋巴细胞的增殖和功能，和/或Treg细胞的增殖(Qin W et al.，(2019)Front Immunol.10：2298)。
[0007]PD
‑
L1和PD
‑
L2在造血细胞和非造血组织上的表达可以预防组织炎症，并有助于维持稳态，而PD
‑
L1和/或PD
‑
L2在癌细胞上的表达可帮助癌细胞逃避免疫监视。具体来说，肿
瘤细胞上的PD
‑
L1与细胞毒性T细胞上PD
‑
1的结合导致CD8
+
T细胞的失能和凋亡，且PD
‑
L1使得肿瘤细胞抵抗CD8
+
T细胞的裂解作用(Azuma T et al.，(2008)Blood 111(7)：3635
‑
3643)。一些PD
‑
1或PD
‑
L1抑制剂已被FDA批准用于癌症治疗，包括两种PD
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1抗体，纳武单抗(nivolumab)和帕博利珠单抗(pembrolizumab)，以及三种PD
‑
L1抗体，阿维单抗(avelumab)、阿替利珠单抗(atezolizumab)和度伐鲁单抗(durvalumab)。纳武单抗(Bristol Myers Squibb)已被批准用于治疗非小细胞肺癌(NSCLC)、肾细胞癌(RCC)、膀胱癌(BC)、微卫星不稳定或错配修复缺陷(MSIH/dMMR)的结直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、经典霍奇金淋巴瘤(cHL)、黑色素瘤、和头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)。帕博利珠单抗(Merck)已被批准用于治疗黑色素瘤、HNSCC、子宫颈癌、cHL、NSCLC、BC、胃和胃食管癌、以及所有带MSIH/dMMR的晚期实体瘤。一个对涉及11379例患者的19项随机临床试验的元分析表明，PD
‑
1治疗的生存结果显著优于PD
‑
L1疗法(Duan J et al.，(2020)JAMA Oncol.6(3)：375
‑
384)。
[0008]在人免疫缺陷病毒(HIV)、猴免疫缺陷病毒(SIV)、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染中，CD8
+
T细胞上也发现了高表达的PD
‑
1。PD
‑
1/PD
‑
L1阻断可以恢复CD8
+
T细胞和CD4
+
T细胞的功能、消除肝脏驻留NK细胞对T细胞的抑制作用、促进细胞因子的产生、并降低病毒载量(Barber DL et al.，(2006)Nature.439：682
‑
687；Qin W et al.，(2019)同上)。PD
‑
1和/或PD
‑
L1疗法已显示出对脓毒症的有益效果，且纳武单抗和BMS
‑
936559正处于严重脓毒症治疗的临床试验中(Riva A，Chokshi S.(2018)Hepatol Iht.12(3)：223
‑
36)。
[0009]在临床应用中，一些患者对目前批准的PD
‑
1抗体无应答。因此，需要具有增强药物特性的其他单克隆抗体。
[0010]本申请中对任何文件的引用或标示，并不是承认这些文件是本申请的现有技术。

技术实现思路

[0011]本申请提供分离的单克隆抗体，例如小鼠源、嵌合或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其与PD
‑
1结合，包含：i)重链可变区，其包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，其中该VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区分别包含与(1)SEQ ID NOs：1、3和6(X1＝D、X2＝Y)；(2)SEQ ID NOs：1、3和6(X1＝E、X2＝Y)；(3)SEQ ID NOs：1、4和6(X1＝D、X2＝W)；或(4)SEQ ID NOs：2、5和7具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；和/或ii)轻链可变区，其包含VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区，其中该VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与(1)SEQ ID NOs：8(X1＝I、X2＝N)、10和12；(2)SEQ ID NOs：8(X1＝I、X2＝A)、10和12；(3)SEQ ID NOs：8(X1＝L、X2＝D)、10和12；或(4)SEQ ID NOs：9、11和13具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该VH CDR1区、VH CDR2区、VH CDR3区、VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与(1)SEQ ID NOs：1、3、6(X1＝D、X2＝Y)、8(X1＝I、X2＝N)、10和12；(2)SEQ ID NOs：1、3、6(X1＝E、X2＝Y)、8(X1＝I、X2＝A)、10和12；(3)SEQ ID NOs：1、4、6(X1＝D、X2＝W)、8(X1＝L、X2＝D)、10和12；或(4)SEQ ID NOs：2、5、7、9、11和13具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。3.如权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该重链可变区包含与SEQ ID NOs：14、15(X1＝S、X2＝M、X3＝K；X1＝T、X2＝M、X3＝K；X1＝S、X2＝V、X3＝K；X1＝S、X2＝M、X3＝T；X1＝T、X2＝V、X3＝T)、16(X1＝V、X2＝S、X3＝I；X1＝I、X2＝G、X3＝I；X1＝I、X2＝S、X3＝M)、17(X1＝R、X2＝A、X3＝V；Xl＝K、X2＝V、X3＝V；x1＝K、X2＝A、X3＝R)、18、19或42具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。4.如权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该轻链可变区包含与SEQ ID NOs：20、21(x1＝N；X1＝A)、22或23具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。5.如权利要求2所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该重链可变区和轻链可变区分别包含与(1)SEQ ID NOs：14和20；(2)SEQ ID NOs：15(X1＝S、X2＝M、X3＝K)和21(X1＝N)；(3)S...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈明久，夏树开，马志清，彭则羽，
申请(专利权)人：博奥信生物技术南京有限公司，
类型：发明
国别省市：