HIV疫苗及其制备和使用方法技术

本发明专利技术提供了用于引发对HIV

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】HIV疫苗及其制备和使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请按照35U.S.C.
§
119(e)的规定要求2019年7月16日提交的美国临时专利申请号62/874,712的权益，该临时专利申请据此全文以引用方式并入本文用于所有目的。
[0003]序列表
[0004]本申请包含序列表，该序列表以ASCII格式以电子方式提交并据此全文以引用方式并入。所述ASCII副本创建于2020年6月30日，名称为1314_PF_SL.txt，大小为449,156字节。

技术介绍

[0005]人类免疫缺陷病毒1型(HIV
‑
1)感染是一种严重的威胁生命的疾病，并且仍然是全世界发病率和死亡率的主要原因之一，在全球有大约3690万人被感染，在美国(US)有110万人被感染(National Center for HIV/AIDS Viral Hepatitis STD&TB Prevention:Division of HIV/AIDS Prevent ion,HIV in the United States and Dependent Areas.2019年1月；UNAIDS,2017Global HIV Statistics.Fact Sheet
‑
7月.2018)。HIV
‑
1感染的联合抗逆转录病毒疗法(cART)通过抑制病毒复制、保持免疫功能和避免发展成AIDS显著改善了发病率和死亡率。然而，尽管有cART，HIVr/>‑
1感染会导致慢性免疫激活和非AIDS相关的发病率和死亡率的风险增加。
[0006]在感染早期，HIV
‑
1整合到记忆簇决定簇4(CD4)T细胞的基因组中，该基因组的一部分形成HIV
‑
1感染细胞的长期存在的储库，尽管用抗逆转录病毒疗法(ART)治疗，该储库仍持续存在(Siliciano等人，Nature Medicine(2003)9(6):727
‑
728)。病毒储库的消除是任何HIV治愈策略的组成部分。基于免疫的疗法可以是HIV治愈或无ART病毒缓解的联合方法的另一组成部分，并且可以包括基于T细胞和抗体的疫苗、抗体和免疫调节剂的被动施用。
[0007]HIV T细胞特异性疫苗的开发主要集中在设计免疫原，其通过解决全球HIV病毒多样性来提供普遍覆盖。HIV
‑
1由4个组(组M、N、O和P)定义。组M内的亚型或进化枝(标记为A
‑
K)和几种交叉进化枝重组形式导致大多数人类疾病。设计解决庞大全球病毒序列多样性的疫苗的策略包括计算机设计的多价镶嵌免疫原，其可捕获潜在T细胞表位内的常见表位变体(Fischer等人，Nat Med,(2007)13(1):100
‑
6)。这些免疫原可表达为全长人工蛋白质或来自具有高度序列保守性的区域的人工重组蛋白质(Ondondo等人，Mol Ther,(2016)24(4):832
‑
42；Barouch等人，Cell,(2013)155(3):531
‑
9)。计算机设计算法的后续迭代开发了一种计算速度更快的基于图形的方法，称为epigraph(Theiler等人，Sci Rep,(2016)6:33987)。这些设计方法可以用于开发单一的全球疫苗，或针对在特定人群和地理区域内循环的进化枝进行调整。然而，这些方法只关注病毒多样性，而没有考虑驱动抗原呈递和T细胞识别的宿主遗传多样性，以及随后出现的免疫驱动的逃逸变体。
[0008]抗原特异性CD4+和CD8+T细胞与急性感染期间病毒血症的控制有关，并且与在没有ART(精英控制者)的情况下保持低病毒载量的个体中疾病进展缓慢和病毒血症控制有
关。抗原特异性T细胞识别在MHC I类和II类分子上呈递的病毒表位。在全基因组关联研究(GWAS)中，人类白细胞抗原(HLA)I类等位基因与HIV控制有关(Fellay等人，Science,2007.317(5840):944
‑
7；International,H.I.V.C.S.等人，Science,(2010)330(6010):1551
‑
7)。这些蛋白质呈递来自序列的抗原肽以诱导效应和记忆T细胞。目前产生HIV
‑
1候选疫苗的方法集中在病毒序列多样性上，而没有充分模拟一系列宿主HLA等位基因的表位生成过程。这种抗原呈递和T细胞引发的复杂过程包括蛋白酶体切割、TAP转运、交叉呈递、MHC结合和肽
‑
MHC复合物稳定以及最终的TCR识别(Yewdell等人，Nat Rev Immunol,(2003)3(12):952
‑
61)。因此，产生T细胞疫苗的现有方法取得的成功有限，例如在一些情况下，每位患者平均仅诱导4次反应(参见例如Priddy等人，Clin Infect Dis(2008)46(11):1769
‑
81；Sekaly等人，J Exp Med.(2008)205(1):7
–
12；以及Iaccino等人，Retrovirology.(2008)5:56)。
[0009]另外，高度变异的病毒诸如HIV
‑
1由于高水平的序列多样性和驱动一些该序列多样性的宿主免疫应答而提供了独特的挑战。适应性免疫反应在驱动HIV
‑
1多样性中的作用已经被充分描述，并且导致病毒序列随着时间变化(Goulder等人，Nature,(2001)412(6844):334
‑
8；Kelleher等人，J Exp Med,(2001)193(3):375
‑
86；Schneidewind等人，J Virol,(2007)81(22):12382
‑
93；Kawashima等人，Nature,(2009)458(7238):641
‑
5；Leslie等人，Nat Med,(2004)10(3):282
‑
9；Phillips等人，Nature,(1991)354(6353):453
‑
9)。大部分该多样性由识别在MHC I类等位基因上呈递的肽表位的细胞毒性T淋巴细胞驱动。在慢性感染期间由这些T细胞应答施加的选择压力导致HIV序列适应。该序列演变驱动个体内和群体中HIV
‑
1的多样性(Kawashima等人，同上；Phillips等人，同上)。另外，病毒序列正在经历突变，使它们能够躲避宿主防御。这些序列可能类似于诱导中枢或外周耐受的自身肽或肽序列。标准疫苗设计方法可能无法解释病毒序列变异，并且可能由于包括可诱导可与自身抗原交叉反应的应答的序列而导致疫苗能力的低效使用。
[0010]疫苗对人类健康的影响怎么强调都不为过。然而，其中大多数是预防性疫苗，在诱导针本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种融合多肽，其包含SEQ ID NO:345
‑
352、357
‑
362、367、373、407
‑
411或422
‑
424中的任一者的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:345
‑
352、357
‑
362、367、373、407
‑
411、422
‑
424和431
‑
435中的任一者至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的序列。2.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述融合蛋白不包含由HIV
‑
1Tat、Rev、Vif、Vpr和/或Vpu基因编码的多肽片段。3.根据权利要求1至2中任一项所述的融合多肽，其中所述融合蛋白不包含1、2、3、4、5个或更多个以下多肽片段：其包含以下项或由以下项组成：(i)与选自1
‑
30、54
‑
127、138
‑
146、370
‑
428和445
‑
500的氨基酸残基位置相对应的HIV
‑
1Gag氨基酸序列或其子序列，其中所述氨基酸位置是就SEQ ID NO:404而言的；(ii)与选自1
‑
63、103
‑
116和155
‑
206的氨基酸残基位置相对应的HIV
‑
1Nef氨基酸序列或其子序列，其中所述氨基酸位置是就SEQ ID NO:405而言的；(iii)与选自1
‑
27、53
‑
58、84
‑
112、138
‑
234、269
‑
474、490
‑
501、611
‑
856的氨基酸残基位置相对应的HIV
‑
1Env氨基酸序列或其子序列，其中所述氨基酸位置是就SEQ ID NO:403而言的；以及/或者(iv)与选自1
‑
55、118
‑
128、321
‑
325、355
‑
366、432
‑
541、607
‑
641、667
‑
682、709
‑
746、828
‑
833、921
‑
930的氨基酸残基位置相对应的HIV
‑
1Pol氨基酸序列或其子序列，其中所述氨基酸位置是就SEQ ID NO:406而言的。4.根据权利要求1至3中任一项所述的融合多肽，其中所述融合蛋白不包含1、2、3、4、5个或更多个以下多肽片段：其包含SEQ ID NO:437
‑
461的HIV
‑
1氨基酸序列或与SEQ ID NO:437
‑
461的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的序列或它们的子序列或者由所述氨基酸序列或所述序列或它们的子序列组成。5.根据权利要求1至4中任一项所述的融合多肽，其中所述融合多肽不包括包含氨基酸序列YMDD(SEQ ID NO:462)或YVDD(SEQ ID NO:463)的HIV
‑
1Pol多肽片段。6.根据权利要求5所述的融合多肽，其中所述融合多肽不包含选自SEQ ID NO:215、216、217、218、219和220的一个或多个氨基酸序列。7.根据权利要求5至6中任一项所述的融合多肽，其中所述融合多肽不包含选自SEQ ID NO:209、210、211、212、213、214、343和344的一个或多个氨基酸序列。8.根据权利要求1至7中任一项所述的融合多肽，其包含N末端信号肽或前导序列。9.根据权利要求8所述的融合多肽，其中所述信号肽或前导序列来自选自由以下项组成的组的源蛋白：集落刺激因子2(CSF2、GM
‑
CSF)、组织型纤溶酶原活化剂(PLAT、t
‑
PA)、C
‑
C基序趋化因子配体7(CCL7、MCP
‑
3)、C
‑
X
‑
C基序趋化因子配体10(CXCL10、IP
‑
10)、连环蛋白β1(CTNNB1)、CD74(p33；DHLAG；HLADG；Ia
‑
GAMMA、不变链)、血清白蛋白(ALB)、聚泛素B/C(UBB/UBC)、钙网蛋白(CALR)、水疱性口炎病毒G蛋白(VSV
‑
G)、溶酶体相关膜蛋白1(LAMP
‑
1)和溶酶体相关膜蛋白2(LAMP
‑
2)。10.一种多核苷酸，其编码根据权利要求1至9中任一项所述的一种或多种融合多肽。11.根据权利要求10所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包括cDNA、mRNA、自扩增RNA(SAM)、自复制RNA或自扩增复制子RNA(RepRNA)。
12.根据权利要求11所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包括自复制或自扩增甲病毒复制子。13.根据权利要求10至12中任一项所述的多核苷酸，其包含SEQ ID NO:414
‑
418中的任一者的核酸序列或与SEQ ID NO:414
‑
418中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。14.一种脂质纳米颗粒(LNP)，其包含根据权利要求10至13中任一项所述的多核苷酸。15.一种表达盒，其包含根据权利要求10至13中任一项所述的多核苷酸，所述多核苷酸可操作地连接到一个或多个调控序列。16.根据权利要求15所述的表达盒，其中所述多核苷酸可操作地连接到组成型启动子并且受组成型启动子的控制。17.根据权利要求15至16中任一项所述的表达盒，其中所述启动子选自CMV启动子、CAG启动子和EF1a启动子。18.一种载体，其包含根据权利要求10至13中任一项所述的一种或多种多核苷酸或者根据权利要求15至17中任一项所述的表达盒。19.根据权利要求18所述的载体，其中所述载体是质粒载体、细菌载体或病毒载体。20.根据权利要求18至19中任一项所述的载体，其中所述载体是病毒载体。21.根据权利要求18至20中任一项所述的载体，其中所述病毒载体来自DNA病毒或RNA病毒。22.根据权利要求18至21中任一项所述的载体，其中所述病毒载体来自选自由以下项组成的组的病毒：腺病毒、腺相关病毒、沙粒病毒、甲病毒、痘病毒、巨细胞病毒、弹状病毒、水疱性口炎病毒、黄病毒、马拉巴病毒和牛痘病毒。23.根据权利要求18至22中任一项所述的载体，其中所述病毒载体来自选自以下项的分类学家族的病毒：腺病毒科、沙粒病毒科、疱疹病毒科(例如巨细胞病毒)、痘病毒科(例如牛痘病毒，例如修饰的牛痘安卡拉(MVA))、副粘病毒科(例如麻疹病毒)、黄病毒科(例如黄热病病毒)、弹状病毒科(例如水疱性病毒，例如马拉巴水疱性病毒)、披膜病毒科(例如甲病毒)。24.根据权利要求18至23中任一项所述的载体，其中所述病毒载体是选自以下项的沙粒病毒载体：淋巴细胞脉络丛脑膜炎哺乳动物沙粒病毒(LCMV)、卡利哺乳动物沙粒病毒(又名皮秦德哺乳动物沙粒病毒或皮秦德沙粒病毒)、瓜纳里托病毒(GTOV)、胡宁病毒(JUNV)、拉沙病毒(LASV)、卢约病毒(LUJV)、马丘波病毒(MACV)、萨比亚病毒(SABV)和白水阿罗约病毒(WWAV)。25.根据权利要求24所述的载体，其中所述病毒载体是选自以下项的沙粒病毒载体：淋巴细胞脉络丛脑膜炎哺乳动物沙粒病毒(LCMV)或卡利哺乳动物沙粒病毒(又名皮秦德哺乳动物沙粒病毒或皮秦德沙粒病毒)。26.根据权利要求18至23中任一项所述的载体，其中所述病毒载体是人腺病毒或猿腺病毒(例如，黑猩猩腺病毒、大猩猩腺病毒或恒河猴腺病毒)。27.根据权利要求26所述的载体，其中所述病毒载体是选自以下项的腺病毒载体：血清型5腺病毒(Ad5)、血清型26腺病毒(Ad26)、血清型34腺病毒(Ad34)、血清型35腺病毒
(Ad35)、血清型48腺病毒(Ad48)、黑猩猩腺病毒(例如，ChAd3(AdC3)、ChAd5(AdC5)、ChAd6(AdC6)、ChAd7(AdC7)、ChAd8(AdC8)、ChAd9(AdC9)、ChAd10(AdC10)、ChAd11(AdC11)、ChAd17(AdC17)、ChAd16(AdC16)、ChAd19(AdC19)、ChAd20(AdC20)、ChAd22(AdC22)、ChAd24(AdC24)、ChAdY25、ChAd26(AdC26)、ChAd28(AdC28)、ChAd30(AdC30)、ChAd31(AdC31)、ChAd37(AdC37)、ChAd38(AdC38)、ChAd43(AdC43)、ChAd44(AdC44)、ChAd55(AdC55)、ChAd63(AdC63)、ChAdV63、ChAd68(AdC68)、ChAd73(AdC73)、ChAd82(AdC82)、ChAd83(AdC83)、ChAd143(AdC143)、ChAd144(AdC144)、ChAd145(AdC145)、ChAd147(AdC147))、大猩猩腺病毒(例如，GC44、GC45、GC46)和恒河猴腺病毒(例如，RhAd51、RhAd52、RhAd53、RhAd54、RhAd55、RhAd56、RhAd57、RhAd58、RhAd59、RhAd60、RhAd61、RhAd62、RhAd63、RhAd64、RhAd65、RhAd66)。28.根据权利要求18至27中任一项所述的载体，其中所述病毒载体是复制缺陷型的、复制不足型的、复制减弱型的或复制能力型的。29.根据权利要求18至28中任一项所述的载体，其中所述病毒载体是腺病毒载体，所述腺病毒载体包含一种或多种多核苷酸，所述多核苷酸编码一种或多种融合蛋白，所述融合蛋白包含SEQ ID NO:345
‑
377、407
‑
411、422
‑
424、430
‑
435中的任一者的氨基酸序列或与SEQ ID NO:345
‑
377、407
‑
411、422
‑
424、430
‑
435中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。30.根据权利要求18至29中任一项所述的载体，其中所述载体包含两种或更多种多核苷酸，所述多核苷酸编码两种或更多种融合蛋白，所述融合蛋白与以下氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％相同或100％相同：
·
SEQ ID NO:345和346；
·
SEQ ID NO:347和348；
·
SEQ ID NO:349和350；
·
SEQ ID NO:351和352；
·
SEQ ID NO:430和352；
·
SEQ ID NO:357和358；
·
SEQ ID NO:360和362；
·
SEQ ID NO:359和361；
·
SEQ ID NO:351和357；
·
SEQ ID NO:351和358；
·
SEQ ID NO:351和359；
·
SEQ ID NO:351和360；
·
SEQ ID NO:351和361；
·
SEQ ID NO:351和362；
·
SEQ ID NO:351和407；
·
SEQ ID NO:351和408；
·
SEQ ID NO:351和409；
·
SEQ ID NO:351和410；
·
SEQ ID NO:352和357；
·
SEQ ID NO:352和358；
·
SEQ ID NO:352和359；
·
SEQ ID NO:352和360；
·
SEQ ID NO:352和361；
·
SEQ ID NO:352和362；
·
SEQ ID NO:352和407；
·
SEQ ID NO:352和408；
·
SEQ ID NO:352和409；
·
SEQ ID NO:352和410；
·
SEQ ID NO:430和357；
·
SEQ ID NO:430和358；
·
SEQ ID NO:430和359；
·
SEQ ID NO:430和360；
·
SEQ ID NO:430和361；
·
SEQ ID NO:430和362；
·
SEQ ID NO:407和409；
·
SEQ ID NO:407和408；
·
SEQ ID NO:408和410；或者
·
SEQ ID NO:409和410。31.根据权利要求18至30中任一项所述的载体，其还包含编码细胞因子或其功能变体的多核苷酸或者非编码免疫刺激性多核苷酸。32.根据权利要求31所述的载体，其包含编码选自由以下项组成的组的细胞因子的多核苷酸：IL
‑
2、IL
‑
7、IL
‑
12、IL
‑
15、IL
‑
18、IL
‑
21、IFN
‑
α、IFN
‑
γ、GM
‑
CSF、fms相关受体酪氨酸激酶3配体(FLT3LG)以及它们的组合和功能变体。33.根据权利要求31所述的载体，其包含选自以下项的非编码免疫刺激性多核苷酸：病原体活化的分子模式(PAMP)、胞嘧啶
‑
磷酸
‑
鸟苷(CpG)寡聚脱氧核苷酸和免疫刺激性RNA(isRNA，例如CV8102)。34.一种宿主细胞，其包含根据权利要求10至13中任一项所述的一种或多种多核苷酸或者根据权利要求18至33中任一项所述的一种或多种载体。35.根据权利要求34所述的宿主细胞，其中所述一种或多种多核苷酸不整合到所述宿主细胞基因组中，例如是游离型的。36.根据权利要求34所述的宿主细胞，其中所述一种或多种多核苷酸整合到所述宿主细胞基因组中。37.根据权利要求34至36中任一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是哺乳动物细胞，例如人类细胞。38.根据权利要求34至37中任一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是体外的。39.根据权利要求34至37中任一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是体内的。
40.一种免疫原性组合物，其包含根据权利要求1至9中任一项所述的一种或多种融合多肽或者根据权利要求10至13中任一项所述的一种或多种多核苷酸或者根据权利要求18至33中任一项所述的一种或多种载体以及药学上可接受的载剂。41.根据权利要求40所述的免疫原性组合物，其包含根据权利要求1至9中任一项所述的两种或更多种融合多肽或者根据权利要求10至13中任一项所述的两种或更多种多核苷酸或者根据权利要求18至33中任一项所述的两种或更多种载体。42.根据权利要求40至41中任一项所述的免疫原性组合物，其中所述一种或多种多核苷酸是DNA、cDNA、mRNA或自复制RNA。43.根据权利要求40至42中任一项所述的免疫原性组合物，其包含一种或多种腺病毒载体，每种腺病毒载体包含一种或多种多核苷酸，所述多核苷酸编码一种或多种融合蛋白，所述融合蛋白包含SEQ ID NO:345
‑
377、407
‑
411、422
‑
424、430
‑
435中的任一者的氨基酸序列或与SEQ ID NO:345
‑
377、407
‑
411、422
‑
424、430
‑
435中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。44.根据权利要求40至43中任一项所述的免疫原性组合物，其包含一种或多种病毒载体，每种病毒载体包含一种或多种多核苷酸，所述多核苷酸编码两种或更多种融合蛋白，所述融合蛋白与以下氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％相同或100％相同：
·
SEQ ID NO:345和346；
·
SEQ ID NO:347和348；
·
SEQ ID NO:349和350；
·
SEQ ID NO:351和352；
·
SEQ ID NO:430和352；
·
SEQ ID NO:357和358；
·
SEQ ID NO:360和362；
·
SEQ ID NO:359和361；
·
SEQ ID NO:351和357；
·
SEQ ID NO:351和358；
·
SEQ ID NO:351和359；
·
SEQ ID NO:351和360；
·
SEQ ID NO:351和361；
·
SEQ ID NO:351和362；
·
SEQ ID NO:351和407；
·
SEQ ID NO:351和408；
·
SEQ ID NO:351和409；
·
SEQ ID NO:351和410；
·
SEQ ID NO:352和357；
·
SEQ ID NO:352和358；
·
SEQ ID NO:352和359；
·
SEQ ID NO:352和360；
·
SEQ ID NO:352和361；
·
SEQ ID NO:352和362；
·
SEQ ID NO:352和407；
·
SEQ ID NO:352和408；
·
SEQ ID NO:352和409；
·
SEQ ID NO:352和410；
·
SEQ ID NO:430和357；
·
SEQ ID NO:430和358；
·
SEQ ID NO:430和359；
·
SEQ ID NO:430和360；
·
SEQ ID NO:430和361；
·
SEQ ID NO:430和362；
·
SEQ ID NO:407和409；
·
SEQ ID NO:407和408；
·
SEQ ID NO:408和410；或者
·
SEQ ID NO:409和410。45.根据权利要求40至43中任一项所述的免疫原性组合物，其包含：1)一种或多种融合多肽，其包含一种或多种编码以下项的多核苷酸或者一种或多种能够表达以下项的载体：SEQ ID NO:351
‑
356和430中的任一者的氨基酸序列或与SEQ ID NO:351
‑
356和430中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的序列；以及2)一种或多种融合多肽，其包含一种或多种编码以下项的多核苷酸或者一种或多种能够表达以下项的载体：SEQ ID NO:357
‑
366和407
‑
410中的任一者的氨基酸序列或与SEQ ID NO:357
‑
366和407
‑
410中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的序列。46.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至9中任一项所述的一种或多种融合多肽或者根据权利要求10至13中任一项所述的一种或多种多核苷酸或者根据权利要求18至33中任一项所述的一种或多种载体以及药学上可接受的载剂。47.根据权利要求46所述的药物组合物，其包含两种或更多种融合多肽、两种或更多种多核苷酸或者两种或更多种载体。48.根据权利要求46至47中任一项所述的药物组合物，其还包含佐剂、免疫刺激剂、洗涤剂、胶束形成剂和油中的一种或多种。49.根据权利要求48所述的药物组合物，其中所述免疫刺激剂选自toll样受体(TLR)激动剂、细胞因子、非编码免疫刺激多核苷酸、抑制性免疫检查点蛋白的抑制剂或刺激性免疫检查点蛋白的刺激剂。50.根据权利要求49所述的药物组合物，其包含编码选自由以下项组成的组的细胞因子的多核苷酸：IL
‑
2、IL
‑
7、IL
‑
12、IL
‑
15、IL
‑
18、IL
‑
21、IFN
‑
α、IFN
‑
γ、GM
‑
CSF、FLT3LG以及它们的组合和功能变体。
51.根据权利要求49所述的药物组合物，其包含选自以下项的非编码免疫刺激性多核苷酸：病原体活化的分子模式(PAMP)、胞嘧啶
‑
磷酸
‑
鸟苷(CpG)寡聚脱氧核苷酸和免疫刺激性RNA(isRNA，例如CV8102)。52.根据权利要求46至51中任一项所述的药物组合物，其被配制用于经由选自由以下项组成的组的途径施用：静脉内、肌内、皮内、皮下和粘膜(例如，颊部、鼻内、直肠内、阴道内)。53.根据权利要求46至52中任一项所述的药物组合物，其被配制为液体。54.根据权利要求46至52中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物被冻干。55.一种试剂盒，其包含一个或多个整体剂量的根据权利要求1至9中任一项所述的一种或多种融合多肽或者根据权利要求10至13中任一项所述的一种或多种多核苷酸或者根据权利要求18至33中任一项所述的一种或多种载体或者根据权利要求40至45中任一项所述的一种或多种免疫原性组合物或者根据权利要求46至54中任一项所述的一种或多种药物组合物。56.根据权利要求55所述的试剂盒，其中所述一个或多个整体剂量在单个容器中。57.根据权利要求55所述的试剂盒，其中所述一个或多个整体剂量在两个或更多个单独的容器中。58.根据权利要求55至57中任一项所述的试剂盒，其包括一个或多个选自由以下项组成的组的容器：小瓶、安瓿和预装注射器。59.根据权利要求55至58中任一项所述的试剂盒，其包含一个或多个容器，所述容器包含所述一种或多种融合多肽、一种或多种多核苷酸或一种或多种载体的水性溶液。60.根据权利要求55至59中任一项所述的试剂盒，其中所述一个或多个整体剂量是相同的。61.根据权利要求55至59中任一项所述的试剂盒，其中所述一个或多个整体剂量是不同的。62.根据权利要求55至61中任一项所述的试剂盒，其包含一个或多个整体剂量的根据权利要求18至33中任一项所述的一种或多种病毒载体，其中所述整体剂量在约103至约10
15
个病毒病灶形成单位(FFU)或噬菌斑形成单位(PFU)或感染单位(IU)或病毒颗粒(vp)的范围内，例如为约104至约107个病毒FFU或PFU或IU或vp，例如约103至约104、105、106、107、108、109、10
10
、10
11
、10
12
、10
13
、10
14
或10
15
个病毒FFU或PFU或IU或vp。63.根据权利要求55至62中任一项所述的试剂盒，其包含根据权利要求1至9中任一项所述的两种或更多种融合多肽或者根据权利要求10至13中任一项所述的两种或更多种多核苷酸或者根据权利要求18至33中任一项所述的两种或更多种载体。64.根据权利要求55至63中任一项所述的试剂盒，其包含一种或多种编码所述融合多肽的多核苷酸或者一种或多种表达所述融合多肽的载体，所述融合多肽包含SEQ ID NO:345
‑
377、411、422
‑
424和430
‑
435中的任一者的氨基酸序列或与345
‑
377、411、422
‑
424和430
‑
435中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的序列或者由所述氨基酸序列或所述序列组成。65.根据权利要求55至64中任一项所述的试剂盒，其包含一种或多种腺病毒载体，每种
腺病毒载体包含一种或多种多核苷酸，所述多核苷酸编码一种或多种融合蛋白，所述融合蛋白包含SEQ ID NO:345
‑
377、407
‑
411、422
‑
424、430
‑
435中的任一者的氨基酸序列或与SEQ ID NO:345
‑
377、407
‑
411、422
‑
424、430
‑
435中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。66.根据权利要求55至65中任一项所述的试剂盒，其包含一种或多种病毒载体，其中每种病毒载体包含两种或更多种多核苷酸，所述多核苷酸编码两种或更多种融合蛋白，所述融合蛋白与以下氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％相同或100％相同：
·
SEQ ID NO:345和346；
·
SEQ ID NO:347和348；
·
SEQ ID NO:349和350；
·
SEQ ID NO:351和352；
·
SEQ ID NO:430和352；
·
SEQ ID NO:357和358；
·
SEQ ID NO:360和362；
·
SEQ ID NO:359和361；
·
SEQ ID NO:351和357；
·
SEQ ID NO:351和358；
·
SEQ ID NO:351和359；
·
SEQ ID NO:351和360；
·
SEQ ID NO:351和361；
·
SEQ ID NO:351和362；
·
SEQ ID NO:351和407；
·
SEQ ID NO:351和408；
·
SEQ ID NO:351和409；
·
SEQ ID NO:351和410；
·
SEQ ID NO:352和357；
·
SEQ ID NO:352和358；
·
SEQ ID NO:352和359；
·
SEQ ID NO:352和360；
·
SEQ ID NO:352和361；
·
SEQ ID NO:352和362；
·
SEQ ID NO:352和407；
·
SEQ ID NO:352和408；
·
SEQ ID NO:352和409；
·
SEQ ID NO:352和410；
·
SEQ ID NO:430和357；
·
SEQ ID NO:430和358；
·
SEQ ID NO:430和359；
·
SEQ ID NO:430和360；
·
SEQ ID NO:430和361；
·
SEQ ID NO:430和362；
·
SEQ ID NO:407和409；
·
SEQ ID NO:407和408；
·
SEQ ID NO:408和410；或者
·
SEQ ID NO:409和410。67.根据权利要求63所述的试剂盒，其包含两种或更多种编码所述融合多肽的多核苷酸或者两种或更多种表达所述融合多肽的载体，所述融合多肽包含：1)SEQ ID NO:351
‑
356和430中的任一者的氨基酸序列或与SEQ ID NO:351
‑
356和430中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的序列；以及2)SEQ ID NO:357
‑
366和407
‑
410中的任一者的氨基酸序列或与SEQ ID NO:357
‑
366和407
‑
410中的任一者至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的序列。68.根据权利要求55至66中任一项所述的试剂盒，其还包含一个或多个整体剂量的一种或多种附加治疗剂。69.根据权利要求68所述的试剂盒，其包含一种或多种活化潜伏性HIV的药剂，例如一种或多种潜伏期逆转剂(LRA)。70.根据权利要求68至69中任一项所述的试剂盒，其包含一种或多种选自由以下项组成的组的LRA：一种或多种toll样受体(TLR)的激动剂或活化剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂、蛋白酶体抑制剂、蛋白激酶C(PKC)活化剂、Smyd2抑制剂、BET
‑
溴结构域4(BRD4)抑制剂、离子霉素、凋亡蛋白抑制剂(IAP)拮抗剂以及胱天蛋白酶(SMAC)第二线粒体衍生的活化剂模拟物。71.根据权利要求68至70中任一项所述的试剂盒，其包含一种或多种toll样受体(TLR)的一种或多种激动剂或活化剂。72.根据权利要求71所述的试剂盒，其中所述TLR激动剂或活化剂选自由TLR2激动剂、TLR3激动剂、TLR4激动剂、TLR5激动剂、TLR7激动剂、TLR8激动剂和TLR9激动剂组成的组。73.根据权利要求71至72中任一项所述的试剂盒，其中所述TLR7激动剂选自由以下项组成的组：GS 9620(维沙莫特)、R848(瑞喹莫特)、DS
‑
0509、LHC
‑
165和TMX
‑
101(咪喹莫特)，并且/或者其中所述TLR8激动剂选自由以下项组成的组：GS
‑
9688、R848(瑞喹莫特)、CV8102(双TLR7/TLR8激动剂)和NKTR
‑
262(双TLR7/TLR8激动剂)。74.根据权利要求71至73中任一项所述的试剂盒，其中所述TLR9激动剂选自由以下项组成的组：AST
‑
008、可比托莫特、CMP
‑
001、IMO
‑
2055、IMO
‑
2125、利尼莫特、MGN
‑
1601、BB
‑
001、BB
‑
006、IMO
‑
3100、IMO
‑
8400、IR
‑
103、IMO
‑
9200、阿格托莫特、DIMS
‑
9054、DV
‑
1079、DV
‑
1179、AZD
‑
1419、来菲莫特(MGN
‑
1703)、CYT
‑
003、CYT
‑
003
‑
QbG10、替索托利莫特和PUL
‑
042。75.根据权利要求68至74中任一项所述的试剂盒，其包含选自以下项的白介素的一种或多种白介素受体激动剂：IL
‑
2、IL
‑
7、IL
‑
12、IL
‑
15、IL
‑
18、IL
‑
21、IFN
‑
α、IFN
‑
γ、GM
‑
CSF、
FLT3LG。76.根据权利要求75所述的试剂盒，其包含选自由以下项组成的组的一种或多种细胞因子：IL
‑
2、IL
‑
7、IL
‑
12、IL
‑
15、IL
‑
18、IL
‑
21、IFN
‑
α、IFN
‑
γ、GM
‑
CSF、FLT3LG以及它们的组合和功能变体。77.根据权利要求68至76中任一项所述的试剂盒，其包含选自由以下项组成的组的受体的激动剂：fms相关酪氨酸激酶3(FLT3)、干扰素基因刺激剂(STING)受体、DExD/H
‑
盒解旋酶58(DDX58；又名RIG
‑
I)、含核苷酸结合寡聚结构域2(NOD2)。78.根据权利要求68至77中任一项所述的试剂盒，其包含选自由以下项组成的组的T细胞抑制性免疫检查点蛋白或受体的抑制剂：CD274(CD274、PDL1、PD
...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘心岸，A，
申请(专利权)人：吉利德科学公司，
类型：发明
国别省市：