靶向制造技术

本发明专利技术提供了靶向

【技术实现步骤摘要】
靶向CD69的工程化免疫细胞及其用途


[0001]本专利技术属于免疫治疗领域
。
更具体地，本专利技术涉及一种靶向
CD69
的工程化免疫细胞及其用途
。

技术介绍

[0002]目前，
CAR T
疗法已经在血液瘤领域取得巨大的成功，随着对其功能
、
机制等的理解不断加深，
CAR T
在实体瘤领域也在逐渐取得突破
。
通用型
CAR T
产品因其潜在的低成本
、
现货供应等优势不断受到研究者关注，但与自体
CAR T
相比，通用型
CAR T
始终面临着一些挑战
。
[0003]在通用型
CAR T
所面临的挑战中，体内持久性较差是一个最重要的问题
。
目前的解决方案一般有两种，一种是敲除
CAR
‑
T
细胞中引起宿主免疫排异的基因例如
TCR、HLA
‑
I
类基因等，这种方案会使
CAR
‑
T
细胞的持久性得到一定程度的改善；另一种方案则是针对性地清除或抑制宿主体内的
NK
细胞和激活型
T
细胞，从而降低这些免疫细胞对外源性
CAR
‑
T
细胞的排斥和杀伤，提高
CAR
‑
T
细胞的持久性
。
[0004]CD69
是
C
型凝集素受体家族的成员，其在静息
T
细胞中一般不表达
。
当
T
细胞通过
TCR
接受刺激信号后，细胞表面就会合成和表达一些新的糖蛋白，例如
CD25、CD69、CD71
等，其中最早表达的是
CD69。
因此，
CD69
通常是作为激活型
T
细胞早期表达的标志物
。
此外，与
T
细胞一样，
CD69
在静止状态的
NK
细胞中也不表达，而在
NK
细胞被刺激后迅速表达
。
因此，
CD69
同样也是
NK
细胞激活的标志物
。
[0005]因此，本专利技术提供表达靶向
CD69
的嵌合抗原受体的工程化免疫细胞，其同时具有清除肿瘤细胞
、
患者自身
NK
细胞和激活型
T
细胞的能力，能显著提高对靶细胞的杀伤功能
。
另外，在自身免疫性疾病和器官移植伴随的移植物抗宿主病
(GVHD)、
宿主抗移植物病
(HVGD)
中，同样存在着
T
细胞过度激活
、
不正常激活等现象，靶向
CD69
的工程化免疫细胞同样可用于这些情形的治疗
、
控制
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在提供一种靶向
CD69
的工程化免疫细胞，其可用于细胞免疫治疗中对患者自身
NK
细胞和激活型
T
细胞的杀伤，进而降低患者的免疫排斥反应，增强细胞治疗的效果
。
同时，其也可用于治疗和控制自身免疫性疾病和器官移植伴随的
GVHD
和
HVGD。
[0007]因此，在第一个方面，本专利技术提供一种嵌合抗原受体，其包含靶向
CD69
的抗体
、
跨膜结构域和胞内信号传导结构域
。
[0008]在一个实施方案中，本专利技术中所述抗体是完整抗体
、Fab、Fab
’
、F(ab
’
)2、Fv
片段
、scFv
抗体片段
、
线性抗体
、sdAb
或纳米抗体
。
[0009]在一个实施方案中，所述靶向
CD69
的抗体包含如
SEQ ID NO:1
所示的
CDR
‑
H1、
如
SEQ ID NO:2
所示的
CDR
‑
H2、
如
SEQ ID NO:3
所示的
CDR
‑
H3、
如
SEQ ID NO:4
所示的
CDR
‑
L1、
如
SEQ ID NO:5
所示的
CDR
‑
L2、
如
SEQ ID NO:6
所示的
CDR
‑
L3。
优选地，所述靶向
CD69
的抗体
包含与
SEQ ID NO:7
所示的氨基酸序列具有至少
70
％，优选至少
80
％，更优选至少
90
％
、95
％
、97
％或
99
％或
100
％序列同一性的重链可变区序列和与
SEQ ID NO:8
所示的氨基酸序列具有至少
70
％，优选至少
80
％，更优选至少
90
％
、95
％
、97
％或
99
％或
100
％序列同一性的轻链可变区序列
。
更为优选地，所述靶向
CD69
的抗体包含与
SEQ ID NO:9
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO:10
所示的核苷酸序列具有至少
70
％，优选至少
80
％，更优选至少
90
％
、95
％
、97
％或
99
％或
100
％序列同一性的序列
。
[0010]在一个实施方案中，所述嵌合抗原受体还包含靶向第二靶点的抗体
。
在一个具体的实施方案中，所述第二靶点选自：
TSHR、CD7、CD19、CD123、CD22、BAFF
‑
R、CD30、CD171、CS
‑
1、CLL
‑
1、CD33、EGFRvIII、GD2、GD3、BCMA、GPRC5D、Tn Ag、PSMA、ROR1、FLT3、FAP、TAG72、CD38、CD44v6、CEA、EPCAM、B7H3、KIT、IL
‑
13Ra本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种嵌合抗原受体，其包含靶向
CD69
的抗体
、
跨膜结构域和胞内信号传导结构域
。2.
根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述靶向
CD69
的抗体包含如
SEQ ID NO:1
所示的
CDR
‑
H1、
如
SEQ ID NO:2
所示的
CDR
‑
H2、
如
SEQ ID NO:3
所示的
CDR
‑
H3、
如
SEQ ID NO:4
所示的
CDR
‑
L1、
如
SEQ ID NO:5
所示的
CDR
‑
L2、
如
SEQ ID NO:6
所示的
CDR
‑
L3。3.
根据权利要求2所述的嵌合抗原受体，其中所述靶向
CD69
的抗体包含与
SEQ ID NO:7
所示的氨基酸序列具有至少
70
％，优选至少
80
％，更优选至少
90
％
、95
％
、97
％或
99
％或
100
％序列同一性的重链可变区序列和与
SEQ ID NO:8
所示的氨基酸序列具有至少
70
％，优选至少
80
％，更优选至少
90
％
、95
％
、97
％或
99
％或
100
％序列同一性的轻链可变区序列
。4.
根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述嵌合抗原受体还包含靶向第二靶点的抗体；其中所述第二靶点选自：
TSHR、CD7、CD19、CD123、CD22、BAFF
‑
R、CD30、CD171、CS
‑
1、CLL
‑
1、CD33、EGFRvIII、GD2、GD3、BCMA、GPRC5D、Tn Ag、PSMA、ROR1、FLT3、FAP、TAG72、CD38、CD44v6、CEA、EPCAM、B7H3、KIT、IL
‑
13Ra2、
间皮素
、IL
‑
l lRa、PSCA、PRSS21、VEGFR2、LewisY、CD24、PDGFR
‑
β
、SSEA
‑
4、CD20、Folate
受体
α
、ERBB2、MUC1、EGFR、NCAM、Claudin18.2、Prostase、PAP、ELF2M、Ephrin B2、IGF
‑
I
受体
、CAIX、LMP2、gploo、bcr
‑
abl、
酪氨酸酶
、EphA2、Fucosyl GMl、sLe、GM3、TGS5、HMWMAA、o
‑
乙酰基
‑
GD2、Folate
受体
β
、TEM1/CD248、TEM7R、CLDN6、GPRC5D、CXORF61、CD97、CD179a、ALK、
多聚唾液酸
、PLAC1、GloboH、NY
‑
BR
‑
1、UPK2、HAVCR1、ADRB3、PANX3、GPR20、LY6K、OR51E2、TARP、WT1、NY
‑
ESO
‑
1、LAGE
‑
la、MAGE
‑
A1、
豆荚蛋白
、HPV E6、E7、MAGE Al、ETV6
‑
AML、
精子蛋白
17、XAGE1、Tie 2、MAD
‑
CT
‑
1、MAD
‑
CT
‑
2、Fos
相关抗原
1、p53、p53
突变体
、
前列腺特异性蛋白
、
存活蛋白和端粒酶
、PCTA
‑
l/Galectin 8、MelanA/MARTl、Ras
突变体
、hTERT、
肉瘤易位断点
、ML
‑
IAP、ERG、NA17、PAX3、
雄激素受体
、Cyclin Bl、MYCN、RhoC、TRP
‑
2、CYP1B 1、BORIS、SART3、PAX5、OY
‑
TES 1、LCK、AKAP
‑
4、SSX2、RAGE
‑
1、
人端粒酶逆转录酶
、RU1、RU2、
肠道羧酸酯酶
、mut hsp70
‑
2、CD79a、CD79b、CD72、LAIR1、FCAR、LILRA2、CD300LF、CLEC12A、BST2、EMR2、LY75、GPC3、FCRL5、IGLL1、PD1、PDL1、PDL2、TGF
β
、APRIL、NKG2D
或其任意组合
。5.
根据权利要求4所述的嵌合抗原受体，其中所述嵌合抗原受体还包含靶向
CD19
的抗体，其包含如
SEQ ID NO:11
所示的
CDR
‑
H1、
如
SEQ ID NO:12
所示的
CDR
‑
H2、
如
SEQ ID NO:13
所示的
CDR
‑
H3、
如
SEQ ID NO:14
所示的
CDR
‑
L1、
如
SEQ ID NO:15
所示的
CDR
‑
L2、
如
SEQ ID NO:16
所示的
CDR
‑
L3。6.
根据权利要求5所述的嵌合抗原受体，其中所述靶向
CD19
的抗体包含与
SEQ ID NO
：
17、21、23
任一所示的氨基酸序列具有至少
70
％，优选至少
80
％，更优选至少
90
％
、95
％
、97
％或
99
％或
100
％序列同一性的重链可变区序列和与
SEQ ID NO
：
18、22、24
任一所示的氨基酸序列具有至少
70
％，优选至少
80
％，更优选至少
90
％
、95
％
、97
％或
99
％或
100
％序列同一性的轻链可变区序列

【专利技术属性】
技术研发人员：李国坤，张静，孙慧芳，任江涛，
申请(专利权)人：南京北恒生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：