一种结合PCSK9抗原的单域抗体及其制备方法技术

本发明专利技术涉及生物医药种的抗体技术领域，具体涉及一种结合PCSK9抗原的单域抗体及其制备方法。本发明专利技术通过分离外周血单个核细胞，提取总RNA，经过逆转录和巢式PCR建库，获得高质量的PCSK9免疫单域抗体文库。将PCSK9抗原包被在酶标板上，利用噬菌体展示技术筛选PCSK9免疫单域抗体文库，再将筛选出的单域抗体转化至大肠杆菌表达系统中进行大量表达，从而能够在比较短的时间里获得具有高亲和力的PCSK9的单克隆单域抗体株。隆单域抗体株。隆单域抗体株。

【技术实现步骤摘要】
一种结合PCSK9抗原的单域抗体及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物医药种的抗体
，具体涉及一种结合PCSK9抗原的单域抗体及其制备方法。

技术介绍

[0002]目前市面上用于降低胆固醇的药物主要有他汀类(statins)、胆固醇吸收抑制剂、普罗布考等。尽管他汀类药物心血管疾病治疗上表现出色，但随着其广泛使用，产生的弊端也渐渐被发现。首先，他汀类治疗患者仍有较高心血管事件残余风险，在2年内发生的风险达22.4％；其次，有大量患者无法耐受他汀类药物，尤其是家族性高胆固醇血症患者，即使接受最大剂量的最有效的他汀类药物治疗，仍然不能达到降低低密度脂蛋白胆固醇(low
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density lipoprotein cholesterol，LDL
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c)浓度的目的；最重要的是，他汀类药物存在多种副作用，如引起患者血糖异常、肌肉毒性、记忆和认知障碍等，副作用的发生率高达20％，严重的副作用会导致横纹肌溶解和急性肾功能衰竭，相当一部分患者因不能忍受副作用带来的肌肉疼痛而终止了治疗。
[0003]前蛋白转化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种结合PCSK9抗原的单域抗体，其特征在于：所述单域抗体包括重链抗体可变区(VHH)，所述重链抗体可变区(VHH)由框架区(FR)和互补决定区(CDR)组成，其中所述互补决定区(CDR)包括互补决定区1(CDR1)，其序列为GRTFSDYA(SEQ ID NO：1)；互补决定区2(CDR2)，其序列为IGWSGGQT(SEQ ID NO：2)；互补决定区3(CDR3)，其序列为AASFLVIPGTVKTRYDS(SEQ ID NO：3)。2.根据权利要求1所述的单域抗体，其特征在于：所述重链抗体可变区(VHH)的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。3.一种编码权利要求1或2所述的单域抗体的多核苷酸序列，其特征在于：所述多核苷酸序列包括编码所述SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：3所示的互补决定区的核苷酸序列。4.根据权利要求3所述的多核苷酸序列，其特征在于：所述多核苷酸序列包括编码所述SEQ ID NO：4所示的重链抗体可变区(VHH)的核苷酸序列。5.根据权利要求3或4所述的多核苷酸序列，其特征在于：所述多核苷酸序列如SEQ I...

【专利技术属性】
技术研发人员：李新洋，王青青，舒羽，陈娟，霍瑞，赵相杰，陆居旭，洪军，于可豪，
申请(专利权)人：河南城建学院，
类型：发明
国别省市：