用于生产蒙古白丽蘑的培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种用于生产蒙古白丽蘑的培养基，包括固体培养基、液体培养基和栽培种培养基，本发明专利技术以锡林郭勒地区野生蒙古白丽蘑为研究对象，以菌丝干质量、菌丝体生物量、菌丝球平均长度及菌丝吃料深度为评价指标筛选出适合其菌丝生长的固体、液体以及栽培种培养基配方。配方。配方。

【技术实现步骤摘要】
用于生产蒙古白丽蘑的培养基


[0001]本专利技术属于食用菌栽培领域，具体涉及一种用于生产蒙古白丽蘑的培养基。

技术介绍

[0002]蒙古白丽蘑(Leucocalocybe mongolica)，现属担子菌门，蘑菇纲，蘑菇目，口蘑科，白丽蘑属。随着气候的变化、草原的退化以及人为破坏性采摘等因素，蒙古白丽蘑野生种群数量逐年减少。2021年，蒙古白丽蘑被列入《国家重点保护野生植物名录》，成为二级濒危保护物种。种群数量的减少甚至濒危亟需科学的研究保护。目前，蒙古白丽蘑只分布在呼伦贝尔市以及锡林郭勒盟等旗县地区。蒙古白丽蘑的人工栽培处于实验室研究阶段，优质的固体和液体菌种是人工栽培的前提。如何筛选出最适合蒙古白丽蘑菌丝生长的固体和液体培养基以及栽培种培养基配方，成为后续蒙古白丽蘑的人工驯化和仿生态栽培的基础，通过科学手段对蒙古白丽蘑资源进行保护，提高蒙古白丽蘑在锡林郭勒盟的社会经济效益。

技术实现思路

[0003]本专利技术所要解决的技术问题为：如何提供一种最适合蒙古白丽蘑菌丝生长的固体和液体培养基以及栽培种培养基配方。
[0004]本专利技术的技术方案为：一种用于生产蒙古白丽蘑的培养基，包括固体培养基、液体培养基和栽培种培养基，所述固体培养基由以下原料组成：200g/L的马铃薯、20g/L的葡萄糖、5g/L的蛋白胨、3g/L的KH2PO4、1.5g/L的MgSO4、0.01g/L的VB1、20g/L的琼脂，pH自然；
[0005]所述液体培养基由以下原料组成：200g/L的马铃薯、20g/L的葡萄糖、2g/L的蛋白胨，2g/L的酵母浸膏，3g/L的KH2PO4、1.5g/L的MgSO4，pH自然；
[0006]所述栽培种培养基由以下重量配比的原料组成：高粱500g、麸皮150g、石膏50g、木屑500g、NH4H2PO
4 2g、MgSO
4 1g。
[0007]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0008]本专利技术以锡林郭勒地区野生蒙古白丽蘑为研究对象，以菌丝干质量、菌丝体生物量、菌丝球平均长度及菌丝吃料深度为评价指标筛选出适合其菌丝生长的固体、液体以及栽培种培养基配方。结果表明，通过三种固体培养基评价比较，确定PDA加富培养基为蒙古白丽蘑菌种的最佳固体培养基配方，培养32天后其菌丝干质量达0.19
±
0.03g；通过四种液体培养基配方评价比较，确定液体培养基B为最佳液体培养基配方，其菌丝体生物量达6.19g/L，菌丝球平均长度为4.77
±
0.35cm；通过对小麦、玉米、高粱为主要基质的三种栽培种培养基筛选，确定以高粱培养基为最适栽培种配方，10天培养菌丝吃料深度为11.36
±
0.72cm。本专利技术通过对蒙古白丽蘑菌种进行分离培养和培养基配方筛选，以期为后续人工栽培提供前期工作基础。
附图说明
[0009]图1蒙古白丽蘑子实体和菌丝体的分子鉴定；
[0010]图2蒙古白丽蘑菌种在三种固体培养基上的生长状态；
[0011]图3蒙古白丽蘑菌种在三种固体培养基上的菌丝长度；
[0012]图4蒙古白丽蘑菌种在三种固体培养基上的菌丝干质量；
[0013]图5蒙古白丽蘑菌种在四种液体培养基上的生长状态；
[0014]图6蒙古白丽蘑菌种在四种液体培养基上的菌丝体生物量和菌丝球平均长度；
[0015]图7蒙古白丽蘑菌种在三种栽培种培养基中的生长状态；
[0016]图8蒙古白丽蘑菌种在三种栽培种培养基中的吃料深度。
具体实施方式
[0017]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为从商业渠道购买得到的。
[0018]1.蒙古白丽蘑子实体和菌丝体的分子鉴定
[0019]将采集得到的蒙古白丽蘑子实体和菌丝体分别设置三个平行组进行DNA提取，并将其进行PCR扩增和凝胶电泳验证，由图1可知，子实体和菌丝体的DNA扩增产物条带大小600bp左右，后经分子测序后进行NCBI序列比对表明，该菌株与数据库中蒙古白丽蘑基因序列相似性为100％，最终确定子实体与分离得到的菌丝体皆为蒙古白丽蘑。
[0020]2.蒙古白丽蘑菌种固体培养基的筛选
[0021]为了确定蒙古白丽蘑菌种最佳固体培养基，设计了三个固体培养基，它们的配方如下：
[0022]PDA培养基(g/L)：马铃薯(去皮)切片200g，葡萄糖20g，琼脂20g，pH自然；
[0023]改良PDA培养基(g/L)：马铃薯(去皮)切片200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，酵母浸膏2g，KH2PO
4 3g，MgSO
4 1.5g，琼脂20g，pH自然；
[0024]PDA加富培养基(g/L)：马铃薯(去皮)切片200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH2PO
4 3g，MgSO
4 1.5g，VB
1 0.01g琼脂20g，pH自然。
[0025]以PDA、改良PDA及PDA加富三种固体培养基对分离的蒙古白丽蘑菌丝体进行培养，连续观测记录菌丝在固体培养基上的生长状况(图2和表1)，并通过菌丝长度(图3)和菌丝干质量(图4)的统计分析筛选出最适合蒙古白丽蘑菌种生长的固体培养基配方。通过菌丝长度比较，PDA加富培养基上的菌丝较长，改良PDA培养基上的菌丝长度较短。同时，在PDA加富培养基上的菌丝长势较快，培养至第32天时，皿内菌丝已接近培养皿边缘，而在改良PDA培养基上菌丝生长略慢。通过菌丝干质量比较，如图4所示，PDA加富培养基上的菌丝干质量最大，为0.19
±
0.03g，而PDA培养基上的菌丝干质量最小，为0.1
±
0.011g。以上结果说明PDA加富培养基上的菌丝干质量积累较多。综合以上实验数据分析，最终确定PDA加富培养基为蒙古白丽蘑菌种的最优固体培养基配方。
[0026]表1蒙古白丽蘑菌种在三种固体培养基上的菌丝生长状况
[0027][0028]注：+++表示菌丝生长状态良好且密，壮实；++表示菌丝生长状态较好、较密，较壮实；+表示菌丝生长状态好，一般密，一般壮实。
[0029]3.蒙古白丽蘑菌种液体培养基的筛选结果
[0030]为了确定蒙古白丽蘑菌种最佳液体培养基，设计了4中液体培养基，配方如下：
[0031]液体培养基A(g/L)：马铃薯切片200g，葡萄糖20g，pH自然；
[0032]液体培养基B(g/L)：马铃薯切片200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，酵母浸膏2g，KH2PO
4 3g，MgSO
4 1.5g，pH自然；
[0033]液体培养基C(g/L)：葡萄糖30g，蛋白胨2g，酵母浸膏5g，KH2PO
4 0.5g，MgSO40.5g，VB1 0.01g，pH自然；
[0034]液体培养基D(g/L)：玉米粉5g，蔗糖20g，酵母膏本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于生产蒙古白丽蘑的培养基，其特征在于，包括固体培养基、液体培养基和栽培种培养基，所述固体培养基由以下原料组成：200g/L的马铃薯、20g/L的葡萄糖、5g/L的蛋白胨、3g/L的KH2PO4、1.5g/L的MgSO4、0.01g/L的VB1、20g/L的琼脂，pH自然；所述液体培养基由以下原料组成：20...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭梁，李春冬，徐伟良，牛慧敏，隋业璇，
申请(专利权)人：锡林郭勒职业学院，
类型：发明
国别省市：