高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株及其应用。所述高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株的分类命名为紫色红曲菌FAAS

【技术实现步骤摘要】
高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株及其应用。

技术介绍

[0002]红曲色素是丝状真菌红曲霉的次级代谢产物，为食品添加剂中允许使用的唯一微生物来源的天然色素。近年来，由于红曲色素具有性质稳定、耐热性强，对蛋白质着色力好等优点，可取代亚硝酸盐(一级致癌物)，在肉制品加工和水产品加工领域的使用量迅速增加，已跃升到红曲米和红曲色素最主要的应用领域。红曲和红曲色素是目前国际上产量和使用量最大的天然食用色素之一，福建省是红曲的发源地和主产区，福建红曲的产量和出口量长期处于国内领先地位，已出口到东南亚和欧美等多个国家，红曲米产量占世界总产量60％以上。福建红曲以品质优、色价高的特点，在国内外享有极高声誉，市场前景广阔。然而，红曲霉在发酵代谢的同时经常还会生成一种毒素桔霉素，从而污染红曲产品，使红曲色素在使用中存在安全隐患，严重制约了红曲的广泛应用，已成为红曲产品走向国际市场的最大障碍。
[0003]桔霉素作为食品安全国家标准主要指标之一和相关食品污染程度的重要指标之一，一些国家已制定了对食品添加剂红曲色素中桔霉素的限量指标,如我国 2015年和2016年执行的国家标准《食品添加剂红曲黄》和《食品添加剂红曲红》新增固态样品中桔霉素限量标准分别为1mg/Kg和0.04mg/Kg(均以单位色价计)，高于国际上一些国家的要求，如韩国、日本和欧盟规定红曲产品中的桔霉素的限量标准分别为0.05、0.2、2mg/Kg。目前我国高色价红曲产品中桔霉素含量依旧偏高(大部分0.23
‑
20.65mg/Kg)，制约了我国红曲产品的出口和使用领域的拓展，影响我省红曲产品的出口和红曲产业的健康发展。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一株高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株及其应用。
[0005]为了是实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一株高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株，其分类命名为紫色红曲菌FAAS
‑
M34(Monascus purpureus FAAS
‑
M34)，已保藏于中国典型培养物保藏中心，地址是中国武汉武汉大学，其保藏编号为CCTCC NO：M 2022959，保藏日期为2022年06 月24日。
[0007]本专利技术提供的紫色红曲菌FAAS
‑
M34可应用于制备高品质红曲米。
[0008]所述紫色红曲菌FAAS
‑
M34具有很强的产生天然红曲色素的能力，且几乎不产桔霉素，可应用于制备高品质红曲米，所得红曲米产品色价高且桔霉素几乎未检出，培养周期短，产品得率较高。因此，所述紫色红曲菌FAAS
‑
M34能够安全地运用于食品加工工业，与现有同类型的菌株相比，能够产生更高品质的红曲产品，具有较高的工业应用价值。
附图说明
[0009]图1为红曲霉菌株固、液态培养产色素和桔霉素能力比较图。
[0010]图2为紫色红曲菌FAAS
‑
M34的菌落形态图。
[0011]图3为紫色红曲菌FAAS
‑
M34在光学显微镜下的个体形态图(菌丝体和分生孢子结构)。
[0012]图4为紫色红曲菌FAAS
‑
M34在扫描电子显微镜下的个体形态图(闭囊壳和菌丝体结构)。
[0013]图5为紫色红曲菌FAAS
‑
M34液态培养生长代谢曲线图。
具体实施方式
[0014]以下实施例中所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
[0015]样品来源
[0016]从福建各个红曲的生产企业收集的红曲米或红曲米制备的曲池土样等。
[0017]培养基
[0018](1)斜面培养基：麦芽汁10
°
B
é
，琼脂2％，pH 6
‑
7，加热溶解后，分装入试管内，塞好棉塞，121℃高压蒸汽灭菌20min取出，斜放成斜面冷却后成型制成斜面培养基。
[0019](2)液态种子培养基：3
‑
6％可溶性淀粉，3
‑
6％葡萄糖，1
‑
2％蛋白胨， 0.1
‑
0.2％NaNO3，0.1
‑
0.2％KH2PO4，0.05％
‑
0.15％MgSO4，0.05
‑
0.115％K2HPO4，pH调至4.6
‑
6.0。在250mL三角瓶中装50mL液体种子培养基并加入数颗小玻璃珠， 121℃高压蒸汽灭菌30min。
[0020](3)液态发酵培养基：3
‑
6％可溶性淀粉，3
‑
6％葡萄糖，1
‑
2％蛋白胨， 0.1
‑
0.2％NaNO3，0.05
‑
0.15％NH4NO3，0.1
‑
0.2％KH2PO4，0.05％
‑
0.15％MgSO4， 0.10％
‑
0.20％ZnSO4，0.05％
‑
0.15％FeSO4，0.05
‑
0.15％K2HPO4，pH调至4.6
‑
6.0。在250mL三角瓶中装50mL液体种子培养基并加入数颗小玻璃珠，121℃高压蒸汽灭菌30min。
[0021](4)固态发酵培养基：籼米，市售。
[0022]实施例1菌株的分离、筛选、鉴定
[0023]1.1方法
[0024]1.1.1菌株分离方法
[0025]取粉碎后的红曲米1～2g加入装有50mL无菌水的三角瓶中，180r/min 摇床振荡30min，进行系列梯度稀释，即10
‑1，10
‑2，10
‑3，10
‑4，10
‑5，10
‑6，每个稀释度吸取0.1
‑
0.2mL涂布于平板上，35℃培养3～5d，根据平板上菌落生长形态特征，挑取菌落生长快，菌落直径大，颜色深的转接培养，直至得到纯化的红曲霉菌株，35℃斜面培养7～10d，待菌丝长满斜面后置4℃冰箱保藏，备用。
[0026]1.1.2孢子悬浮液的制备
[0027]斜面接种红曲霉菌株，置于30
‑
35℃的恒温培养箱中培养7
‑
10d，斜面长满红曲霉即可。取8mL无菌生理盐水加到斜面种子，用接种针刮取斜面孢子，至装有玻璃珠的无菌水中打散，制成均一的孢子悬浮液，通过血球计数板计数，孢子悬浮液的孢子浓度为1
×
107个/mL
‑
2.5
×
107个/mL。
[0028]1.1.3液态种子液的制备本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株，其分类命名为紫色红曲菌FAAS
‑
M34（MonascuspurpureusFAAS
‑
M34），已保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCCNO：M2022959，保藏日期为2022年06月24日。2.如权利要求1所述的高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株在红曲米制备中的应用。3.根据权利要求2所述的高产红曲色素低产桔霉素的红曲霉菌株在红曲米制备中的应用，其特征在于，包括以下步骤：1)斜面接种紫色红曲菌FAAS
‑
M34，置于30
‑
35℃的恒温培养箱中培养7
‑
10d，至斜面长满红曲霉，取无菌生理盐水加到斜面种子，用接种针刮取斜面孢子，至装有玻璃珠的无菌水中打散，制成孢子悬浮液；2）按6
‑
10%的接种量将孢子悬浮液接到液态种子培养基中，置于32
‑
35℃恒温摇床内，振荡培养2
‑
4d，得到液态种子液；3）将籼米与浸米液按质量比为1:1.5
‑
2装入三角瓶中摇匀，浸泡6
‑
8h，沥干、灭菌、冷却后接种6
‑
10%步骤2）得到的液态种子液，摇匀，于30
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄颖颖，杨成龙，陈慎，
申请(专利权)人：福建省农业科学院农业工程技术研究所，
类型：发明
国别省市：