一种抗MASP-2抗体及其制备方法与用途技术

本发明专利技术提供了一种结合人MASP

【技术实现步骤摘要】
一种抗MASP
‑
2抗体及其制备方法与用途


[0001]本专利技术涉及抗体药物领域，具体地，涉及一种抗MASP
‑
2抗体及其制备方法与用途。

技术介绍

[0002]凝集素途径主要由组织损伤或微生物感染激活。近年来越来越多的研究显示补体激活的MBL途径在多种疾病中发挥重要作用。如在IgAN(IgA nephropathy，IgA肾病)患者中，沉积在肾小球系膜细胞的MBL与IgA1结合，活化MASPs酶原，从而激活MBL途径。Narsoplimab是一种靶向MASP
‑
2的全人IgG4单克隆抗体。目前，Narsoplimab正处于III期临床，开发用于IgAN和非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)。但目前市场仍然缺乏高亲和力、高特异性、高生物活性的靶向MASP
‑
2的单克隆抗体。
[0003]因此，本领域需要开发一种高亲和力、高特异性、高生物活性的靶向MASP
‑
2的单克隆抗体。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种高亲和力、高特异性、高生物活性的抗MASP
‑
2单抗，及其制备方法与用途。
[0005]在本专利技术的第一方面，提供了一种抗人MASP
‑
2抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区和轻链可变区，其中
[0006]所述重链可变区包括三个重链互补决定区CDR：
[0007]SEQ ID NO.21所示的HCDR1，
[0008]SEQ ID NO.22所示的HCDR2，
[0009]SEQ ID NO.23所示的HCDR3；和
[0010]所述轻链可变区包括三个轻链互补决定区CDR：
[0011]SEQ ID NO.18所示的LCDR1，
[0012]SEQ ID NO.19所示的LCDR2，
[0013]SEQ ID NO.20所示的LCDR3；
[0014]其中，所述抗体或其抗原结合片段氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留MASP
‑
2结合亲和力的衍生序列。
[0015]在另一优选例中，所述抗原结合片段包括Fab片段、F(ab
’
)2片段、Fv片段。
[0016]在另一优选例中，上述任一CDR的氨基酸序列中包含经过添加、缺失、修饰和/或取代1、2或3个氨基酸的衍生CDR序列，并且使得含有所述衍生CDR序列的VH和VL所构成的衍生抗体能够保留与MASP
‑
2结合的亲和力。
[0017]在另一优选例中，所述添加、缺失、修饰和/或取代的氨基酸数量为1
‑
5个(如1
‑
3个，较佳地1
‑
2个，更佳地1个)。
[0018]在另一优选例中，所述抗体包括重链和轻链，所述抗体的重链包括所述的三个重
链互补决定区CDR以及用于连接重链互补决定区CDR的重链框架区；和所述的抗体的轻链包括所述的三个轻链互补决定区CDR以及用于连接轻链互补决定区CDR的轻链框架区。
[0019]在另一优选例中，所述的抗体还包括重链恒定区和/或轻链恒定区。
[0020]在另一优选例中，所述的重链恒定区为人源的，和/或所述的轻链恒定区为人源的。
[0021]在另一优选例中，所述抗体的重链可变区还包括人源的框架区，和/或所述抗体的轻链可变区还包括人源的框架区。
[0022]在另一优选例中，所述抗体的重链可变区还包括鼠源的框架区，和/或所述抗体的轻链可变区还包括鼠源的框架区。
[0023]在另一优选例中，所述的重链可变区具有SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列。
[0024]在另一优选例中，所述重链恒定区为人源或鼠源的。
[0025]在另一优选例中，所述重链恒定区为人源抗体重链IgG1或IgG4恒定区。
[0026]在另一优选例中，所述重链恒定区的序列如SEQ ID NO.13所示。
[0027]在另一优选例中，所述的轻链可变区具有SEQ ID NO.11所示的氨基酸序列。
[0028]在另一优选例中，所述轻链恒定区为人源或鼠源的。
[0029]在另一优选例中，所述轻链恒定区为人源抗体轻链kappa或lambda恒定区。
[0030]在另一优选例中，所述轻链恒定区的序列如SEQ ID NO.14或15所示。
[0031]在另一优选例中，所述抗体选自下组：动物源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、全人抗体、或其组合。
[0032]在另一优选例中，所述的抗体是部分或全人源化、或全人的单克隆抗体。
[0033]在另一优选例中，所述的抗体为全人抗体。
[0034]在另一优选例中，所述的抗体为双链抗体、或单链抗体。
[0035]在另一优选例中，所述抗体为抗体全长蛋白、或抗原结合片段。
[0036]在另一优选例中，所述抗体为单特异性抗体、双特异性抗体、或多特异性抗体。
[0037]在另一优选例中，所述的抗体为药物偶联物形式。
[0038]在另一优选例中，所述抗体具有选自下组的一个或多个特性：
[0039](a)特异性结合人、小鼠、大鼠或恒河猴的MASP
‑
2；
[0040](b)对人MASP
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2的亲和力的KD值(M)为1.0E
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8～1E
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10；
[0041](c)抑制MASP
‑
2介导的下游补体通路的激活。
[0042]在另一优选例中，所述重链可变区(VH)的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，和所述轻链可变区(VL)的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0043]在另一优选例中，所述重链可变区的氨基酸序列与如SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列至少有80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同源性或序列相同性。
[0044]在另一优选例中，所述轻链可变区的氨基酸序列与如SEQ ID NO.11示的氨基酸序列至少有80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同源性或序列相同性。
[0045]在本专利技术的第二方面，提供了一种重组蛋白，所述的重组蛋白包括：
[0046](i)如本专利技术的第一方面所述的抗体或其抗原结合片段；以及
[0047](ii)任选的协助表达和/或纯化的标签序列。
[0048]在另一优选例中，所述的标签序列包括6
×
His标签。
[0049]在另一优选例中，所述的重组蛋白(或多肽)包括融合蛋白。
[0050]在另一优选例中，所述的重组蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗人MASP
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2抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区和轻链可变区，其中所述重链可变区包括三个重链互补决定区CDR：SEQ ID NO.21所示的HCDR1，SEQ ID NO.22所示的HCDR2，SEQ ID NO.23所示的HCDR3；和所述轻链可变区包括三个轻链互补决定区CDR：SEQ ID NO.18所示的LCDR1，SEQ ID NO.19所示的LCDR2，SEQ ID NO.20所示的LCDR3；其中，所述抗体或其抗原结合片段氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留MASP
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2结合亲和力的衍生序列。2.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体包括重链和轻链，所述抗体的重链包括所述的三个重链互补决定区CDR以及用于连接重链互补决定区CDR的重链框架区；和所述的抗体的轻链包括所述的三个轻链互补决定区CDR以及用于连接轻链互补决定区CDR的轻链框架区。3.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述的重链可变区(VH)的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，和所述轻链可变区(VL)的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。4.一种重组蛋白，其特征在于，所述的重组蛋白包括：(i)如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段；以及(ii)任选的协助表达和/或纯化的标签序列。5.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码选自下组的多肽：(1)如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段；或(2)如权利要求4所述的重组蛋白。6.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求5所述的多核苷酸。7.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求6所述的载体或基因组中整合有权利要求5所述的多核苷酸。8.一种抗体偶联物，其特征在于，该抗体偶联物含有：(a)抗体部分，如权利要求1所述的抗体或其抗原结...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱祯平，周辰，黄浩旻，赵杰，蒋良丰，邢瑞，
申请(专利权)人：沈阳三生制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：