【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】高度纯化的病毒颗粒的制剂
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年8月7日提交的美国序列号63/063,108和2020年8月7日提交的美国序列号63/063,128的权益，它们中的每一者的公开内容以引用方式全文并入本文。
1.
[0003]本文尤其提供了高度纯化的病毒颗粒(例如，腺相关病毒(AAV)颗粒)的制剂。这些制剂可以包含基本上不含杂质(例如，产物相关杂质和工艺相关杂质)的纯化的AAV颗粒，以及缓冲剂、冷冻保护剂、非离子表面活性剂和任选的药学上可接受的盐中的一种或多种。在某些方面，本文提供的制剂维持或增强纯化的AAV颗粒的稳定性并且/或者减少或防止它们的聚集。
2.
技术介绍
[0004]腺相关病毒(AAV)是一种无包膜病毒，其可经工程化以将核酸递送到靶细胞，并且已成为基因治疗和基因递送应用中的有用载体。缺少病毒DNA的重组AAV(rAAV)基本上是基于蛋白质的纳米颗粒，其经工程化以穿过细胞膜，最终可在此将其核酸货物运输和递送到细胞核中。该病毒赋予的特性：当与其他病毒系统相比时，持续的基因表达、因具有广泛组织嗜性而天然存在于人类群体中、非整合性、非致病性、低免疫原性、有丝分裂后细胞的感染性和相对易生产，迎来了人类使用方面的迅速扩张。基于AAV(包括rAAV)的基因递送载体已成为众多临床基因疗法应用的安全且有效的载体。
[0005]AAV颗粒的生产和纯化仍然是主要的挑战。此外，在纯化后，开发能够维持病毒感染性和物理稳定性的制剂对于确保向患者提供具有一致生物性能的高质量...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种药物组合物，所述药物组合物包含纯化的腺相关病毒(AAV)颗粒、缓冲剂、冷冻保护剂和非离子表面活性剂，其中(a)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(b)所述缓冲剂的浓度为约0mM至约50mM，(c)所述冷冻保护剂为约1％至约10％(w/v)，并且(d)所述非离子表面活性剂为约0.0001％(w/v)至约0.1％(w/v)。2.根据权利要求1所述的药物组合物，还包含药学上可接受的盐，其中所述药学上可接受的盐的浓度为：(a)约1mM至约200mM；(b)约10mM至约150mM；(c)约10mM；(d)约100mM；或者(e)约150mM。3.一种药物组合物，所述药物组合物包含纯化的AAV颗粒、药学上可接受的盐、缓冲剂、冷冻保护剂和非离子表面活性剂，其中(a)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(b)所述药学上可接受的盐的浓度为约1mM至约49mM，(c)所述缓冲剂的浓度为约0mM至约50mM，(d)所述冷冻保护剂为约1％至约10％(w/v)，并且(e)所述非离子表面活性剂为约0.0001％(w/v)至约0.1％(w/v)。4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的盐的浓度为：(a)约5mM至约45mM；(b)约7.5mM至约40mM；(c)约10mM至约30mM；或者(d)约10mM。5.根据权利要求2至4中任一项所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的盐选自由钠盐、镁盐、钙盐、钾盐、磷酸盐和硫酸盐组成的组，其中所述钠盐任选地包括氯化钠。6.根据权利要求1至5中任一项所述的药物组合物，其中所述缓冲剂包括Tris HCl或L
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组氨酸HCl。7.根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合物，其中所述缓冲剂的浓度包括约20mM。8.根据权利要求1至7中任一项所述的药物组合物，其中所述冷冻保护剂为：(a)约3％(w/v)至约8％(w/v)；(b)约4％(w/v)至约6％(w/v)；或者(c)约5％(w/v)。9.根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物，其中所述冷冻保护剂包括糖。10.根据权利要求9所述的药物组合物，其中所述糖包括：(a)蔗糖、海藻糖或它们的组合；或者(b)海藻糖。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的药物组合物，其中所述非离子表面活性剂为：(a)约0.0005％(w/v)至约0.005％(w/v)；(b)约0.00075％(w/v)至约0.0025％(w/v)；或者(c)约0.001％(w/v)。12.根据权利要求1至11中任一项所述的药物组合物，其中所述非离子表面活性剂选自由共聚物、聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯、磷脂、Brij表面活性剂和脱水山梨糖醇酯或它们的组合组成的组，其中所述聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯任选地选自由(PS
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20)和聚山梨酯80(PS
‑
80)或它们的组合组成的组；其中所述共聚物任选地包括泊洛沙姆；并且其中所述泊洛沙姆任选地(a)选自由泊洛沙姆188(P188)、泊洛沙姆237(P237)、泊洛沙姆338(P338)和泊洛沙姆407(P407)或它们的组合组成的组；或者(b)包括泊洛沙姆188(P188)。13.一种药物组合物，所述药物组合物包含纯化的AAV颗粒、缓冲剂、冷冻保护剂和非离子表面活性剂，其中(a)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(b)所述缓冲剂的浓度为约20mM，(c)所述冷冻保护剂为约5％(w/v)海藻糖，并且(d)所述非离子表面活性剂为约0.001％(w/v)泊洛沙姆188。14.一种药物组合物，所述药物组合物包含纯化的AAV颗粒、药学上可接受的盐、缓冲剂、冷冻保护剂和非离子表面活性剂，其中(a)(i)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(ii)所述药学上可接受的盐的浓度为约10mM氯化钠，(iii)所述缓冲剂的浓度为约20mM，(iv)所述冷冻保护剂为约5％(w/v)海藻糖，并且(v)所述非离子表面活性剂为约0.001％(w/v)泊洛沙姆188；(b)(i)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(ii)所述药学上可接受的盐的浓度为约25mM氯化钠，(iii)所述缓冲剂的浓度为约20mM，(iv)所述冷冻保护剂为约5％(w/v)海藻糖，并且(v)所述非离子表面活性剂为约0.001％(w/v)泊洛沙姆188；(c)(i)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(ii)所述药学上可接受的盐的浓度为约50mM氯化钠，(iii)所述缓冲剂的浓度为约20mM，(iv)所述冷冻保护剂为约5％(w/v)海藻糖，并且(v)所述非离子表面活性剂为约0.001％(w/v)泊洛沙姆188；(d)(i)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(ii)所述药学上可接受的盐的浓度为约100mM氯化钠，
(iii)所述缓冲剂的浓度为约20mM，(iv)所述冷冻保护剂为约5％(w/v)海藻糖，并且(v)所述非离子表面活性剂为约0.001％(w/v)泊洛沙姆188；(e)(i)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(ii)所述药学上可接受的盐的浓度为约125mM氯化钠，(iii)所述缓冲剂的浓度为约20mM，(iv)所述冷冻保护剂为约5％(w/v)海藻糖，并且(v)所述非离子表面活性剂为约0.001％(w/v)泊洛沙姆188；(f)(i)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(ii)所述药学上可接受的盐的浓度为约150mM氯化钠，(iii)所述缓冲剂的浓度为约20mM，(iv)所述冷冻保护剂为约5％(w/v)海藻糖，并且(v)所述非离子表面活性剂为约0.001％(w/v)泊洛沙姆188；或者(g)(i)所述纯化的AAV颗粒基本上不含杂质，(ii)所述药学上可接受的盐的浓度为约200mM氯化钠，(iii)所述缓冲剂的浓度为约20mM，(iv)所述冷冻保护剂为约5％(w/v)海藻糖，并且(v)所述非离子表面活性剂为约0.001％(w/v)泊洛沙姆188。15.根据权利要求13或14所述的药物组合物，其中所述缓冲剂包括Tris盐酸盐(HCl)或L
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组氨酸HCl。16.根据权利要求1至15中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物的pH为：(a)约4.0至约9.0；(b)约7.0至约8.0；(c)约7.3至约7.7；或者(d)约7.5。17.根据权利要求1至16中任一项所述的药物组合物，其中(a)所述AAV选自由AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9和AAV10组成的组，并且/或者(b)所述AAV包括重组AAV(rAAV)。18.根据权利要求1至17中任一项所述的药物组合物，其中所述纯化的AAV颗粒的滴度为：(a)约1
×
10
10
个病毒基因组/毫升(vg/mL)或更大；(b)约1
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10
11
个病毒基因组/毫升(vg/mL)或更大；(c)约1
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个病毒基因组/毫升(vg/mL)或更大；(d)约1
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个病毒基因组/毫升(vg/mL)或更大；(e)约1
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个病毒基因组/毫升(vg/mL)或更大；或者(f)约1
×
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15
个病毒基因组/毫升(vg/mL)或更大。19.根据权利要求1至18中任一项所述的药物组合物，其中所述杂质包括(a)工艺相关杂质，
其中所述工艺相关杂质任选地选自由残余宿主细胞组分、残余病毒生产组分、残余细胞培养组分、残余纯化组分或它们的组合组成的组，其中所述残余宿主细胞组分任选地包括宿主细胞蛋白、宿主细胞DNA、宿主细胞RNA或它们的组合，其中所述宿主细胞DNA任选地包括病毒外染色质相关DNA，其中所述残余病毒生产组分任选地包括质粒DNA、辅助病毒或它们的组合，其中所述残余细胞培养组分任选地包括抗生素、补充剂、诱导剂、生长因子或它们的组合，并且/或者其中所述残余纯化组分任选地包括缓冲剂、无机盐、酶、洗涤剂、培养基或它们的组合；(b)产物相关杂质，其中所述产物相关杂质包括空衣壳、聚集的AAV颗粒、...
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