癌症的免疫治疗制造技术

本发明专利技术公开了一种癌症的免疫治疗，还公开了免疫原性调节剂和组合物，包括能够通过降低参与免疫抑制机制的一种或多种基因的表达从而抑制免疫反应的寡核苷酸制剂。

【技术实现步骤摘要】
癌症的免疫治疗分案说明本案是2014年12月2日提交的申请号为201480072760.1，专利技术名称为“癌症的免疫治疗”的中国专利申请的分案申请。交叉引用本申请要求申请号为No.61/910,728的美国临时专利申请的优先权，申请日为2013年12月2日，该文以全文参考形式收入本申请。
本专利技术涉及免疫原性组合物，制备免疫原性组合物的方法，以及将免疫原性组合物用于治疗细胞增值性疾病或传染病的方法，例如，包括癌症和自身免疫疾病。更具体地讲，本专利技术提供了用专门设计成调节参与肿瘤的免疫抑制机制靶基因表达的寡核苷酸处理过的细胞。
技术介绍
免疫治疗是“通过诱导、增强或抑制免疫反应治疗疾病”。被设计成启动或放大免疫反应的免疫治疗是激活免疫治疗，而减弱或抑制免疫反应的免疫治疗被分类成抑制免疫治疗。最近几十年来，癌症的免疫治疗在临床应用中变得日益重要。当今护理标准的主要方法是通过使用重组单克隆抗体(mAbs)的被动免疫治疗。MAbs通过与身体自身的体液免疫反应起作用，包括与相关的关键抗原肿瘤发育结合，并导致适当形式的细胞介导的免疫性，如抗体决定性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。正在兴起的另一类免疫治疗方法基于使用能够破坏肿瘤细胞的细胞。所使用的细胞可以是分离并且体外扩增的患者自身的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)。在某些场合下，TIL能够识别多种肿瘤相关抗原(TAA)，在其他场合下，TIL能够再激活并且在体外扩增，以便识别特定抗原。所述基于TIL的治疗方法一般被称为“过继细胞转移”(ACT)。ACT的进一步开发涉及T-细胞的遗传修饰，以便表达能够识别特定肿瘤相关抗原(TAA)的受体。所述修饰可以诱导特定T-细胞受体(TCR)或嵌合抗原受体(CAR)表达，所述嵌合抗原受体由与CD3/共刺激分子跨膜和细胞质结构域融合的TAA-特异性抗体组成。所述ACT方法还可以被视为被动免疫治疗方法，因为该方法直接作用于肿瘤细胞，而不会引起持续的免疫反应。然而，与mAbs不同，ACT制剂能够完全破坏所述肿瘤细胞，而不是像ADCC那样阻断选定的受体和缓和细胞反应。正在开发多种主动免疫治疗方法，这些方法能够恢复身体自身免疫系统产生抗肿瘤反应的能力。主动免疫治疗剂通常被称作治疗性癌症疫苗，或者简称癌症疫苗。有多种癌症疫苗目前被用于临床试验，而sipuleucell-T成为美国食品及药物管理局(FDA)批准的第一种此类疫苗。有若干类型的癌症疫苗使用不同抗原，具有不同产生的细胞介导的免疫反应机制。一种类型的疫苗基于由肿瘤细胞选择性表达的抗原的肽片段。所述肽单独或者与免疫刺激剂组合使用，免疫刺激剂可以包括佐剂和细胞因子，如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。另一种类型的癌症疫苗基于被用作抗原的修饰过的(例如，亚致死辐射的)肿瘤细胞，同样是与免疫刺激剂组合使用。目前用于临床试验的这类疫苗，同时基于同源(例如，OncoVAX，LipoNova)和异源(例如，Canvaxin，Onyvax-P，GVAX)肿瘤细胞系。另一种类型的癌症疫苗使用树突状细胞。由于其性质，树突状细胞(DC)是“专业”抗原呈递细胞，能够在体内产生强的抗原决定性细胞介导的免疫反应，并且又发治疗性T-细胞。DC-型癌症疫苗通常包括从患者体内分离的或通过培养患者的造血祖细胞或单核细胞体外生产的DCs。DCs被进一步加载肿瘤抗原，并且有时与诸如GM-CSF的免疫刺激剂组合。大量DC-疫苗目前被用于临床试验，第一种由FDA批准的疫苗sipuleucell-T就是基于DC。免疫抑制机制以及对它的缓解治疗方法免疫系统的一个关键生理功能是识别并消除肿瘤细胞，因此，任何肿瘤发展的重要部分都是免疫抑制机制的形成。这些机制一旦形成，就不仅能阻碍天然免疫系统影响肿瘤生长，而且还会限制任何免疫治疗方法对癌症的效力。一种重要的免疫抑制机制涉及免疫抑制途径，有时被称作免疫检查点。所述免疫抑制途径在肿瘤细胞和CD8+细胞毒性T-淋巴细胞之间起着特别重要的作用，包括ACT治疗剂。重要免疫检查点(immunecheckpoints)包括在T-细胞表面表达的抑制受体，如包括CTLA-4，PD1和LAG3。科学和医学界业已认识到减弱免疫检查点的重要性。减轻免疫抑制的一种途径是用专门设计的制剂封闭所述免疫检查点。FDA业已批准了CTLA-4-封闭抗体，易普利姆玛(ipilimumab)。若干种阻断PD1的分子目前处于临床开发中。免疫抑制机制还会对树突状细胞的功能产生负面影响，并因此影响DC-型癌症疫苗的效力。免疫抑制机制能够抑制DC通过MHC-I类分子途径呈递肿瘤抗原，以便启动天然CD8+T-细胞抗肿瘤免疫性。DC中负责免疫抑制机制的重要分子包括泛素连接酶A20和广义的免疫抑制蛋白SOCS1。通过与免疫检查点抑制剂结合，可以增强免疫治疗方法对癌症的治疗效力。多项正在进行的临床前期和临床研究正探索癌症疫苗及其他免疫治疗剂和检查点阻断剂例如，易普利姆玛之间的潜在协同作用。这种组合方法具有导致显著改善临床效果的潜力。然而，癌症免疫治疗剂与检查点抑制剂组合使用存在多种缺陷。例如，检查点阻断剂可能导致免疫自身耐受性的破坏，因此又发新的自身免疫/自身炎症副作用综合症，被称为“免疫相关不利事件”，主要包括皮疹，结肠炎，肝炎和内分泌病(Corsello等，J.Clin.Endocrinol.Metab.，2013，98：1361)。业已报道的检查点抑制剂的毒性特征，不同于业已报道的其他类型抗癌药物的毒性特征。其中包括在多种器官系统中发生的炎症事件，包括皮肤，胃肠，内分泌，肺，肝，眼睛，和神经系统(Hodi，2013，AnnalsofOncology，24：Supp1，i7)。由于上述原因，需要能够与检查点抑制剂以及其他类型溶瘤剂组合使用的新的癌症治疗剂，没有以前报道的有关检查点抑制剂在多种器官系统中产生不利炎症事件的风险。通过用靶定与肿瘤或传染病抑制机制相关的基因的寡核苷酸制剂处理细胞制备的本专利技术的免疫治疗细胞，以及生产所述治疗细胞的方法和用所述生产的治疗细胞治疗疾病的方法，满足了这种长期需求。
技术实现思路
通过与免疫检查点抑制剂结合，可以增强免疫治疗方法治疗细胞增殖性疾病和传染病的效果。癌症疫苗和其他免疫治疗剂及检查点阻断剂之间的多种协同作用，为能够显著改善临床效果的组合方法提供了机会，例如，用于增殖性细胞疾病和免疫疾病治疗。本文所披露的各种本专利技术的实施方案包括包含治疗细胞的组合物，所述治疗细胞是通过体外用寡核苷酸处理细胞获得的，以便调节参与免疫抑制机制的靶基因的表达。所述寡核苷酸制剂可以是反义寡核苷酸(ASO)，包括锁定核酸(LNAs)以及甲氧乙基gapmers等，或siRNA，miRNA，miRNA-抑制剂，吗啉代(morpholino)以及PNA等。所述寡核苷酸优选为自我输送的(sd)RNAi制剂。所述寡核苷酸可以是化学方法修饰的，例如，包括至少一种2-O-甲基修饰，2’-氟修本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫原性组合物，其中，所述组合物包括经一种或多种寡核苷酸修饰成的，能够抑制多种靶基因表达的细胞，其中，所述的靶基因包括至少一种免疫检查点基因。/n

【技术特征摘要】
20131202 US 61/910,7281.一种免疫原性组合物，其中，所述组合物包括经一种或多种寡核苷酸修饰成的，能够抑制多种靶基因表达的细胞，其中，所述的靶基因包括至少一种免疫检查点基因。


2.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述细胞被修饰成能够抑制至少一种免疫检查点基因和至少一种调节基因表达的细胞。


3.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述细胞被修饰成能够抑制参与免疫抑制的多种基因表达的细胞，所述多种基因包括在表1中列出的至少一种靶基因。


4.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述细胞被修饰成能够抑制选自下列一组的多种靶基因表达的细胞：CTLA4，PD1/PDCD1，TGFBR1，TGFRBR2，IL10RA，TP53，BAX，BAK1，CASP8，ADOARA2A，LAG3，HAVCR2，CCL17，CCL22，DLL2，FASLG，CD274，IDO1，ILIORA，JAG1，JAG2，MAPK14，SOCS1，STAT3，TNFAIP3，TYRO3，BTLA，KIR，B7-H3和B7-H4受体。


5.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：亚历克塞·沃尔夫森，亚历克塞·埃利斯耶夫，塔伊西娅·斯穆什克维奇，
申请(专利权)人：菲奥医药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US