抗-PD-1抗体及其使用方法技术

本公开提供了特异性地结合人PD

【技术实现步骤摘要】
抗
‑
PD
‑
1抗体及其使用方法
[0001]本申请是申请日为2016年9月1日和专利技术名称为“抗
‑
PD
‑
1抗体及其使用方法”的201680049891.7号专利技术专利申请的分案申请。
[0002]相关申请
[0003]本申请要求2015年9月1日提交的U.S.临时申请No:62/212,851、2015年9月9日提交的U.S.临时申请No:62/216,043和2015年11月18日提交的U.S.临时申请No:62/257,195的利益，其各自通过引用全文合并于此。
1.

[0004]本公开涉及特异性地结合人PD
‑
1的抗体及使用该抗体的方法。
2.
技术介绍

[0005]蛋白质程序化细胞死亡蛋白1(PD
‑
1)是受体CD28家族的抑制性成员。PD
‑
1在激活的B细胞、T细胞和骨髓细胞上表达(Agata等(1996)Int Immunol 8:765
‑
72；Okazaki等(2002)Curr.Opin.Immunol.14:391779
‑
82；Bennett等(2003)J Immunol 170:711
‑
8)。PD
‑
1是55kDa的I型跨膜蛋白，其是Ig基因超家族的部分且包含膜近侧免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)和膜远侧酪氨酸基转换基序(ITSM)(Thomas,M.L.(1995)J Exp Med 181:1953
‑
6；Vivier,E和Daeron,M(1997)Immunol Today 18:286
‑
91)。已经鉴定了PD
‑
1的两个配体，PD
‑
L1和PD
‑
L2，其显示为在结合PD
‑
1时下调T细胞激活(Freeman等(2000)J Exp Med 192:1027
‑
34；Latchman等(2001)Nat Immunol 2:261
‑
8；Carter等(2002)Eur J Immunol 32:634
‑
43)。PD
‑
L1在多种人癌症中是丰富的(Dong等(2002)Nat.Med.8:787
‑
9)。PD
‑
1和PD
‑
L1之间的相互作用导致肿瘤浸润淋巴细胞的减少、T细胞受体介导的增殖的降低和癌性细胞的免疫逃避(Dong等(2003)J.Mol.Med.81:281
‑
7；Blank等(2005)Cancer Immunol.Immunother.54:307
‑
314；Konishi等(2004)Clin.Cancer Res.10:5094
‑
100)。这种免疫抑制可以通过抑制PD
‑
1与PD
‑
L1的局部相互作用逆转，且该效应在PD
‑
1与PD
‑
L2的相互作用也被阻断时是累加的(Iwai等(2002)Proc.Nat'l.Acad.Sci.USA 99:12293
‑
7；Brown等(2003)J.Immunol.170:1257
‑
66)。
[0006]PD
‑
1是免疫细胞抑制分子。PD
‑
1缺陷动物发生各种自身免疫表型，包括自身免疫性心肌病及伴随关节炎和肾炎的狼疮样综合征(Nishimura等(1999)Immunity 11:141
‑
51；Nishimura等(2001)Science 291:319
‑
22)。另外，PD
‑
1已发现在自身免疫性脑脊髓炎、系统性红斑狼疮、移植物抗宿主病(GVHD)、I型糖尿病和炎风湿性关节炎中发挥作用(Salama等(2003)J Exp Med 198:71
‑
78；Prokunina和Alarcon
‑
Riquelme(2004)Hum Mol Genet 13:R143；Nielsen等(2004)Lupus 13:510)。在鼠B细胞肿瘤系中，PD
‑
1的ITSM显示为对于阻断BCR
‑
介导的Ca
2+
‑
流和下游效应分子的酪氨酸磷酸化是必要的(Okazaki等(2001)PNAS 98:13866
‑
71)。
[0007]鉴于人PD
‑
1在调节免疫反应中的作用，设计为拮抗PD
‑
1信号传导的治疗剂对于治疗涉及PD
‑1‑
介导的免疫抑制的疾病仍然是很有希望的。
3.
技术实现思路

[0008]本公开提供了特异性地结合人和拮抗PD
‑
1功能(例如，PD
‑1‑
介导的免疫抑制)的抗体。还提供了包含这些抗体的药物组合物、编码这些抗体的核酸、用于产生这些抗体的表达载体和宿主细胞及使用这些抗体治疗受试者的方法。本文公开的抗体特别可用于提高响应于抗原(例如，肿瘤抗原或传染病抗原)的T
‑
细胞激活和/或降低Treg
‑
介导的免疫抑制，且因此用于治疗受试者中的癌症或者治疗或预防受试者的传染病。
[0009]因此，在一个方面，本公开提供了抗体或分离的抗体，其包含含有互补决定区CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链可变区和含有互补决定区CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链可变区，其中：(a)CDRH1包含SYGMH(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列；(b)CDRH2包含VIWX1DGSNX2YYADSVX3G(SEQ ID NO:32)的氨基酸序列，其中X1是Y或F；X2是K或E；和X3是K或M；(c)CDRH3包含NX1DX2(SEQ ID NO:33)的氨基酸序列，其中X1是G或V；和X2是H或Y；(d)CDRL1包含RASQSVSSNLA(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列；(e)CDRL2包含GASTRAT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列；和(f)CDRL3包含QQYNNWPRT(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列。
[0010]在某些实施方式中，CDRH2包含选自SEQ ID NO:2和34
‑
36的氨基酸序列。
[0011]在某些实施方式中，CDRH3包含选自SEQ ID NO:3、7和37的氨基酸序列。
[0012]在某些实施方式中，CDRH1、CDRH2和CDRH3分别包含SEQ ID NO:1、2和3；1、2和7；1、2和37；1、34和7；1、35和7；或1、36和7中所示的CDRH1、CDRH2和CDRH3氨基酸序本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含含有互补决定区CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链可变区和含有互补决定区CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链可变区，其中：(a)CDRH1包含SYGMH(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列；(b)CDRH2包含VIWX1DGSNX2YYADSVX3G(SEQ ID NO:32)的氨基酸序列，其中X1是Y或F；X2是K或E；和X3是K或M；(c)CDRH3包含NX1DX2(SEQ ID NO:33)的氨基酸序列，其中X1是G或V；和X2是H或Y；(d)CDRL1包含RASQSVSSNLA(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列；(e)CDRL2包含GASTRAT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列；和(f)CDRL3包含QQYNNWPRT(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列。2.权利要求1所述的分离的抗体，其中CDRH2包含选自SEQ ID NO:2和34
‑
36的氨基酸序列。3.权利要求1或2所述的分离的抗体，其中CDRH3包含选自SEQ ID NO:3、7和37的氨基酸序列。4.权利要求1
‑
3任一项所述的分离的抗体，其中CDRH1、CDRH2和CDRH3分别包含SEQ ID NO:1、2和3；1、2和7；1、2和37；1、34和7；1、35和7；或1、36和7中所示的CDRH1、CDRH2和CDRH3氨基酸序列。5.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含含有互补决定区CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链可变区及含有互补决定区CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链可变区，其中CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2和CDRL3分别包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5和6中所示的氨基酸序列。6.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含含有互补决定区CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链可变区及含有互补决定区CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链可变区，其中CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2和CDRL3分别包含SEQ ID NO:1、2、7、4、5和6中所示的氨基酸序列。7.权利要求1
‑
6任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:49的氨基酸序列的重链可变区。8.权利要求1
‑
6任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有与选自SEQ ID NO:15、17和26
‑
31的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％同一的氨基酸序列的重链可变区。9.权利要求8所述的分离的抗体，其中所述重链可变区包含选自SEQ ID NO:15、17和26
‑
31的氨基酸序列。10.权利要求9所述的分离的抗体，其中所述重链可变区包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列。11.权利要求9所述的分离的抗体，其中所述重链可变区包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列。
12.权利要求10所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:52的氨基酸序列的重链。13.权利要求10所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:54的氨基酸序列的重链。14.权利要求11所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:53的氨基酸序列的重链。15.权利要求11所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的重链。16.权利要求11所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列的重链。17.权利要求1
‑
8任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有源自人IGHV3
‑
33种系序列的氨基酸序列的重链可变区。18.权利要求1
‑
17任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有与SEQ ID NO:16的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％同一的氨基酸序列的轻链可变区。19.权利要求18所述的分离的抗体，其中所述轻链可变区包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列。20.权利要求19所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的轻链。21.权利要求1
‑
18任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有源自人IGKV3
‑
15种系序列的氨基酸序列的轻链可变区。22.权利要求1所述的分离的抗体，其中所述重链可变区和轻链可变区分别包含SEQ ID NO:15和16；17和16；26和16；27和16；28和16；29和16；30和16；或31和16中所示的氨基酸序列。23.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含：(a)含有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的重链可变区，和(b)含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链可变区。24.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含：(a)含有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的重链可变区，和(b)含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链可变区。25.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含含有选自SEQ ID NO:15、17和26
‑
31的氨基酸序列的重链可变区。26.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链可变区。27.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含：(a)含有SEQ ID NO:52的氨基酸序列的重链，和(b)含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的轻链。28.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含：(a)含有SEQ ID NO:53的氨基酸序列的重链，和(b)含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的轻链。
29.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含：(a)含有SEQ ID NO:54的氨基酸序列的重链，和(b)含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的轻链。30.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含：(a)含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的重链，和(b)含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的轻链。31.一种特异性地结合人PD
‑
1的分离的抗体，其包含：(a)含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列的重链，和(b)含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的轻链。32.一种分离的抗体，其与权利要求1
‑
31任一项所述的抗体竞争结合人PD
‑
1。33.一种分离的抗体，其与权利要求1
‑
31任一项所述的抗体结合人PD
‑
1的相同表位。34.权利要求1
‑
33任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体结合由SEQ ID NO:74的残基107
‑
122组成的表位。35.权利要求1
‑
34任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体结合由SEQ ID NO:74的残基5
‑
22组成的表位。36.权利要求1
‑
35任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体结合由SEQ ID NO:74的残基6
‑
15组成的表位。37.权利要求1
‑
36任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体结合由SEQ ID NO:74的残基130
‑
138组成的表位。38.权利要求1
‑
37任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体结合由SEQ ID NO:74的残基106
‑
113组成的表位。39.权利要求1
‑
11、17
‑
26和32
‑
38任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含选自人IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2的重链恒定区。40.权利要求1
‑
11、17
‑
26和32<...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：路德维格癌症研究有限公司纪念斯隆凯特琳癌症中心，
类型：发明
国别省市：