一株枯草芽孢杆菌及其应用和产品制造技术

本发明专利技术公开了一株枯草芽孢杆菌及其应用和产品，涉及微生物技术领域。本发明专利技术的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis B

【技术实现步骤摘要】
一株枯草芽孢杆菌及其应用和产品


[0001]本专利技术涉及微生物
，尤其涉及一株枯草芽孢杆菌及其应用和产品。

技术介绍

[0002]副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)广泛存在于海水和海产品中,是我国沿海地区常见的食物中毒病原菌，已知副溶血性弧菌有12种O抗原及59 种K抗原，据其发酵糖类的情况可分为5个类型，各种弧菌对人和动物均有较强的毒力，其致病物质主要有分子量42000的致热性溶血素(TDH)和分子量48000的TDH类似溶血毒(TRH)，具有溶血活性、肠毒素和致死作用。
[0003]副溶血性弧菌不仅会对虾、鱼类、贝类和其他甲壳类等海水养殖生物造成危害，而且人类进食了这些含有副溶血性弧菌的食物会导致副溶血性弧菌食物中毒，副溶血性弧菌食物中毒临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状，主要病理变化为空肠及回肠有轻度糜烂，胃粘膜炎、内脏(肝、脾、肺)淤血等，因此，抑制副溶血弧菌的活性对水产动物和人体具有重要意义。
[0004]目前，副溶血性弧菌的防治一般采用细菌素和消毒剂等化学类药物治疗，但药物残留和抗药性易造成环境污染，给人类带来危害。随着微生态制剂的发展，微生态制剂因其具有绿色环保、无毒副作用、无残留污染等优点，使其成为细菌素和消毒剂最有潜力的替代品。微生态制剂(Probioties)，也叫活菌制剂 (Bigone)或生菌剂，是指运用微生态学原理，利用对宿主有益无害的益生菌或益生菌的促生长物质，经特殊工艺制成的制剂，微生态制剂能够促进正常微生物群生长繁殖和抑制致病菌生长繁殖，目前微生态制剂己被应用于饲料、农业、医药保健和食品等各领域中。芽孢杆菌类细菌具有抗逆性好，生长迅速，适应能力强大能够产生丰富多样的抗菌物质等优点，是一种理想的用于抑制副溶血性弧菌的微生态制剂，但是现有公开的芽孢杆菌类细菌对副溶血性弧菌的抑菌率较低，而且耐高温性能较差，经过高温处理后容易失活，导致抗菌活性大大下降。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提出一株枯草芽孢杆菌，该菌为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis B
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1158，已于2021年12月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏单位地址：中国广州，保藏编号为GDMCC No.62165，本专利技术的枯草芽孢杆菌对副溶血弧菌具有优异的抑菌活性且具有耐高温的特点，能够解决现有芽孢杆菌类细菌对副溶血性弧菌的抑菌率低和耐高温性能较差的问题。
[0006]本专利技术的另一目的在于提出一种水产用抑菌产品，能有效抑制副溶血性弧菌和多种水产养殖治病菌。
[0007]本专利技术的又一目的在于提出一种水产用净水产品，能够有效降解养殖水体的有机质，从而达到净化水体的效果。
[0008]本专利技术的再一目的在于提出一种水产用护肝保健产品，通过复配菌粉、复合中药、
年12月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCCNo.62165。
[0025]具体来说，本技术方案中的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis B
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1158(简称 BSW)分离于虾塘池底淤泥中，该菌株16S rDNA序列全长共1390bp，将BSW 样品16 S rDNA序列在NCBI(https://b last.ncbi.nlm.nih.gov)上比对发现：BSW 样品与Bacillus subtilis的同源性达到99.86％，结合其菌落形态(如图1所示) 鉴定该菌株为Bacillus subtilis，并命名为Bacillus subtilis B
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1158，已于2021年 12月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(简称：GDMCC，地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮政编码：510070)，保藏编号为GDMCC No.62165。
[0026]值得说明的是，本技术方案中的枯草芽孢杆菌具有抑菌活性，能够抑制副溶血弧菌、霍乱弧菌、迟钝爱德华氏菌、温和气单胞菌以及嗜水气单胞菌，其中，本技术方案的枯草芽孢杆菌对副溶血弧菌具有优异的抑菌活性，而且，本方案的枯草芽孢杆菌的抑菌能力具有耐高温的特点，BSW的发酵液经过80℃高温处理后，抑菌活性能保持90％左右，经过100℃的高温处理后，抑菌活性依然能保持70％左右，基于BSW在饲料或饲料添加剂范畴内的使用，可能会涉及高温制粒的生产工艺，BSW抑菌活性的耐高温特性，使其比其他菌株更适合高温制粒，使用范围更广。同时，由于BSW是从虾塘池底淤泥中分离出来的细菌，属于虾塘养殖环境中的土著细菌，对养殖生态的适应性更强，使得BSW及含有BSW的的产品，能够适应养殖水体的复杂环境，起效更快。由此可见，采用本技术方案的枯草芽孢杆菌制成抑菌产品，用于水产养殖行业，能有效抑制副溶血弧菌的生长繁殖，避免副溶血弧菌对虾、鱼类、贝类和其他甲壳类等海水养殖生物造成危害，从而能保护海水养殖生物和人体的安全。
[0027]具体来说，本技术方案的枯草芽孢杆菌在一定的条件下可以形成芽孢，芽孢具有较强的抗逆性，能耐受较高温度，芽孢率高的菌株能够提高菌粉干燥过程中的细菌存活率，本技术方案的枯草芽孢杆菌的芽孢率在90％以上，从而使得BSW具有耐高温的特点。
[0028]值得指出的是，本技术方案的枯草芽孢杆菌的分离方法包括以下步骤：
[0029](1)从虾塘池底淤泥中取出适量样品，经过梯度稀释以后，分别涂布在 NA固体培养基和MRS培养基上，其中，NA培养基置于37℃中培养，MRS培养基置于厌氧袋中37℃培养，培养16～18小时后，根据菌落形态进行分离并得到候选菌株。
[0030](2)将候选菌株用NA液体培养基培养24小时后，取上清液进行抑菌圈检测(以副溶血弧菌为指示菌)，抑菌圈直径最大的候选菌株即为枯草芽孢杆菌。
[0031]进一步的说明，枯草芽孢杆菌在制备抑制副溶血性弧菌的产品中的应用。
[0032]通过在抑制副溶血性弧菌的产品加入枯草芽孢杆菌(可以是活菌或干燥后的菌粉)，能够有效抑制副溶血性弧菌，避免副溶血性弧菌危害海水养殖生物和人体的健康，本技术方案中抑制副溶血性弧菌的产品可以是抑菌剂、微生态制剂、饲料或者是饲料添加剂等等。
[0033]一种水产用抑菌产品，含有上述的枯草芽孢杆菌。
[0034]值得说明的是，本技术方案的枯草芽孢杆菌能够抑制副溶血弧菌、霍乱弧菌、迟钝爱德华氏菌、温和气单胞菌以及嗜水气单胞菌等水产致病菌的生长与繁殖，和降解养殖水体中的有机质；提高水产养殖动物的免疫力。通过在水产用抑菌产品中添加枯草芽孢杆菌能够有效抑制副溶血弧菌和其他水产致病菌的活性，从而能确保水产养殖动物健康生长，达到提高水产养殖动物的产量和保护人体健康的效果。
[0035]进一步的说明，水产用抑菌产品的制备方法如下：将枯草芽孢杆菌和培养基配制成扩培包，得到水产用抑菌产品。
[0036]具体来说，水产用抑菌产品的制备方法如下：将适量的培养基和BSW菌粉 (干燥后得到)配制成扩培包，即得本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株枯草芽孢杆菌，其特征在于，该菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B
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1158，已于2021年12月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.62165。2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌在制备抑制副溶血性弧菌的产品中的应用。3.一种水产用抑菌产品，其特征在于，含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌。4.根据权利要求3所述的水产用抑菌产品，其特征在于，所述水产用抑菌产品的制备方法如下：将枯草芽孢杆菌和培养基配制成扩培包，得到水产用抑菌产品。5.一种水产用净水产品，其特征在于，按质量份数，所述水产用净水产品包括枯草芽孢杆菌15～25份、乳酸菌15～25份、地衣芽...

【专利技术属性】
技术研发人员：周俊超，代珍青，曾文年，李伟，闫凯，
申请(专利权)人：广东海纳川生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：