一种新型的从微载体收获产物的方法技术

本发明专利技术涉及一种新型的从微载体收获产物的方法。具体地，本发明专利技术提供一种由细胞培养物中收获细胞产物的方法，包括步骤：采用具有100

【技术实现步骤摘要】
一种新型的从微载体收获产物的方法


[0001]本专利技术涉及生物反应器领域，具体涉及从微载体收获产物的方法。

技术介绍

[0002]微载体是指直径在60
‑
250μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。将微载体加入培养液中，通过持续搅动，可使得微载体始终保持悬浮状态。微载体培养是目前公认的最有发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点。目前微载体培养广泛用于培养各种类型细胞，如HEK 293细胞、成肌细胞、Vero细胞、CHO细胞等，进行疫苗和蛋白质产品的生产。
[0003]在微载体收获工艺中，在罐内原位裂解是一种直接便捷的收获方式，细胞原位裂解后，实现高效微载体与料液的分离，一直都是一个难题。细胞裂解后大量宿主蛋白和宿主DNA释放导致整体料液黏度增高，分离难度加大。部分病毒对剪切力和离心力敏感，且稳定性差，需要在短时间内完成料液的收获。传统工艺使用的方法主要有离心，自然沉降，过滤。离心是实验室规模最常用的分离方法，需要将料液从罐体中转移到罐外再进行离心操作，离心工艺操作繁琐，不利于工艺放大。自然沉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种由细胞培养物中收获细胞产物的方法，包括步骤：采用具有100
‑
1000目的滤网通过切向流模式对细胞培养物进行缓冲液交换，收获穿过所述滤网的含产物的换出液，所述细胞培养物含有用于所述细胞贴壁的微载体，所述细胞分泌所述产物或所述细胞经裂解以释放所述产物。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：(1)使用微载体培养细胞，获得含产物、细胞或细胞部分、以及微载体的细胞培养物，任选的(2)富集微载体，获得微载体浓缩液和第一收获液，(3)采用具有100
‑
1000目(优选200
‑
500目)的滤网通过切向流模式对步骤(1)获得的细胞培养物或步骤(2)获得的微载体浓缩液进行缓冲液交换，收获穿过所述滤网的含产物的换出液，即第二收获液，任选的(4)合并第一收获液和第二收获液，获得收获液。3.一种由细胞培养物中收获细胞的方法，包括步骤：采用具有100
‑
1000目的滤网通过切向流模式对细胞培养物进行缓冲液交换，收获穿过所述滤网的含细胞的换出液，所述细胞培养物含有用于所述细胞贴壁的微载体。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：(1)使用微载体培养细胞，获得含细胞以及微载体的细胞培养物，任选的(2)富集微载体，获得微载体浓缩液和第一收获液，(3)采用具有100
‑
1000目(优选200
‑
500目)的滤网通过切向流模式对步骤(1)获得的细胞培养物或步骤(2)获得的微载体浓缩液进行缓冲液交换，收获穿过所述滤网的含细胞的换出液，即第二收获液，任选的(4)合并第一收获液和第二收获液，获得收获液。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)包括：(1.1)在培养基中于微载体上在适合生产产物的条件下培养细胞，所述细胞分泌所述产物，从而获得所述细胞培养物，或(1.2)在培养基中于微载体上在适合生产产物的条件下培养细胞，裂解细胞，获得所述细胞培养物，优选地，细胞培养物中微载体的浓度为1
‑
20g/L。6.如权利要求1或3所述的方法，其特征在于，步骤(2)包括：采用具有100
‑
1000目(优选200
‑
500目)的滤网通过切向流模式进行微载体富集，获得微载体浓缩液和穿过所述滤网的含细胞或产物的换出液，即第一收获液，优选地，步骤(2)中，切向流模式的液体流速为0.1
‑
20L/min，和/或所述切向流是交替切向流，和/或微载体浓缩液中微载体的浓度约为2
‑
40g/L，和/或第一收获液与微载体浓缩液的体积比为0～20:1。7.如权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述方法具有选自以下的一个或多个特征：所述细胞是贴壁细胞；优选地，所述细胞是真核细胞，
所述产物是病毒或蛋白；优选地，所述病毒包括：单纯疱疹病毒、痘苗病毒、麻疹病毒、巨细胞病毒、水痘
‑
带状疱疹病毒、轮状病毒、肠病毒、肝炎病毒，腺...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宇骁，金优萍，王鹤霖，张明芳，顾晓旭，杨琳，许月英，孟益锋，胡秀华，蒋俊俊，
申请(专利权)人：杭州明德生物新技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：