一种利用阿魏酸脱羧酶高效催化肉桂酸合成苯乙烯的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用阿魏酸脱羧酶高效催化肉桂酸合成苯乙烯的方法，属于蛋白质与酶工程技术领域。通过构建阿魏酸脱羧酶Fdc以及其辅因子prFMN高效供给的大肠杆菌工程菌株，以菌株粗酶液为全细胞催化剂，在15min条件下，仅转化Fdc的菌株粗酶液测得肉桂酸的转化效率为6％；而辅因子高效供给菌株粗酶液肉桂酸转化效率为43％，相比提升了7倍，在酶量加倍且30min条件下，底物转化效率可达100％。本发明专利技术所构建的prFMN辅因子高效供给的阿魏酸脱羧酶Fdc菌株，在苯乙烯生物合成领域具有显著的应用前景。用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种利用阿魏酸脱羧酶高效催化肉桂酸合成苯乙烯的方法


[0001]本专利技术属于蛋白质与酶工程
，具体涉及一种利用阿魏酸脱羧酶高效催化肉桂酸合成苯乙烯的方法。

技术介绍

[0002]阿魏酸脱羧酶(Ferulic acid decarboxylase,Fdc)是近期发现的一种异戊二烯化黄素单核苷酸(prenylated Flavin MonoNucleotide,prFMN)依赖性脱羧酶，其中亚胺形式prFMNiminium为广泛被承认的活性形式。阿魏酸脱羧酶主要存在于真菌次级代谢途径，催化阿魏酸脱羧形成4
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乙烯愈创木酚。目前研究的阿魏酸脱羧酶主要有两个来源，分别是来自于黑曲霉的Aspergillus niger(AnFdc)和来自酿酒酵母的Saccharomyces cerevisae(ScFdc)。近年发现该酶可催化(芳香族)丙烯酸衍生物脱羧及可逆羧化过程，包括芳香族烯烃、脂肪族烯烃等近四十种底物羧化，具有较为广泛的底物谱，且Fdc辅因子prFMN在反应过程中不涉及氧化还原态变化及还原力再生，符合当下绿色生物制造的倡导本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一组重组质粒，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的一组重组质粒，其特征在于，为质粒A和质粒B，所述质粒A包括SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，所述质粒B包括SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。3.根据权利要求1所述的一组重组质粒，其特征在于，所述SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为阿魏酸脱羧ScFdc基因，所述SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列为异戊烯基转移酶UbiX基因。4.根据权利要求1所述的一组重组质粒，其特征在于，所述SEQ ID N...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯延宾，李鸿飞，朱小妮，薛松，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：