包含新型共刺激结构域的嵌合抗原受体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种嵌合抗原受体，其包含配体结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和胞内信号传导结构域，其中所述共刺激结构域包含NK激活性受体或其配体的胞内区。本发明专利技术还涉及包含此类嵌合抗原受体的工程化免疫细胞及其在治疗疾病，例如癌症、自身免疫性疾病、感染中的用途。用途。用途。

【技术实现步骤摘要】
包含新型共刺激结构域的嵌合抗原受体及其用途


[0001]本专利技术属于免疫治疗领域。更具体地，本专利技术涉及包含新型共刺激结构域的嵌合抗原受体，以及包含此类嵌合抗原受体的工程化免疫细胞及其用途。

技术介绍

[0002]近几年，癌症免疫治疗技术发展迅速，尤其是嵌合抗原受体T细胞(CAR
‑
T)相关的免疫疗法在血液瘤的治疗上获得了优异的临床效果。CAR
‑
T细胞免疫疗法是将T细胞在体外进行基因改造，使其能够识别肿瘤抗原，在扩增到一定数量后回输至病人体内，进行癌细胞杀伤，从而达到治疗肿瘤的目的。
[0003]目前，随着技术的发展，已经出现了四代不同的CAR结构。第一代CAR的胞内信号传导结构域仅包含初级信号传导结构域，例如CD3ζ，因此携带CAR的细胞(例如CAR
‑
T细胞)活性差，体内存活时间短。第二代CAR引入了共刺激结构域，例如CD28或4
‑
1BB，使得细胞能够持续增殖，增强抗肿瘤活性。第三代CAR则包含两个共刺激结构域(例如CD28+4
‑
1BB)，第四代CAR则加入了细胞因子或共刺激配体以进一步增强T细胞应答，或加入自杀基因以在需要时使CAR
‑
T细胞自我毁灭。现在临床研究中大多使用的仍然是第二代CAR结构。
[0004]然而，CAR
‑
T细胞疗法在临床应用中仍然存在一些问题，例如在血液瘤治疗中存在大量肿瘤复发现象，在实体瘤治疗中应答率不高等等，这些可能是由复杂的肿瘤微环境、CAR
‑
T细胞耗竭等因素造成。
[0005]因此，仍然需要对现有的CART细胞疗法进行改进，以促进CAR
‑
T细胞在体内的增殖，抵抗肿瘤微环境的免疫抑制作用，进而提高CAR
‑
T细胞疗法对肿瘤的整体治疗效果。

技术实现思路

[0006]因此，在第一个方面，本专利技术提供一种嵌合抗原受体，其包含配体结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和胞内信号传导结构域，其中所述共刺激结构域包含NK激活性受体或其配体的胞内区。
[0007]在一个实施方案中，所述NK激活性受体选自2B4、DNAM
‑
1和LFA
‑
1，更优选2B4。
[0008]在一个实施方案中，所述NK激活性受体的配体选自CD48、CD112、CD155、ICAM1、ICAM2或ICAM3，更优选CD155和ICAM
‑
3。
[0009]在一个优选实施方案中，本专利技术的嵌合抗原受体包含的共刺激结构域包含选自以下蛋白的胞内区：CD155、ICAM3和2B4。在一个实施方案中，所述CD155胞内区与SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列具有至少90％、95％、97％或99％或100％的序列同一性；ICAM3胞内区与SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列具有至少90％、95％、97％或99％或100％的序列同一性；2B4胞内区与SEQ ID NO:31所示的氨基酸序列具有至少90％、95％、97％或99％或100％的序列同一性。
[0010]在一个实施方案中，所述共刺激结构域进一步包含选自以下蛋白的信号传导结构域：TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、CARD11、CD2、CD7、CD8、、
CD27、CD28、CD30、CD40、CD83、CD134(OX40)、CD137(4
‑
1BB)、CD270(HVEM)、CD272(BTLA)、CD276(B7
‑
H3)、CD278(ICOS)、CD357(GITR)、DAP10、DAP12、LAT、NKG2C、SLP76、PD
‑
1、LIGHT、TRIM、CD94、LTB、ZAP70以及它们的组合。优选地，所述共刺激结构域进一步包含CD27、CD28、CD134、CD137或CD278的信号传导结构域或它们的组合，更优选进一步包含CD28和/或CD137的信号传导结构域。
[0011]在一个实施方案中，所述配体结合结构域是抗体或其抗原结合部分。
[0012]在一个实施方案中，所述配体结合结构域选自免疫球蛋白分子、Fab、Fab
’
、F(ab
’
)2、Fv片段、scFv抗体片段、重链抗体、线性抗体、sdAb或纳米抗体。
[0013]在一个实施方案中，所述配体结合结构域与选自以下的一个或多个靶标结合：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD14、CD15、CD46、CD70、TSHR、CD19、CD123、CD22、BAFF
‑
R、CD30、CD171、CS
‑
1、CLL
‑
1、CD33、EGFRvIII、GD2、GD3、BCMA、GPRC5D、Tn Ag、PSMA、ROR1、FLT3、FAP、TAG72、CD38、CD44v6、CEA、EPCAM、B7H3、KIT、IL
‑
13Ra2、间皮素、IL
‑
l lRa、PSCA、PRSS21、VEGFR2、LewisY、CD24、PDGFR
‑
β、SSEA
‑
4、CD20、AFP、Folate受体α、ERBB2(Her2/neu)、MUC1、EGFR、CS1、CD138、NCAM、Claudin18.2、Prostase、PAP、ELF2M、Ephrin B2、IGF
‑
I受体、CAIX、LMP2、gploo、bcr
‑
abl、酪氨酸酶、EphA2、Fucosyl GMl、sLe、GM3、TGS5、HMWMAA、o
‑
乙酰基
‑
GD2、Folate受体β、TEM1/CD248、TEM7R、CLDN6、GPRC5D、CXORF61、CD97、CD179a、ALK、多聚唾液酸、PLAC1、GloboH、NY
‑
BR
‑
1、UPK2、HAVCR1、ADRB3、PANX3、GPR20、LY6K、OR51E2、TARP、WT1、NY
‑
ESO
‑
1、LAGE
‑
la、MAGE
‑
A1、豆荚蛋白、HPV E6、E7、MAGE Al、ETV6
‑
AML、精子蛋白17、XAGE1、Tie 2、MAD
‑
CT
‑
1、MAD
‑
CT
‑
2、Fos相关抗原1、p53、p53突变体、前列腺特异性蛋白、存活蛋白和端粒酶、PCTA
‑
l/Galectin 8、MelanA/MARTl、Ras突变体、hTERT、肉瘤易位断点、ML
‑
IAP、ERG(TMPRS本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种嵌合抗原受体，其包含配体结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和胞内信号传导结构域，其中所述共刺激结构域包含NK激活性受体或其配体的胞内区，其中所述NK激活性受体选自2B4、DNAM
‑
1和LFA
‑
1，所述NK激活性受体的配体选自CD48、CD112、CD155、ICAM1、ICAM2和ICAM3。2.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述共刺激结构域包含选自以下蛋白的胞内区：CD155、ICAM3和2B4。3.权利要求2在所述的嵌合抗原受体，其中所述CD155胞内区与SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列具有至少90％、95％、97％或99％或100％的序列同一性；ICAM3胞内区与SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列具有至少90％、95％、97％或99％或100％的序列同一性；2B4胞内区与SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列具有至少90％、95％、97％或99％或100％的序列同一性。4.权利要求1
‑
3任一项所述的嵌合抗原受体，其中所述共刺激结构域进一步包含选自以下蛋白的信号传导结构域：TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、CARD11、CD2、CD7、CD8、、CD27、CD28、CD30、CD40、CD83、CD134、CD137、CD270、CD272、CD276、CD278、CD357、DAP10、DAP12、LAT、NKG2C、SLP76、PD
‑
1、LIGHT、TRIM、CD94、LTB、ZAP70以及它们的组合。5.权利要求1
‑
3任一项所述的嵌合抗原受体，其中所述共刺激结构域进一步包含CD27、CD28、CD134、CD137或CD278的信号传导结构域或它们的组合。6.权利要求1
‑
5任一项所述的嵌合抗原受体，其中所述配体结合结构域选自免疫球蛋白分子、Fab、Fab
’
、F(ab
’
)2、Fv片段、scFv、线性抗体、重链抗体、sdAb或纳米抗体。7.权利要求1
‑
6任一项所述的嵌合抗原受体，其中所述配体结合结构域与选自以下的一个或多个靶标结合：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD14、CD15、CD46、CD70、TSHR、CD19、CD123、CD22、BAFF
‑
R、CD30、CD171、CS
‑
1、CLL
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1、CD33、EGFRvIII、GD2、GD3、BCMA、GPRC5D、Tn Ag、PSMA、ROR1、FLT3、FAP、TAG72、CD38、CD44v6、CEA、EPCAM、B7H3、KIT、IL
‑
13Ra2、间皮素、IL
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l lRa、PSCA、PRSS21、VEGFR2、LewisY、CD24、PDGFR
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β、SSEA
‑
4、CD20、AFP、Folate受体α、ERBB2(Her2/neu)、MUC1、EGFR、CS1、CD138、NCAM、Claudin18.2、Prostase、PAP、ELF2M、Ephrin B2、IGF
‑
I受体、CAIX、LMP2、gploo、bcr
‑
abl、酪氨酸酶、EphA2、Fucosyl GMl、sLe、GM3、TGS5、HMWMAA、o
‑
乙酰基
‑
GD2、Folate受体β、TEM1/CD248、TEM7R、CLDN6、GPRC5D、CXORF61、CD97、CD179a、ALK、多聚唾液酸、PLAC1、GloboH、NY
‑
BR
‑
1、UPK2、HAVCR1、ADRB3、PANX3、GPR20、LY6K、OR51E2、TARP、WT1、NY
‑
ESO
‑
1、LAGE
‑
la、MAGE
‑
A1、豆荚蛋白、HPV E6、E7、MAGE Al、ETV6
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AML、精子蛋白17、XAGE1、Tie 2、MAD
‑
CT
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1、MAD
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CT
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：周亚丽，陈功，姜小燕，任江涛，贺小宏，王延宾，韩露，
申请(专利权)人：南京北恒生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：