高效核酸酶生产酵母工程菌的构建及应用制造技术

本文提供一种高效核酸酶生产酵母工程菌的构建及应用。具体地，本文提供一种源自灵杆菌核酸酶的变体核酸酶，其具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列。示氨基酸序列。

【技术实现步骤摘要】
高效核酸酶生产酵母工程菌的构建及应用


[0001]本专利技术涉及基因工程和蛋白质工程领域，具体地涉及一种高效核酸酶生产酵母工程菌的构建及应用。

技术介绍

[0002]随着生物医药的发展，重组蛋白在制药工业上运用越来越广泛，不仅能直接用于治疗，也是关键的生物试剂，是创新药研发的核心原料。利用微生物生产重组蛋白是一种经济、高效的方式，但在微生物生产重组蛋白的过程中仍然会存在很多难题。比如：在细胞内重组表达目的蛋白的过程中，核酸就是一类常见的杂质分子，它不仅能增加裂解液的粘度，影响下游的纯化层析；过量的核酸还将导致纯化产品的核酸污染，从生物制药的角度来说，一定长度的宿主DNA片段残留具有致癌的风险。所以在重组蛋白生产过程中，控制核酸的含量至关重要。
[0003]来源于灵杆菌的商品化核酸酶(例如Benzonase核酸酶)由于具有较高的催化效率，是生物化学和药物制剂领域重要的核酸污染控制用酶。目前，核酸酶的重组表达多在原核系统中进行，然而核酸酶的细胞内重组表达往往存在对宿主细胞的高毒性，从而导致宿主很难生长或者以无活性的包涵体形式表达。有研究(例本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种源自灵杆菌核酸酶的变体核酸酶，其具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列。2.编码如权利要求1所述的变体核酸酶的多核苷酸。3.一种酵母表达载体，其含有如权利要求2所述的多核苷酸。4.如权利要求3所述的酵母表达载体，其含有α
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因子信号肽编码序列。5.一种宿主细胞，其选自：(a)染色体中整合有如权利要求2所述的多核苷酸的细胞；和(b)含有如权利要求3所述的酵母表达载体的细胞。6.一种酵母工程菌，其包含如权利要求2所述的多核苷酸；更具体地，所述酵母工程菌表达并分泌如权利要求1所述的变体核酸酶。7.一种构建酵母工程菌的方法，其包括：将如...

【专利技术属性】
技术研发人员：李兆鹏，吴丹，郑倩，
申请(专利权)人：杭州明德生物新技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：