用于肝脏中蛋白质表达的重组启动子和载体及其用途制造技术

本文公开了一种重组病毒载体，其包含与编码蛋白质如凝血因子的异源核酸序列可操作组合的肝特异性启动子。还提供了治疗患有凝血障碍如血友病A或血友病B的受试对象的方法。碍如血友病A或血友病B的受试对象的方法。

【技术实现步骤摘要】
TF结合位点、TATA框和转录起始位点(TSS)。在一些实施方案中，HNF1aTF结合位点包含SEQ ID NO:4的第1
‑
12位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第1
‑
12位核苷酸组成；HNF1
‑
1 TF结合位点包含SEQ ID NO:4的第16
‑
23位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第16
‑
23位核苷酸组成；HNF4 TF结合位点包含SEQ ID NO:4的第26
‑
36位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第26
‑
36位核苷酸组成；HNF3a TF结合位点包含SEQ ID NO:4的第39
‑
45位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第39
‑
45位核苷酸组成；HNF1
‑
2 TF结合位点包含SEQ ID NO:4的第48
‑
62位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第48
‑
62位核苷酸组成；HNF3
‑
2 TF结合位点包含SEQ ID NO:4的第65
‑
71位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第65
‑
71位核苷酸组成；HP1 TF结合位点包含SEQ ID NO:4的第75
‑
87位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第75
‑
87位核苷酸组成；TATA框结合位点包含SEQ ID NO:4的第108
‑
114位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第108
‑
114位核苷酸组成；和/或转录起始位点(TSS)包含SEQ ID NO:4的第116
‑
146位核苷酸或由SEQ ID NO:4的第116
‑
146位核苷酸组成。在一些实施方案中，第一应答元件的长度不超过160个核苷酸(如长度不超过150核苷酸，如长度为146个核苷酸)。
[0011]在一些实施方案中，第一应答元件从5
’
到3
’
包含HNF1a TF结合位点、HNF1
‑
1 TF结合位点、HNF4 TF结合位点、HNF3a TF结合位点、HNF1
‑
2 TF结合位点、HNF3
‑
2 TF结合位点、HP1 TF结合位点、TATA框和转录起始位点(TSS)。
[0012]在一些实施方案中，重组核酸分子包含启动子，所述启动子包含SEQ ID NO:4(HCB)所示的核酸序列或与其有至少90％相同性的序列或由如SEQ ID NO:4(HCB)所示的核酸序列或与其有至少90％相同性的序列组成。
[0013]在一些实施方案中，重组核酸分子可包含如上所述的包含第一应答元件的启动子，还可包含第二应答元件。第二应答元件可包括，例如，HSh应答元件(例如，包含如SEQ ID NO:111所示的核苷酸序列，或与其有至少90％相同性的序列或由如SEQ ID NO:111所示的核苷酸序列，或与其有至少90％相同性的序列组成)、5
’
HS应答元件(例如，包含如SEQ ID NO:111的第6
‑
32位核苷酸所示的核苷酸序列，或与其有至少90％相同性序列或由如SEQ ID NO:111的第6
‑
32位核苷酸所示的核苷酸序列，或与其有至少90％相同性序列组成)或3
’
HS应答元件(例如，包含如SEQ ID NO:111的第44
‑
68位核苷酸所示的核苷酸序列，或与其有至少90％相同性的序列或由如SEQ ID NO:111的第44
‑
68位核苷酸所示的核苷酸序列，或与其有至少90％相同性的序列组成)。
[0014]在一些实施方案中，重组核酸分子包含启动子，所述启动子包含如SEQ ID NO:102(HSh
‑
HCB)、SEQ ID NO:104(5
’
HSh
‑
HCB)或SEQ ID NO:103(3
’
HSh
‑
HCB)之一所示的核酸序列，或与SEQ ID NO:102(HSh
‑
HCB)、SEQ ID NO:104(5
’
HSh
‑
HCB)或SEQ ID NO:103(3
’
HSh
‑
HCB)之一有至少90％相同性的序列或由如SEQ ID NO:102(HSh
‑
HCB)、SEQ ID NO:104(5
’
HSh
‑
HCB)或SEQ ID NO:103(3
’
HSh
‑
HCB)之一所示的核酸序列，或与SEQ ID NO:102(HSh
‑
HCB)、SEQ ID NO:104(5
’
HSh
‑
HCB)或SEQ ID NO:103(3
’
HSh
‑
HCB)之一有至少90％相同性的序列组成。在另外的实施方案中，重组核酸分子包含启动子，所述启动子包含如SEQ ID NO:5(短ABP
‑
HP1
‑
God
‑
TSS)、SEQ ID NO:7(ABP
‑
HP1
‑
God
‑
TSS)、SEQ ID NO:105(HSh
‑
SynO
‑
TSS)、SEQ ID NO:106(sHS
‑
SynO
‑
TSS)、SEQ ID NO:107(Agro)、SEQ ID NO:108(HS
‑
SynO
‑
TSS)或SEQ ID NO:112(HNF1
‑
短ABPExact
‑
SynO
‑
TSS
‑
Int)中的任意一者所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:5(短ABP
‑
HP1
‑
God
‑
TSS)、SEQ ID NO:7(ABP
‑
HP1
‑
God
‑
TSS)、SEQ ID NO:
105(HSh
‑
SynO
‑
TSS)、SEQ ID NO:106(sHS
‑
SynO
‑
TSS)、SEQ ID NO:107(Agro)、SEQ ID NO:108(HS
‑
SynO
‑
TSS)或SEQ ID NO:112(HNF1
‑
短ABPExact
‑
SynO
‑
TSS
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的核酸分子，其包含与SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:125、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:126任一具有至少90％相同性的核苷酸序列。2.权利要求1的分离的核酸分子，其包含与SEQ ID NO:11具有至少90％相同性的核苷酸序列。3.权利要求2的分离的核酸分子，其包含SEQ ID NO:11所示的核苷酸序列。4.权利要求1的分离的核酸分子，其包含与SEQ ID NO:12具有至少90％相同性的核苷酸序列。5.权利要求4的分离的核酸分子，其包含SEQ ID NO:12所示的核苷酸序列。6.权利要求1的分离的核酸分子，其包含与SEQ ID NO:125具有至少90％相同性的核苷酸序列。7.权利要求6的分离的核酸分子，其包含SEQ ID NO:125所示的核苷酸序列。8.权利要求1的分离的核酸分子，其包含与SEQ ID NO:2具有至少90％相同性的核苷酸序列。9.权利要求8的分离的核酸分子，其包含SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。10.权利要求1的分离的核酸分子，其包含与SEQ ID NO:126具有至少90％相同性的核苷酸序列。11.权利要求10的分离的核酸分子，其包含SEQ ID NO:126所示的核苷酸序列。12.一种载体，其包含权利要求1
...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：亚特兰大儿童健康护理股份有限公司，
类型：发明
国别省市：