一种脊髓类器官的培养方法和培养基技术

本发明专利技术公开了一种脊髓类器官的培养方法和培养基。本发明专利技术基于基质胶

【技术实现步骤摘要】
一种脊髓类器官的培养方法和培养基


[0001]本专利技术涉及类器官培养
，尤其涉及一种脊髓类器官的培养方法和培养基。

技术介绍

[0002]类器官的构建对生物医药的发展具有重要的推动作用，其可以作为药物药效检验、毒性试验的有效手段，同时也对发育生物学、疾病的病理研究，尤其是对再生医学领域具有建设性的意义。
[0003]自2013年，Lancaster M.A.团队构建出脑类器官三维有机培养系统[1]后，大量的研究团队致力于构建特定区域的中枢神经系统类器官，例如脊髓类器官。2018年，Shi
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YanNg团队以Matrigel结合生长因子为培养基质，采用患者诱导多能干细胞构建脊髓微器官，用以研究脊髓性肌萎缩中运动神经元损伤的病理机制[2,3]，但没有对神经系统创伤类疾病的干预研究。2020年，Sergiu P.Pasxca研究团队构建了类大脑皮层、后脑/脊髓和骨骼肌的3D培养组装体形成神经回路，能够在体外长期模拟皮层对肌肉收缩的控制[4]，然而该类器官组合物无法重现特异的脊髓组织形态和发育过程，不适用于脊髓相关疾病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脊髓类器官的培养基，其特征在于，包括：培养基1：含有BMP信号通路抑制剂、WNT信号通路激活剂和L
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抗坏血酸AA；培养基2：含有BMP信号通路抑制剂、WNT信号通路激活剂、L
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抗坏血酸AA和维甲酸RA；培养基3：含有L
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抗坏血酸AA、维甲酸RA和Purmorphamine；培养基4：含有L
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抗坏血酸AA、维甲酸RA和Purmorphamine；培养基5：含有L
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抗坏血酸AA、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和脑源性神经营养因子(BDNF)；其中，所述培养基3中的维甲酸RA的浓度低于培养基4，所述培养基3中的Purmorphamine的浓度高于培养基4。2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，包括：培养基1：含有DMEM/F
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12培养基、Neurobasal培养基、N2添加剂(N2Supplement)、B27添加剂(B27 Supplement)、GlutaMAX、BMP信号通路抑制剂、WNT信号通路激活剂和L
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抗坏血酸AA；培养基2：含有DMEM/F
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12培养基、Neurobasal培养基、N2添加剂(N2Supplement)、B27添加剂(B27 Supplement)、GlutaMAX、BMP信号通路抑制剂、WNT信号通路激活剂、L
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抗坏血酸AA和维甲酸RA；培养基3：DMEM/F
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12培养基、Neurobasal培养基、N2添加剂(N2Supplement)、B27添加剂(B27 Supplement)、GlutaMAX、L
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抗坏血酸AA、维甲酸RA和Purmorphamine；培养基4：含有DMEM/F
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12培养基、Neurobasal培养基、N2添加剂(N2Supplement)、B27添加剂(B27 Supplement)、GlutaMAX、L
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抗坏血酸AA、维甲酸RA和Purmorphamine；培养基5：DMEM/F
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12培养基、Neurobasal培养基、N2添加剂(N2Supplement)、B27添加剂(B27 Supplement)、GlutaMAX、L
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抗坏血酸AA、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和脑源性神经营养因子(BDNF)；优选地，所述BMP信号通路抑制剂为LDN
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193189；优选地，所述WNT信号通路激活剂为CHIR99021。3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述培养基1
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5中，所述DMEM/F
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12培养基和Neurobasal培养基的体积比为1：1；优选地，所述培养基1或培养基2中，LDN
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193189的浓度为0.5～5μM；优选地，所述培养基1或培养基2中，所述CHIR99021的浓度为1～5μM；优选地...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱融融，朱颜菁，黄蕊奇，
申请(专利权)人：同济大学，
类型：发明
国别省市：