一种新型嵌合抗原受体及其用途制造技术

技术编号：40580017 阅读：5 留言：0更新日期：2024-03-06 17:22

本发明专利技术提供了一种新型嵌合抗原受体及其用途，其从N端到C端包含：抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和初级信号传导结构域，所述跨膜结构域包含NKp44跨膜区序列，所述共刺激结构域包含2B4胞内区序列和/或4‑1BB胞内区序列。本发明专利技术还提供了表达所述新型嵌合抗原受体的工程化免疫细胞、包含工程化免疫细胞的药物组合物及其在治疗癌症等疾病中的用途。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫治疗，涉及一种新型嵌合抗原受体及其用途，具体涉及一种新型嵌合抗原受体、表达所述新型嵌合抗原受体的工程化免疫细胞、包含工程化免疫细胞的组合物及其在治疗癌症等疾病中的用途。

技术介绍

1、过继性细胞疗法是指通过对自体免疫细胞进行体外激活和扩增，然后将其重新输回至患者体内，从而达到直接杀伤肿瘤或激发机体的免疫应答杀伤肿瘤细胞的目的。常见的过继性细胞疗法包括lak、cik和nk等非特异性免疫疗法以及til、car-t和tcr-t等特异性免疫疗法。其中，car-t细胞疗法由于在血液瘤领域的出色表现成功引起了广泛关注。鉴于car-t细胞疗法的飞速发展，也逐渐衍生出了car-nk、car-nkt、car-treg、car-γδt等以car作为核心技术的一系列新型细胞疗法，共同引领car细胞疗法成为肿瘤细胞免疫治疗的一大趋势。

2、嵌合抗原受体(car)是一种细胞表面受体蛋白，它赋予了免疫细胞靶向特定抗原蛋白的能力。从结构上看，car至少由抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域三个功能结构域组成，胞内信号传导结构域由共刺激结构域和/或初级信号传导结构域构成。car结构的设计经历了以下过程：第一代car只有一个胞内信号组份cd3ζ或者fcγri分子，由于胞内只有一个活化结构域，因此它只能引起短暂的免疫细胞增殖和较少的细胞因子分泌，而并不能提供长时间的免疫细胞增殖信号和持续的体内抗肿瘤效应，所以并没有取得很好的临床疗效；第二代car在原有结构基础上引入一个共刺激分子，如cd28、4-1bb、ox40、icos，

3、研究表明，不同的功能结构域对car的功能有重要的影响。例如，国际申请wo2016014789a中，在不改变抗原结合结构域和胞内传导信号结构域的前提下，仅通过改变跨膜结构域，即可大幅度改善car的性能，降低car-t对非靶细胞的非特异杀伤作用。例如，目前在car细胞疗法领域中普遍认为，包含cd28共刺激结构域的car细胞显示出更好的细胞增殖活性，包含4-1bb共刺激结构域的car细胞显示出更好的持续性。

4、目前car细胞疗法在临床应用中仍存在一些问题，如对实体瘤疗效不佳、异体移植时可能存在移植排斥反应、持续性差、有发生并发症(如输注时常发生的严重炎症反应)的风险等。因此，有必要开发新的car结构，以进一步增强表达car细胞疗法的治疗效果。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种新型嵌合抗原受体，其能够激活免疫细胞对表达靶抗原的肿瘤细胞的特异性杀伤作用。

2、嵌合抗原受体

3、本专利技术提供一种新型嵌合抗原受体，其从n端到c端包含：抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和初级信号传导结构域，所述跨膜结构域包含nkp44跨膜区序列，所述共刺激结构域包含2b4胞内区序列和/或4-1bb胞内区序列。

4、在一些实施方案中，所述nkp44跨膜区的氨基酸序列与seq id no：1所示的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或99％同一性或100％同一性(例如至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性或100％同一性)。在一些实施方案中，所述nkp44跨膜区由seq idno：1所示的氨基酸序列组成。

5、在一些实施方案中，所述2b4胞内区的氨基酸序列与seq id no：2或3所示的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或99％同一性或100％同一性(例如至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性或100％同一性)。在一些实施方案中，所述2b4胞内区由seq id no：2或3所示的氨基酸序列组成。

6、在一些实施方案中，所述4-1bb胞内区的氨基酸序列与seq id no：4或5所示的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或99％同一性或100％同一性(例如至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性或100％同一性)。在一些实施方案中，所述4-1bb胞内区由seqid no：4或5所示的氨基酸序列组成。

7、在一些实施方案中，所述抗原结合结构域选自fab、fab'、f(ab')2、fv片段、scfv、二硫键-连接的fvs(sdfv)、由vh和ch1结构域组成的fd片段、线性抗体、单域抗体(如sdab)、由抗体片段(例如包括在铰链区通过二硫键连接的两个fab片段的二价片段)形成的双特异性抗体或多特异性抗体、抗体的分离的cdr或其它表位结合片段。在一些实施方案中，所述抗原结合结构域选自scfv和/或sdab。在一些实施方案中，所述抗原结合结构域可以是人源化抗体、鼠源抗体、嵌合抗体、人抗体或驼源抗体。

8、在一些实施方案中，所述抗原结合结构域结合选自以下的抗原：alk、adrb3、akap-4、april、asgpr1、bcma、b7h3、b7h4、b7h6、bcr-abl、boris、bst2、baff-r、btla、cd2、cd3、cd4、cd5、cd7、cd8、cd19、cd20、cd22、cd24、cd25、cd28、cd30、cd33、cd38、cd40、cd44、cd44v6、cd44v7/8、cd47、cd52、cd56、cd57、cd58、cd70、cd72、cd79a、cd79b、cd80、cd81、cd86、cd97、cd123、cd133、cd137、cd 138、cd151、cd171、cd179a、cd300lf、clec12a、cdh16、cspg4、cs-1、cll-1、claudin 6、claudin18.1、claudin 18.2、cea、ceacam6、c-met、caix、cxorf61、ca125、cyp1b1、cs1、elf2m、egfr、epcam、egfrviii、epha2、erg/tmprss2ets融合基因、etv6-aml、emr2、egp2，egp40、fap、far、fbp、flt3、fosl1、f本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种嵌合抗原受体，其从N端到C端包含：抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和初级信号传导结构域，所述跨膜结构域包含NKp44跨膜区序列，所述共刺激结构域包含2B4胞内区序列和/或4-1BB胞内区序列。

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述NKp44跨膜区的氨基酸序列与SEQ IDNO：1所示的氨基酸序列具有至少80％同一性。

3.根据权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其中所述2B4胞内区的氨基酸序列与SEQID NO：2或3所示的氨基酸序列具有至少80％同一性。

4.根据权利要求1-3任一项所述的嵌合抗原受体，其中所述4-1BB胞内区的氨基酸序列与SEQ ID NO：4或5所示的氨基酸序列具有至少80％同一性。

5.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述抗原结合结构域选自Fab、Fab'、F(ab')2、Fv片段、scFv、二硫键连接的Fv、由VH和CH1结构域组成的Fd片段、线性抗体、单域抗体、由抗体片段形成的双特异性抗体或多特异性抗体、抗体的分离的CDR或其它表位结合片段。

6.根据权利要求1或

7.根据权利要求6所述的嵌合抗...

【技术特征摘要】

1.一种嵌合抗原受体，其从n端到c端包含：抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和初级信号传导结构域，所述跨膜结构域包含nkp44跨膜区序列，所述共刺激结构域包含2b4胞内区序列和/或4-1bb胞内区序列。

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述nkp44跨膜区的氨基酸序列与seq idno：1所示的氨基酸序列具有至少80％同一性。

3.根据权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其中所述2b4胞内区的氨基酸序列与seqid no：2或3所示的氨基酸序列具有至少80％同一性。

4.根据权利要求1-3任一项所述的嵌合抗原受体，其中所述4-1bb胞内区的氨基酸序列与seq id no：4或5所示的氨基酸序列具有至少80％同一性。

5.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述抗原结合结构域选自fab、fab'、f(ab')2、fv片段、scfv、二硫键连接的fv、由vh和ch1结构域组成的fd片段、线性抗体、单域抗体、由抗体片段形成的双特异性抗体或多特异性抗体、抗体的分离的cdr或其它表位结合片段。

6.根据权利要求1或5所述的嵌合抗原受体，其中所述抗原结合结构域结合选自以下的抗原：alk、adrb3、akap-4、april、asgpr1、bcma、b7h3、b7h4、b7h6、bcr-abl、boris、bst2、baff-r、btla、cd2、cd3、cd4、cd5、cd7、cd8、cd19、cd20、cd22、cd24、cd25、cd28、cd30、cd33、cd38、cd40、cd44、cd44v6、cd44v7/8、cd47、cd52、cd56、cd57、cd58、cd70、cd72、cd79a、cd79b、cd80、cd81、cd86、cd97、cd123、cd133、cd137、cd 138、cd151、cd171、cd179a、cd300lf、clec12a、cdh16、cspg4、cs-1、cll-1、claudin 6、claudin18.1、claudin 18.2、cea、ceacam6、c-met、caix、cxorf61、ca125、cyp1b1、cs1、elf2m、egfr、epcam、egfrviii、epha2、erg/tmprss2ets融合基因、etv6-aml、emr2、egp2，egp40、fap、far、fbp、flt3、fosl1、fcrl5、fcar、flt3、flt4、frizzled、gd2、gd3、gp100、gp130、gm3、gpc2、gpc3、gprc5d、gpr20、globoh、ghrhr、ghr、gitr、her2、her3、her-4、hmwmaa、havcr1、hpv e6,e7、hvem、hiv-1gag、hla-a1、hla-a2、il6r、il-11ra、il-13ra、igf-i受体、ltpr、lifrp、lrp5、igll1、igf1r、kit、kappa light chain、kdr、lewisy、lmp2、ly6k、lage-1a、legumain、lck、lair1、lilra2、ly75、muc1、muc16、mage-a1、mage3、mad-ct-1、melana/mart1、ml-iap、mycn、mut hsp70-2、ncam、ny-br-1、ny-eso-1、na17、notch-1-4、nachr、nkg2d配体、oy-tes1、or51e2、ox40、prss21、psca、pd1、pd-l1、pd-l2、psma、prostase、pap、pdgfr-β、pcta-1/半乳凝集素8、p53、p53突变体、prostein、plac1、panx3、pax3、pax5、ptch1、rank、rage-1、ror1、ras突变体、rhoc、ru1、ru2、robol、ssea-4、ssx2、sart3、sp17、tshr、tn ag、tgs5、tem1/cd248、tem7r、tarp、tcrα、tcrβ、tgfbr1、tgfbr2、tnfrsf4、tweak-r、tlr7、tlr9、tag72、trop-2、tie 2、trp-2、tnfr1、tnfr2...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏俊，李陈梅，任江涛，
申请(专利权)人：南京北恒生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：

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