【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】表达C825的免疫细胞及其诊断用途
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求2020年6月29日提交的美国临时专利申请号63/045,641的权益和优先权，将其内容通过引用以其整体并入本文。
[0002]本专利技术技术总体上涉及包括表达靶向肿瘤抗原的嵌合抗原受体以及抗DOTA C825抗原结合片段的工程化免疫细胞的组合物。本文还公开了用于确定本文公开的组合物的体内生物分布、活力和扩增的方法。政府支持声明
[0003]本专利技术是在由美国国立卫生研究院/美国国家癌症研究所授予的CA55349和CA23766下在美国政府支持下完成的。政府拥有本专利技术中的某些权利。
技术介绍
[0004]下文提供对本专利技术技术背景的说明仅仅是为了帮助理解本专利技术技术，并且不承认所述说明描述或构成针对本专利技术技术的现有技术。
[0005]嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法将T细胞重定向，以在抗原表达细胞的存在下激活并随后杀死抗原表达细胞。这通过将抗原特异性单链可变片段(scFv)与内源性T细胞激活信号传导结构域偶联实现。CAR T细胞增强免疫细胞识别并破坏单独的癌细胞的能力。
[0006]CAR T细胞疗法对于血液和淋巴结的肿瘤(即白血病和淋巴瘤)曾经尤其有效。然而，许多肿瘤对CAR T细胞疗法的反应不好，尤其是结肠、肺和乳房的实体瘤。D
’
Aloia等人,Cell Death&Disease 9,282(2018)；Singh等人,Semin Cancer ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种工程化免疫细胞，所述工程化免疫细胞包含：(a)包含SEQ ID NO:35
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39、41或42中任一个的氨基酸序列的抗DOTA C825抗原结合片段和/或编码所述抗DOTA C825抗原结合片段的核酸；以及(b)与靶抗原结合的受体和/或编码所述受体的核酸。2.根据权利要求1所述的工程化免疫细胞，其中所述受体是T细胞受体。3.根据权利要求1或2所述的工程化免疫细胞，其中所述受体是天然细胞受体。4.根据权利要求1或2所述的工程化免疫细胞，其中所述受体是非天然细胞受体。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述受体是嵌合抗原受体。6.根据权利要求5所述的工程化免疫细胞，其中所述编码所述抗DOTA C825抗原结合片段的核酸包含用于所述抗DOTA C825抗原结合片段的分泌的前导序列。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述编码所述抗DOTA C825抗原结合片段的核酸与启动子可操作地连接。8.根据权利要求7所述的工程化免疫细胞，其中所述启动子是组成型启动子。9.根据权利要求7所述的工程化免疫细胞，其中所述启动子是条件性启动子。10.根据权利要求9所述的工程化免疫细胞，其中所述条件性启动子由所述受体与所述靶抗原的结合诱导。11.根据权利要求1
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10中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述靶抗原是肿瘤抗原。12.根据权利要求1
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11中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述编码所述受体的核酸与组成型启动子可操作地连接。13.根据权利要求5
‑
12中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述嵌合抗原受体包含(i)细胞外抗原结合结构域；(ii)跨膜结构域；以及(iii)细胞内结构域。14.根据权利要求13所述的工程化免疫细胞，其中所述细胞外抗原结合结构域与所述靶抗原结合。15.根据权利要求11
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14中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述肿瘤抗原选自5T4、α5β1
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整合素、707
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AP、A33、AFP、ART
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4、B7H4、BAGE、Bcl
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2、β
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连环素、BCMA、Bcr
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abl、MN/C IX抗体、CA125、CA19
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9、CAMEL、CAP
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1、CASP
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8、CD4、CD5、CD19、CD20、CD21、CD22、CD25、CDC27/m、CD33、CD37、CD45、CD52、CD56、CD80、CD123、CDK4/m、CEA、c
‑
Met、CS
‑
1、CT、Cyp
‑
B、细胞周期蛋白B1、DAGE、DAM、EBNA、EGFR、ErbB3、ELF2M、EMMPRIN、EpCam、肝配蛋白B2、雌激素受体、ETV6
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AML1、FAP、铁蛋白、叶酸结合蛋白、GAGE、G250、GD
‑
2、GM2、GnT
‑
V、gp75、gp100(Pmel 17)、HAGE、HER
‑
2/neu、HLA
‑
A*0201
‑
R170I、HPV E6、HPV E7、Ki
‑
67、HSP70
‑
2M、HST
‑
2、hTERT(或hTRT)、iCE、IGF
‑
1R、IL
‑
2R、IL
‑
5、KIAA0205、LAGE、LDLR/FUT、LRP、MAGE、MART、MART
‑
1/黑色素A、MART
‑
2/Ski、MC1R、间皮素、MUC、MUC16、MUM
‑1‑
B、myc、MUM
‑
2、MUM
‑
3、NA88
‑
A、NYESO
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1、NY
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Eso
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B、p53、蛋白酶
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3、p190小bcr
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abl、Pml/RARα、PRAME、孕酮受体、PSA、PSCA、PSM、PSMA、ras、RAGE、RU1或RU2、RORI、SART
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1或SART
‑
3、存活蛋白、TEL/AML1、TGFβ、TPI/m、TRP
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1、TRP
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2、TRP
‑
2/INT2、生腱蛋白、TSTA酪氨酸酶、VEGF和WT1。16.根据权利要求13
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15中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述细胞外抗原结合结构域包含单链可变片段(scFv)。17.根据权利要求13
‑
16中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述细胞外抗原结合结构域包含人scFv。
18.根据权利要求13
‑
17中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述细胞外抗原结合结构域包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的CD19 scFv。19.根据权利要求13
‑
18中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述细胞外抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的CD19 scFv。20.根据权利要求13
‑
19中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述细胞外抗原结合结构域包含与所述细胞外抗原结合结构域的N端共价连接的信号肽。21.根据权利要求13
‑
20中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述跨膜结构域包含CD8跨膜结构域。22.根据权利要求13
‑
21中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述细胞内结构域包含一个或多个共刺激结构域。23.根据权利要求22所述的工程化免疫细胞，其中所述一个或多个共刺激结构域选自CD28共刺激结构域、CD3ζ链、4
‑
1BBL共刺激结构域或其任何组合。24.根据权利要求1
‑
23中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述工程化免疫细胞是淋巴细胞。25.根据权利要求24所述的工程化免疫细胞，其中所述淋巴细胞是T细胞、B细胞或自然杀伤(NK)细胞。26.根据权利要求25所述的工程化免疫细胞，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。27.根据权利要求1
‑
26中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述工程化免疫细胞是肿瘤浸润淋巴细胞。28.根据权利要求1
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27中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述工程化免疫细胞源自自体供体或同种异体供体。29.一种多肽，所述多肽包含嵌合抗原受体以及包含SEQ ID NO:35
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39、41或42中任一个的氨基酸序列的抗DOTA C825抗原结合片段。30.根据权利要求29所述的多肽，所述多肽还包含位于所述抗DOTA C825抗原结合片段与所述嵌合抗原受体之间的自切割肽。31.根据权利要求30所述的多肽，其中所述自切割肽是P2A自切割肽。32.根据权利要求29
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31中任一项所述的多肽，其中所述抗DOTA C825抗原结合片段包含用于所述抗DOTA C825抗原结合片段的分泌的前导序列。33.根据权利要求29
‑
32中任一项所述的多肽，其中所述嵌合抗原受体包含(i)细胞外抗原结合结构域；(ii)跨膜结构域；以及(iii)细胞内结构域。34.根据权利要求33所述的多肽，其中所述细胞外抗原结合结构域与肿瘤抗原结合。35.根据权利要求34所述的多肽，其中所述肿瘤抗原选自MUC16、间皮素、CD19、WT1、PSCA和BCMA。36.根据权利要求33
‑
35中任一项所述的多肽，其中所述细胞外抗原结合结构域包含单链可变片段(scFv)。37.根据权利要求33
‑
36中任一项所述的多肽，其中所述细胞外抗原结合结构域包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的CD19 scFv。
38.根据权利要求33
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37中任一项所述的多肽，其中所述细胞外抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的CD19 scFv。39.根据权利要求33
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38中任一项所述的多肽，其中所述跨膜结构域包含CD8跨膜结构域。40.根据权利要求33
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39中任一项所述的多肽，其中所述细胞内结构域包含一个或多个共刺激结构域。41.根据权利要求40所述的多肽，其中所述一个或多个共刺激结构域选自CD28共刺激结构域、CD3ζ链、4
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1BBL共刺激结构域或其任何组合。42.一种编码根据权利要求29
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41中任一项所述的多肽的核酸。43.根据权利要求42所述的核酸，其中所述编码所述多肽的核酸与启动子可操作地连接。44.根据权利要求43所述的核酸，其中所述启动子是组成型启动子。45.根据权利要求43所述的核酸，其中所述启动子是条件性启动子。46.根据权利要求45所述的核酸，其中所述条件性启动子是由所述嵌合抗原受体与抗原结合可诱导的。47.一种载体，所述载体包含根据权利要求42
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46中任一项所述的核酸。48.根据权利要求47所述的载体，其中所述载体是病毒载体或质粒。49.根据权利要求47所述的载体，其中所述载体是逆转录病毒载体。50.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含根据权利要求42
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46中任一项所述的核酸或根据权利要求47
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49中任一项所述的载体。51.一种包含根据权利要求1
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28中任一项所述的工程化免疫细胞和DOTA半抗原的复合物，其中所述工程化免疫细胞被配置为与所述DOTA半抗原和肿瘤抗原结合。52.根据权利要求51所述的复合物，其中所述DOTA半抗原是苄基
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DOTA、NH2
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苄基(Bn)DOTA、DOTA
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去铁胺、DOTA
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Phe
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Lys(HSG)
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D
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Tyr
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Lys(HSG)
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NH2、Ac
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Lys(HS G)D
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Tyr
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Lys(HSG)
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Lys(Tscg
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Cys)
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NH2、DOTA
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D
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Asp
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D
‑
Lys(HSG)
‑
D
‑
Asp
‑
D
‑
Lys(HSG)
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NH2、DOTA
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D
‑
Glu
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D
‑
Lys(HSG)
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D
‑
Glu
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D
‑
Lys(HSG)
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NH2、DOTA
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D
‑
Tyr
‑
D
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Lys(HSG)
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D
‑
Glu
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D
‑
Lys(HSG)
‑
NH2、DOTA
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Ala
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D
‑
Lys(HSG)
‑
D
‑
Glu
‑
D
‑
Lys(HSG)
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NH2、DOTA
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D
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Ph e
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D
‑
Lys(HSG)
‑
D
‑
Tyr
‑
D
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Lys(HSG)
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NH2、Ac
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D
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Phe
‑
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Lys(DOTA)
‑
D
‑
Tyr
‑
D
‑
Lys(DOTA)
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NH2、Ac
‑
D
‑
Phe
‑
D
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D
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Tyr
‑
D
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Lys(DTPA)
‑
NH2、Ac
‑
D
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Phe
‑
D
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Lys(Bz
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DTPA)
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Tyr
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D
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Lys(Bz
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DTPA)
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NH2、Ac
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Tyr
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‑
Lys(HSG)
‑
D
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Lys(Tscg
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Cys)
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NH2、DOTA
‑
D
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Phe
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Lys(HSG)
‑
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Tyr
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Lys(HSG)
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Lys(Tscg
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Cys)
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NH2、(Ts...
【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：纪念斯隆凯特琳癌症中心，
类型：发明
国别省市：
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