一种嵌合抗原受体制造技术

本发明专利技术公开了一种嵌合抗原受体

【技术实现步骤摘要】
一种嵌合抗原受体、通用型CAR
‑
T细胞及其应用


[0001]本专利技术涉及肿瘤治疗
，具体而言，涉及一种嵌合抗原受体
、
通用型
CAR
‑
T
细胞及其应用
。

技术介绍

[0002]CAR
‑
T
治疗即嵌合抗原受体
T
细胞免疫疗法，属于免疫疗法中的一种，主要用于恶性血液病和恶性肿瘤患者的临床治疗
。CAR
‑
T
治疗是在从患者血液中收集分离
T
细胞，然后进行基因修饰，增强其对抗癌细胞的靶向和杀伤能力，
T
细胞在体外大量培养扩增后，再输入患者体内，并继续繁殖，最终识别体内癌细胞，将其摧毁
。
[0003]CAR
‑
T
治疗方法对于肿瘤细胞更具杀伤力，并且靶向性更强，疗效也更加持久
。
每一种
CAR
‑
T
都是根据患者体内肿瘤的表面抗原而特意设计的，因此更具有针对性
。
实验证明，当体内癌细胞死灰复燃时，这些经过基因修饰的
T
细胞仍然可以发挥抗肿瘤活性
。
这种治疗方法可以应用于血液肿瘤以及实体瘤的治疗，如白血病
、
淋巴瘤
、
多发性骨髓瘤
、
胶质瘤
、
神经母细胞瘤等
。
[0004]CAR
>‑
T
细胞疗法已经成为癌症治疗的一个全新突破点
、
热点，获得了越来越多的认可，在更多的适应症上得到了应用
。
但该疗法在临床暂未广泛应用，主要原因是
CAR
‑
T
细胞制备程序复杂，技术门槛高，这让大量的患者无法负担
。
从已上市的
CAR
‑
T
产品价格来看，国外的定价在
40
万美元左右；国内已上市的两款产品定价超过
120
万元人民币
。
这主要是因为目前获批的
CAR
‑
T
细胞疗法都是自体产品，其制备过程大致是：首先采集患者自身的外周血，分离免疫细胞，然后对其进行制备和回输
。
这种制备方法不仅花费高，而且需要一定的等待时间，而且很多比较虚弱的患者可能并没有足够的血细胞用来制备
CAR
‑
T
细胞，很大程度上限制了
CAR
‑
T
疗法的广泛应用
。
[0005]随着基因编辑技术发展，对
CAR
‑
T
进行基因编辑实现通用化，越来越被各大细胞治疗企业青睐
。
通用型
CAR
‑
T
细胞疗法在成本控制
、
有限治疗时间窗口等方面具有多个优势，
CRISPR
基因编辑技术开发的下一代通用型细胞疗法开始受到广泛关注，有望解决当前
CAR
‑
T
疗法价格高昂
、
产能低等问题，为细胞疗法的普及带来了巨大希望
。
[0006]相比于自体
CAR
‑
T
，通用型
CAR
‑
T
是同种异体细胞疗法，实现通用即无需从患者自身体内分离免疫细胞，直接使用健康人
T
细胞，通过基因编辑技术改造后进行大规模培养，最终回输到患者体内
。
通用型免疫细胞治疗无需配型，“现货”存储，即时使用，能显著缩短治疗周期，一位健康捐献者可制备成百上千人份“现货”，极大降低细胞治疗成本
。
[0007]通用型免疫细胞治疗是未来发展的必然趋势，目前各种技术和创新层出不穷，百花齐放，如何研发更安全更有效的通用型免疫细胞治疗产品，将会成为各细胞治疗企业的下一个角逐的方向，通用型细胞药物将真正造福全世界的广大患者
。
[0008]通用
CAR
‑
T
产品虽然可以解决成本和产能问题，实现“现货”供应
。
但也存在2个挑战：
[0009]第一个挑战是，如何尽量避免宿主细胞对异体来源的
CAR
‑
T
细胞的杀伤，即
HvGD。
目前主流的思路是
CD52
单抗联用对患者体内免疫细胞进行清除，
Allogene
与南京北恒均采用了该思路，但国内尚没有
CD52
单抗获批甚至进入临床阶段，
CD52
单抗的进口难度会加大，也会因为抗体的联用大大增加患者治疗成本，同时
CD52
单抗半衰期较长，会使病人长期处于免疫抑制状态，增加病人感染的风险
。
[0010]第二个挑战是如何提高
UCAR
‑
T
细胞在体内的扩增
。
通用
CAR
‑
T
为了解决移植的
CAR
‑
T
细胞对宿主的攻击即移植物抗宿主病
(GvHD)
的问题，需要对
TCR
进行敲除或者抑制
。TCR
是所有
T
细胞表面的特征性标志，包括两种类型：由
α
和
β
两条链组成的
αβ
型，由
γ
和
δ
两条链组成的
γδ
型
。
每一个
T
细胞只表达其中一种类型的
TCR
，故而有2种
T
细胞群：
αβ
T
细胞和
γδ
T
细胞
。
在人类中，大部分成熟的
T
细胞是
αβ
T
细胞，该类细胞的
TCR
可变区高度可变，会造成
GvHD
，因此进行
UCAR
‑
T
细胞回输时，需要通过技术手段敲除或者抑制这类
TCR
；仅有1％
‑5％是
γδ
T
细胞，
γδ
T
细胞表面的
TCR
是由
γ
链和
δ
链组成的异二聚体
(TCR
γδ
)。
[0011]TCR
γδ
分子胞外区结构类似于免疫球蛋白，远离细胞膜的一端为可变区
(V
区
)
，而靠近细胞膜的一端为恒定区
(C
区...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体的结构为
scFV(X)
‑
恒定区1‑
scFV(Y)
‑
恒定区2；其中，
X
包括肿瘤靶向抗体1或其功能性片段
、
或能与肿瘤特异结合的配体
、
受体；
Y
包括肿瘤靶向抗体2或其功能性片段
、
或能与肿瘤特异结合的配体
、
受体；
X
和
Y
为同一抗体的不同功能性片段或能与肿瘤特异结合的配体
、
受体；或者，
X
和
Y
为不同抗体
、
或不同抗体的功能性片段
、
或能与肿瘤特异结合的配体
、
受体；所述恒定区1包括
TCR
γ
链的恒定区和细胞因子
γ
链共用受体链；或，包括
TCR
γ
链的恒定区和细胞因子受体的
α
或
β
受体链；所述
TCR
γ
链的恒定区包括胞外段
、
跨膜区和胞内段；所述恒定区2包括
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子受体的
α
或
β
受体链；或，包括
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子
γ
链的共用受体链；所述
TCR
δ
链的恒定区包括胞外段，跨膜区和胞内段
。2.
根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述功能性片段选自所述肿瘤靶向抗体1的
VH
和
/
或
VL
；和
/
或，所述肿瘤靶向抗体2的
VH
和
/
或
VL
；优选地，所述嵌合抗原受体的结构为如下结构中的任意一种：
(1)scFV
的
VL
‑
TCR
γ
链的恒定区
‑
细胞因子
γ
链共用受体链
‑
scFV
的
VH
‑
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子受体的
α
或
β
受体链；
(2)scFV
的
VH
‑
TCR
γ
链的恒定区
‑
细胞因子
γ
链共用受体链
‑
scFV
的
VL
‑
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子受体的
α
或
β
受体链；
(3)scFV
的
VL
‑
TCR
γ
链的恒定区
‑
细胞因子受体的
α
或
β
受体链
‑
scFV
的
VH
‑
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子
γ
链共用受体链；
(4)scFV
的
VH
‑
TCR
γ
链的恒定区
‑
细胞因子受体的
α
或
β
受体链
‑
scFV
的
VL
‑
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子
γ
链共用受体链；
(5)scFV1
的
VL
‑
scFV1
的
VH
‑
TCR
γ
链的恒定区
‑
细胞因子受体的
α
或
β
受体链
‑
scFV2
的
VL
‑
scFV2
的
VH
‑
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子
γ
链共用受体链；
(6)scFV1
的
VL
‑
scFV1
的
VH
‑
TCR
γ
链的恒定区
‑
细胞因子
γ
链共用受体链
‑
scFV2
的
VL
‑
scFV2
的
VH
‑
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子受体的
α
或
β
受体链；
(7)scFV1
的
VH
‑
scFV1
的
VL
‑
TCR
γ
链的恒定区
‑
细胞因子受体的
α
或
β
受体链
‑
scFV2
的
VH
‑
scFV2
的
VL
‑
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子
γ
链共用受体链；
(8)scFV1
的
VH
‑
scFV1
的
VL
‑
TCR
γ
链的恒定区
‑
细胞因子
γ
链共用受体链
‑
scFV2
的
VH
‑
scFV2
的
VL
‑
TCR
δ
链的恒定区和细胞因子受体的
α
或
β
受体链
。3.
根据权利要求2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述细胞因子选自
IL
‑
21、IL
‑
15、IL
‑
6、IL
‑
7、IL
‑
2、IL
‑
4、IL
‑
9、IL
‑
18
和
IL
‑
12
中的至少一种
。4.
根据权利要求2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体的细胞因子
γ...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤光辉，王冰洁，戴卫国，高艳，朱滨，
申请(专利权)人：苏州丹罗医药有限公司，
类型：发明
国别省市：