LAG3抗体及其用途制造技术

本申请提供一种与人LAG3特异结合的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分。还提供编码该抗体的核酸分子，以及用于表达该抗体的表达载体、宿主细胞和方法。本申请还提供包含该抗体的免疫交联物、双特异性分子、嵌合抗原受体、和药物组合物，以及使用本申请抗体的治疗方法。以及使用本申请抗体的治疗方法。

【技术实现步骤摘要】
LAG3抗体及其用途
[0001]本申请是2020年6月5日提交的题为“结合LAG3的抗体及其用途”的中国申请CN202010509498.X的分案。


[0002]本申请涉及一种与LAG3特异结合的抗体、及其制备和用途，尤其是其在治疗与LAG3相关的疾病例如癌症、感染性疾病和自身免疫疾病中的用途。

技术介绍

[0003]免疫应答的过程十分复杂，免疫细胞上多种刺激性和/或抑制性分子被活化或去活化，以将免疫应答保持在合适或最优的状态。比如，抑制性受体如PD
‑
1和CTLA
‑
4会上调来平衡刺激性受体的活性，限制免疫细胞的活化，从而防止自身免疫或自身炎症的发生。然而，这种免疫抑制的机制会被肿瘤细胞利用，保护它们自身免受免疫系统的攻击，引起癌症的发生和进展。在外来病原体的感染、尤其是慢性感染的情况下，LAG3也大量表达，引起免疫抑制，导致脓毒症、麻风病、艾滋病等疾病的发生(Bunn PA,Jr.(1998)Seminars in Oncology,25(2suppl 6):1
‑
3)。在临床上已经开发了靶向PD
‑
1和/或CTLA
‑
4的抗体来治疗癌症，但是有很大一部分病人对该治疗没有反应(Topalian SL et al.,(2012)The New England journal of medicine 366:2443
‑
2454)。因而，研发人员又将目标转移到更多的抑制性受体上，例如LAG3(淋巴细胞活化基因3)和TIM3(Anderson AC et al.,(2016)Immunity 44:989
‑
1004)。
[0004]LAG3，又称CD233，是I类跨膜蛋白，结构与CD4较为相似。LAG3最初在活化的T细胞和NK细胞上发现，并被认为对T细胞活化/功能以及NK细胞增殖起到负调节作用(Turnis ME et al.,(2015)European journal of immunology 45:1892
‑
1905)。细胞膜上的LAG3首先形成二聚体，然后稳定结合MHC II类分子，LAG3
‑
MHC II相互作用通过下调抗原依赖性的CD4+和CD8+T细胞刺激而减弱免疫应答。例如，褐色素瘤细胞上的MHC II分子与浸润T细胞表面的LAG3结合，引发T细胞的耗竭(Hemon P et al.,(2011)Journal of immunology 186:5173
‑
5183)。过多的LAG3可以在溶酶体中降解，或通过金属蛋白酶ADAM10和ADAM17而从T细胞表面切除，从而减轻免疫抑制作用(Clayton KL et al.,(2015)Journal of virology 89:3723
‑
3736；Bae J et al.,(2014)Journal of immunology 193:3101
‑
3112；Woo SR et al.,(2010)European journal of immunology 40:1768
‑
1777)。
[0005]LAG3还能与半乳糖凝集素
‑
3或LSECtin结合，分别引起肿瘤微环境中CD8+T细胞的抑制、以及抗原特异效应T细胞的IFNγ分泌抑制(Kouo T et al.,(2015)Cancer Immunol Res.3:412
‑
423；Xu F et al.,(2014)Cancer research 74:3418
‑
3428)。
[0006]另有研究发现，LAG3在静息的调节T细胞(Treg)上组成性地低量表达，而在激活的Treg细胞上高水平表达。LAG3表达是Treg分化和抑制活性最大化所必需的，而MHC II与Treg上LAG3的结合可以抑制树突状细胞的活化和成熟(Huang CT et al.,(2004)Immunity 21:503
‑
513；Liang B et al.,(2008)Journal of immunology 180:5916
‑
5926)。
[0007]从以上可以看出，LAG3的作用是抑制免疫系统，下调免疫应答。研究发现，LAG3与病原体感染的严重程度强烈相关，而肿瘤浸润T细胞上的LAG3高表达可能帮助肿瘤细胞进行免疫逃避(Richter K et al.,(2010)International immunology 22:13
‑
23)。另一方面，LAG3不足可能引发自身免疫疾病的发生和恶化。
[0008]已经开发出拮抗型LAG3抗体，例如MK
‑
4280(Merck，人源化IgG4抗体)和BMS
‑
986016(Relatlimab，Bristol
‑
Myers Squibbm，人源IgG4)，用于实体瘤治疗，包括乳腺癌、肾细胞癌、黑色素瘤、胰腺癌、非小细胞肺癌、成胶质细胞瘤和胃癌等。临床上也在研究LAG3抗体与PD
‑
1/PD
‑
L1抗体的联合使用。拮抗型LAG3抗体还被设计用于靶向并消除自身免疫病人病灶内的LAG3+免疫细胞。例如GSK2831781(GlaxoSmithKline)目前正处于斑块型银屑病治疗的临床试验阶段(Andrews LP et al.,(2017)Immunological Reviews.276(1):80
‑
96)。
[0009]鉴于LAG3对于免疫系统的重要调节作用，领域内需要更多更好的LAG3抗体。

技术实现思路

[0010]本申请提供一种分离的单克隆抗体，例如，与LAG3(例如，人LAG3和猴LAG3)结合的鼠源、人源、嵌合或人源化的单克隆抗体，其与现有技术抗体例如BMS
‑
986016相比，具有相当的人/猴LAG3结合活性、相当或更高的LAG3
‑
MHC II阻断活性、更强的T细胞激活能力、以及相当或更好的体内抗肿瘤活性。
[0011]本申请的抗体可以用于多种应用，包括检测LAG3蛋白、LAG3相关疾病的治疗等。
[0012]因此，在一个方面，本申请涉及一种分离的单克隆抗体(例如，人源化抗体)、或其抗原结合部分，其与LAG3结合，可以含有重链可变区，该重链可变区含有VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，其中，VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区可以分别包含如(1)SEQ ID NOs:1、2和3；(2)SEQ ID NOs:1、2和4；或(3)SEQ ID NOs:21、22和23所示的氨基酸序列；或与上述序列具有至少80％、85％、90％、95％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
[0013]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其与LAG3结合，包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，该轻链可变区包含VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区，其中VH CDR1区、VH CDR2区、VH CDR3区、VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs:21、22、23、24、25和26所示。2.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中，所述重链可变区包含SEQ ID NOs:27、28、29或30所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中，所述轻链可变区包含SEQ ID NOs:31、32、33或34所示的氨基酸序列。4.根据权利要求2所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区和所述轻链可变区分别包含(1)SEQ ID NOs:27和31；(2)SEQ ID NOs:28和32；(3)SEQ ID NOs:29和33；(4)SEQ ID NOs:29和34；(5)SEQ ID NOs:30和33；或(6)SEQ ID NOs:30和34所示的氨基酸序列。5.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，包含重链恒定区和轻链恒定区，其中所述重链恒定区为人IgG1或IgG4恒定区，所述轻链恒定区为人κ恒定区。6.根据权利要求5所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述重链恒定区包含SEQ ID NO:35所示的氨基酸序列，所述轻链恒定区包含SEQ ID NO:36所示的氨基酸序列。7.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其(a)与人LAG3结合；(b)与猴LAG3结合；(c)不与小鼠LAG3结合；(d)阻断LAG3
‑
MHC II复合体相互作用；(e)促进T细胞激活；和/或(f)具有体内抗肿瘤效果。8.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其为鼠源、嵌合或人源化...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡稳奇，李江美，李锋，
申请(专利权)人：北京华放天实生物制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：