甘露醇在制备抗肺鳞癌细胞NCI-H292药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了甘露醇在制备抗肺鳞癌细胞NCI

【技术实现步骤摘要】
甘露醇在制备抗肺鳞癌细胞NCI
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H292药物中的应用


[0001]本专利技术属于癌症治疗研究
，尤其涉及甘露醇在制备抗肺鳞癌细胞NCI
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H292药物中的应用。

技术介绍

[0002]中国专利“甘露醇在制备抗肿瘤药物中的应用”(专利号201110096567X，公开日2011年10月26日)公开了使用特定浓度(10％～19％)的甘露醇注射液治疗肺癌(肺腺癌)、肝癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、胃腺癌等。该专利通过科学实验发现甘露醇具有抗肿瘤活性，通过采用多项细胞凋亡检测技术及检测凋亡相关基因bcl
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2，证实特定浓度甘露醇可诱导人多种癌细胞株明显癌细胞凋亡，并掌握了与浓度、时间的效应关系，初步阐明其可能机理，而且，专利技术人已将研究结果用于肿瘤病人治疗并取得明显的疗效，这些为甘露醇在制备抗肿瘤药物中的应用及其临床推广提供了理论依据和实际病例。
[0003]上述专利中主要报道了甘露醇对腺癌(如肺腺癌)的治疗作用，和对腺癌细胞(如SPC
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A
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1人肺腺癌细胞、H1299细胞株)凋亡的促进作用。虽然肺腺癌和肺鳞癌分别属于非小细胞肺癌最常见两个病理类型，但肺腺癌和肺鳞癌间在病因、诱因、发病人群方面都截然不同。新诊断的肺癌患者中约85％为非小细胞肺癌(NSCLC)，其中鳞癌占30％，未来NSCLC的研究热点将集中在鉴定不同肺鳞癌亚型的分子改变及研发相应靶点的靶向治疗药物。
[0004]目前肿瘤疾病的治疗研究越来越趋于“精准”，因为同为肿瘤而不同类型肿瘤致病机理不完全相同，即使同一类型肿瘤不同肿瘤细胞(基因不同)其致病机理也不完全相同。已有肺鳞癌按分子生物学分类的趋势，“肺鳞癌的分子病理学研究进展”中，学者已经提出研究已发现多个具有潜在临床指导意义的抗肿瘤靶点并即将制成鳞癌基因图谱，有望为鳞癌的基因分型提供依据；“肺鳞癌免疫基因组学分型及预测模型构建”一文提及通过基因组学分析建立肺鳞癌免疫分型。国外已有报道：肺鳞癌中的突变基因与肺腺癌也是显著不同的，较常见的突变基因包括p53、GRM8、BAI3、ERBB4、RUNX1T1、KEAP1、FBXW7和K.Ras等基因。由美国国立卫生研究院和国家人类基因组资助的癌症基因组图谱计划将完成包括肺鳞癌在内的20多种不同类型恶性肿瘤的体细胞基因组分析，结果将在不久后公布。
[0005]可见，针对不同类型肺癌特别是肺鳞癌(或肺鳞癌细胞)，需要深入开展针对性研究，探讨不同肺鳞癌细胞在细胞凋亡机理上的差异，为各型肺鳞癌临床治疗提供可靠的科学依据。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是提供甘露醇在制备抗肺鳞癌细胞NCI
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H292药物中的应用。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]甘露醇在制备抗肺鳞癌药物中的应用。
[0009]甘露醇在制备抗肺鳞癌细胞NCI
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H292药物中的应用。
[0010]药物为促进癌细胞凋亡的药物。
[0011]药物同时调节癌细胞中bcl
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2、bax的表达。
[0012]药物降低癌细胞中bcl
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2的表达、升高bax的表达。
[0013]药物为甘露醇注射液。
[0014]甘露醇注射液的质量浓度为5％～20％。
[0015]甘露醇注射液的质量浓度为20％。
[0016]专利技术人在前期研究的基础上，对甘露醇抗肿瘤进一步研究，发现肺鳞癌组治疗后的胸水里癌细胞再检出率低于肺腺癌组。据此，专利技术人开启了更深的研究，试验表明，在特定浓度的甘露醇溶液下，三种肺鳞癌细胞都有明显的凋亡发生，其最佳有效浓度在5％～30％，发生凋亡的曲线非常陡峭，没有平台现象；而且，该现象明显与甘露醇对癌细胞bcl
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2、bax表达的影响有关，经甘露醇处理后，肺鳞癌细胞的中bcl
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2明显降低而bax却显著升高。结合此次和前期研究结果，可知甘露醇虽然对多型癌细胞均具有促凋亡作用，但是肺鳞癌细胞对此似乎更敏感。然而，同为肺鳞癌细胞的不同细胞株对与甘露醇的反应(bcl
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2、bax的表达)也不完全相同，这也从基因水平侧面说明，即使是同一癌症，但甘露醇对不同分型或肺鳞癌细胞凋亡作用及其机制也不相同。因此，本专利技术为各型肺鳞癌临床治疗提供可靠的科学依据，为下一步研制抗肺鳞癌细胞药物进行了技术储备。
附图说明
[0017]图1是不同浓度甘露醇对NCI
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H292细胞活力的影响结果图。
[0018]图2是甘露醇对NCI
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H292细胞凋亡率的影响结果图，图中：A 24h及48h流式细胞术检测细胞凋亡结果，B 24h及48h流式凋亡率对比。
[0019]图3是NCI
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H292细胞中bcl
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2和bax的表达结果图，图中：A 24h Western blot凝胶电泳结果，B 24h bcl
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2表达对比，C 24h bax表达对比，D 48h Western blot凝胶电泳结果，E 48h bcl
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2表达对比，F 48h bax表达对比。
具体实施方式
[0020]在前述中国专利“甘露醇在制备抗肿瘤药物中的应用”之后，专利技术人对甘露醇抗肿瘤进一步研究，使用药用20％甘露醇治疗癌性胸水时，有一组晚期肺癌的癌性胸水在经过甘露醇治疗后，胸水癌细胞再检出结果如表1。
[0021]表1肺腺癌与肺鳞癌经甘露醇治疗后胸水癌细胞再检出对照表
[0022][0023]如表1所示，经甘露醇治疗后，肺腺癌组(7例)和肺鳞癌组(13例)的胸水都得到了很好的控制。令人意外的是，肺鳞癌组治疗后的胸水里癌细胞再检出率却低于肺腺癌组。
[0024]为此，专利技术人就甘露醇对肺鳞癌细胞的影响开始了更深入的研究，具体如下：
[0025]1.实验目的
[0026]利用CCK
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8、Western Blot和流式细胞术实验探究甘露醇在特定浓度和孵育时间下对人肺鳞癌细胞NCI
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H292，人肺鳞癌细胞NCI
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H226、人肺鳞癌细胞NCI
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H2170的凋亡的影响。
[0027]2.实验材料
[0028]2.1实验药物
[0029]20％甘露醇注射液(H13023037)(SJZ No.4Pharmaceutical,Shijiazhuang,China)。
[0030]2.2实验试剂
[0031]胎牛血清(FBS)(SH30070.03)(Hyclone,Logan,UT,USA)；青霉素
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链霉素(15140148)(Thermo Fisher Scientific,Pittsburgh,PA,USA)；胰本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.甘露醇在制备抗肺鳞癌细胞NCI
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H292药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物为促进癌细胞凋亡的药物。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述药物同时调节癌细胞中bcl
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2、bax的表达。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：李黄羿，黄其春，黄鼎铭，潘泓，蒋能，黄道航，张文玉，阮一鸣，黄超，余京懋，黄嵩，邓高敏，黄亚铭，梁语珈，陈自力，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：