用于免疫治疗的靶向含布罗莫结构域之蛋白4(BRD4)的经化学修饰的寡核苷酸制造技术

在一些方面中，本公开内容涉及用于产生免疫调节组合物的方法和组合物。在一些实施方案中，本公开内容提供了已经用能够控制和/或降低宿主细胞分化的一种或更多种寡核苷酸试剂离体处理的宿主细胞。在一些实施方案中，由本公开内容所描述的组合物和方法可用作用于治疗癌症的免疫原性调节剂。疗癌症的免疫原性调节剂。疗癌症的免疫原性调节剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于免疫治疗的靶向含布罗莫结构域之蛋白4(BRD4)的经化学修饰的寡核苷酸
[0001]相关申请
[0002]本申请根据35 U.S.C.
§
119(e)要求于2019年11月8日提交的题为“CHEMICALLY MODIFIED OLIGONUCLEOTIDES TARGETING BROMODOMAIN CONTAINING PROTEIN 4(BRD4)FOR IMMUNOTHERAPY”的美国临时申请序列号62/932,813的申请日的权益，其全部公开内容通过引用以其整体并入本文中。


[0003]在一些方面中，本公开内容涉及免疫调节组合物和制备免疫调节组合物的方法，所述方法包括使用寡核苷酸来调节参与转录和表观遗传调节的基因靶标即含布罗莫结构域之蛋白4(bromodomain containing protein 4，BRD4)以改善治疗性免疫细胞的群(population)或亚群(subset)。本公开内容还涉及使用免疫调节组合物用于治疗细胞增生性病症或感染性疾病的方法，所述细胞增生性病症或感染性疾病包括例如癌症和自身免疫病。

技术介绍

[0004]免疫系统的生理功能是识别和消除肿瘤细胞。因此，肿瘤进展的一个方面是免疫抗性机制的发生。这些抗性机制一旦发生，不仅会阻止天然免疫系统影响肿瘤生长，还会限制任何免疫治疗方法对癌症的效力。免疫抗性机制涉及有时称为免疫检查点的免疫抑制途径。免疫抑制途径在肿瘤细胞与CD8+细胞毒性T淋巴细胞之间的相互作用中发挥特别重要的作用，所述免疫抑制途径包括过继细胞转移(Adoptive Cell Transfer，ACT)治疗剂。
[0005]过继细胞转移(ACT)的多种方法涉及对从患者的样品(例如血液或肿瘤材料)中收集的细胞进行离体处理。基于细胞的处理的准备中涉及的常见步骤是从原始来源(例如，外周血)中分离细胞、基因编辑(例如，使嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor，CAR)T细胞或经工程化的T细胞受体(T
‑
cell receptor，TCR)细胞工程化)、活化和扩增。
[0006]在离体处理期间，细胞经历某些表型改变，所述改变可影响细胞的治疗特性，例如向肿瘤的运输、体内增殖能力和寿命，以及其在免疫抑制环境中的效力等。例如，T细胞分化和成熟的状态通常通过以下亚型的顺序进行：初始T细胞(T
N
)
‑
干细胞记忆T细胞(T
SCM
)
‑
中枢记忆T细胞(T
CM
)
‑
效应记忆T细胞(T
EM
)
‑
终末分化的效应T细胞(T
EFF
)。已经观察到，CD8+T细胞中的早期记忆T细胞(TS
CM
/T
CM
)的表型属性和功能属性显示出比更分化的效应细胞(例如，T
EM
、T
EFF
等)优异的体内扩增、持久性和抗肿瘤效力。

技术实现思路

[0007]在一些方面中，本公开内容涉及用于在产生免疫调节组合物期间控制T细胞的分化过程以增强期望的治疗性T细胞亚型(例如，T
SCM
和T
CM
)的水平的组合物和方法。本公开内容部分地基于包含宿主细胞的免疫调节(例如，免疫原性)组合物以及产生这样的组合物的
方法，所述宿主细胞包含靶向与信号转导/转录因子靶标、表观遗传靶标、代谢和共抑制/负调节靶标相关的基因的寡核苷酸分子。在一些方面中，本公开内容提供了用于产生免疫调节组合物的方法中的经化学修饰的寡核苷酸分子。在一些实施方案中，由本公开内容所描述的方法和组合物可用于制备免疫调节组合物和用于治疗患有增生性或感染性疾病的对象。
[0008]因此，在一些方面中，本公开内容提供了经化学修饰的双链核酸分子，其靶向布罗莫结构域和末端外(BET)家族的成员即含布罗莫结构域之蛋白4(BRD4)(例如，针对编码该成员的基因)。
[0009]在一些实施方案中，经化学修饰的双链核酸分子针对这样的序列：其包含选自表1中序列的序列的至少12个连续核苷酸。在一些实施方案中，经化学修饰的双链核酸分子是自递送RNA(例如，INTASYL
TM
；在本文中也称为sd
‑
rxRNA))。在一些实施方案中，经化学修饰的双链核酸分子(例如INTASYL
TM
)包含表1或2中所示序列或其片段，或者由表1或2中所示序列或其片段组成，或者靶向或针对表1或2中所示序列或其片段。
[0010]在一些实施方案中，经化学修饰的双链核酸分子包含至少一个2
’‑
O
‑
甲基修饰和/或至少一个2
’‑
O
‑
氟修饰，以及至少一个硫代磷酸酯修饰。
[0011]在一些方面，本公开内容提供了针对编码BRD4的基因的INTASYL
TM
化合物。在一些实施方案中，INTASYL
TM
化合物(sd
‑
rxRNA)包含选自表2中序列的序列的至少12个连续核苷酸。
[0012]在一些实施方案中，INTASYL
TM
化合物是经疏水性修饰的。在一些实施方案中，INTASYL
TM
化合物与一种或更多种疏水性缀合物连接。在一些实施方案中，疏水性缀合物是胆固醇。
[0013]在一些实施方案中，如本文中所述的经化学修饰的双链核酸分子或INTASYL
TM
化合物包含BRD4
‑
20有义或反义链或者BRD4
‑
21有义或反义链或者BRD4
‑
22有义或反义链所示序列，或者由其组成。
[0014]在一些实施方案中，如本文中所述的经化学修饰的双链核酸分子或INTASYL
TM
化合物包含具有BRD4
‑
20有义链所示序列的有义链和/或具有BRD4
‑
20反义链所示序列的反义链，或者由其组成。在一些实施方案中，如本文中所述的经化学修饰的双链核酸分子或INTASYL
TM
化合物包含具有BRD4
‑
21有义链所示序列的有义链和/或具有BRD4
‑
21反义链所示序列的反义链，或者由其组成。在一些实施方案中，如本文中所述的经化学修饰的双链核酸分子或INTASYL
TM
化合物包含具有BRD4
‑
22有义链所示序列的有义链和/或具有BRD4
‑
22反义链所示序列的反义链，或者由其组成。
[0015]在一些方面，本公开内容提供了包含如本文中所述的经化学修饰的双链核酸分子或INTASYL
TM
化合物以及可药用赋形剂的组合物。
[0016]在一些实施方案中，如本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.针对编码BRD4的基因的经化学修饰的双链核酸分子，任选地其中所述经化学修饰的双链核酸分子针对这样的序列：其包含选自表1或2中序列的序列的至少12个连续核苷酸。2.权利要求1所述的经化学修饰的双链核酸分子，其中所述经化学修饰的双链核酸分子是INTASYL
TM
分子。3.权利要求1或2所述的经化学修饰的双链核酸分子，其中所述经化学修饰的双链核酸分子包含至少一个2
’‑
O
‑
甲基修饰和/或至少一个2
’‑
氟修饰，以及至少一个硫代磷酸酯修饰。4.针对编码BRD4的基因的INTASYL
TM
分子，其中所述INTASYL
TM
分子包含选自表1或2中序列的序列的至少12个连续核苷酸。5.权利要求4所述的INTASYL
TM
分子，其中所述INTASYL
TM
分子是经疏水性修饰的。6.权利要求4或5所述的INTASYL
TM
分子，其中所述INTASYL
TM
分子与一个或更多个疏水性缀合物连接，任选地其中所述疏水性缀合物是胆固醇。7.组合物，其包含权利要求1至3中任一项所述的经化学修饰的双链核酸分子，以及可药用赋形剂。8.权利要求7所述的组合物，其中所述经化学修饰的双链核酸分子包含选自表2中序列的序列的至少12个连续核苷酸或者由其组成，任选地其中经化学修饰的双链核酸分子包含BRD4
‑
20、BRD4
‑
21或BRD4
‑
22中所示序列。9.组合物，其包含权利要求4至6中任一项所述的INTASYL
TM
分子，以及可药用赋形剂。10.权利要求9所述的组合物，其中所述INTASYL
TM
分子包含BRD4
‑
20、BRD4
‑
21或BRD4
‑
22中所示序列或者由其组成。11.权利要求9所述的组合物，其中所述经化学修饰的双链核酸分子或所述INTASYL
TM
分子包含具有BRD4
‑
20有义链所示序列的有义链和/或具有BRD4
‑
20反义链所示序列的反义链。12.权利要求9所述的组合物，其中所述经化学修饰的双链核酸分子或所述INTASYL
TM
分子包含具有BRD4
‑
21有义链所示序列的有义链和/或具有BRD4
‑
21反义链所示序列的反义链。13.权利要求9所述的组合物，其中所述经化学修饰的双链核酸分子或所述INTASYL
TM
分子包含具有BRD4
‑
22有义链所示序列的有义链和/或具有BRD4
‑
22反义链所示序列的反义链。14.免疫调节组合物，其包含宿主细胞，所述宿主细胞用经化学修饰的双链核酸分子离体处理以控制和/或降低所述宿主细胞的分化水平，以使得能够产生用于在人中施用的特异性免疫细胞群。15.权利要求14所述的免疫调节组合物，其中所述宿主细胞包含针对编码BRD4的基因的经化学修饰的双链核酸分子，任选地其中所述经化学修饰的双链核酸分子针对这样的序列：其包含选自表1或2中序列的序列的至少12个连续核苷酸。16.权利要求14至15中任一项所述的免疫调节组合物，其中所述经化学修饰的双链核酸分子包含至少一个2
’‑
O
‑
甲基修饰和/或至少一个2
’‑
氟修饰，以及至少一个硫代磷酸酯修饰。17.权利要求14至16中任一项所述的免疫调节组合物，其中所述针对编码BRD4的基因
的经化...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹姆斯，
申请(专利权)人：菲奥医药公司，
类型：发明
国别省市：