一种单胺氧化酶及波普瑞韦双环脯氨酸片段的制备方法技术

本发明专利技术的一种单胺氧化酶及波普瑞韦双环脯氨酸片段的制备方法，通过对单胺氧化酶序列进行突变，改变酶分子局部区域氨基酸残基之间、酶与环境之间的相互作用，获得了具有更高转化效率的单胺氧化酶工程菌，利用单胺氧化酶和过氧化氢酶的协同增效作用，降低底物残留，实现工业化生产。在制备工艺中用焦亚硫酸钠与底物一同流加的方式加入反应体系，降低底物对酶活性的影响，提高酶的转化率。提高酶的转化率。提高酶的转化率。

【技术实现步骤摘要】
一种单胺氧化酶及波普瑞韦双环脯氨酸片段的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物酶催化领域，具体地说涉及一种单胺氧化酶及波普瑞韦双环脯氨酸片段的制备方法。

技术介绍

[0002]波普瑞韦中文名称是：(1R,2S,5S)
‑
N
‑
(4
‑
氨基
‑1‑
环丁基
‑
3,4
‑
二氧代丁烷
‑2‑
基)
‑3‑
[(2S)
‑2‑
(叔丁基氨基甲酰氨基)
‑
3,3
‑
二甲基丁酰基]‑
6,6
‑
二甲基
‑3‑
氮杂双环[3.1.0]己烷
‑2‑
甲酰胺，6,6
‑
二甲基
‑3‑
氮杂双环[3.1.0]己烷衍生物是合成波普瑞韦重要的中间体。波普瑞韦可以对酮酰胺氨基酸残基进行截断和修饰，极大程度地抑制了丙型肝炎病毒RNA的复制，不仅提高了治愈率还缩短了治疗时间，其效果优于聚乙二醇干本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种单胺氧化酶，其特征在于：基于SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，在第65位、第120位、第147位、第176位、第213位、第252位、第317位中的至少一个位点进行突变。2.根据权利要求1所述的一种单胺氧化酶，其特征在于：所述突变位点的氨基酸突变类型包括：T65G或T65V；N120D；E147A；Y176H、Y176S或Y176A；L213F或L213M；D252T、D252G、D252S或D252A；Q317H、Q317C或Q317W。3.根据权利要求2所述的一种单胺氧化酶，其特征在于：所述单胺氧化酶具有如SEQ ID No.2
‑
19所示的任意一条氨基酸序列。4.编码如权利要求3所述单胺氧化酶的核苷酸序列。5.一种重组表达载体，包含如权利要求4所示的核苷酸序列。6.单胺氧化酶工程菌，具有如权利要求5所述的重组表达载体。7.一种转化酶液，分别将过氧化氢酶工程菌和权利要求6所述的单胺氧化酶工程菌经发酵培养、细胞破碎、絮凝处理后，收集上清液按比例混合获得所述转化酶液。8.根据权利要求7所述的一种转化酶液，其特征在于：所述过氧化氢酶工程菌包含SEQ ID No.20所示的氨基酸序列。9.一种生物催化...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞丽燕，张利坤，杨卫华，严燕兵，汤必成，卢燕飞，吴怀春，倪建洲，葛文强，钱敏帆，孙超，华超，吴自成，胡钦，佘宇帆，王云，李淦如，李淼玉，谈聪，
申请(专利权)人：长兴制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：